Síntesis de proteínas

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1 Síntesis de proteínas Requerimientos: mrna Aa-tRNA ribosomas Ribosomas Actividad peptidiltransferasa Plataforma donde se realiza la síntesis proteica Subunidad mayor: 3 ARNr y 49 proteínas Subunidad menor: 1 ARNr y 33 proteínas Salida del péptido recién sintetizado 1

2 2 Composición del ribosoma

3 El adaptador molecular: brazo aceptor el ARNt anticodón 3

4 Cargado de los ARNt Cada ARNt es reconocido por una AMINOACIL-tRNA-SINTETASA específica Estas enzimas reconocen el Aa correcto y el ARNt correcto Requerimientos 20 aminoácidos aminoacyl-trna synthetases trnas ATP, Mg 2+ GLn-tRNA Aminoacil-tRNA-sintetasa (tipo I) 4

5 Cargado de los ARNt Reacción en dos pasos: 1. La enzima une al Aa consumiendo 1 ATP 2. La enzima une al ARNt y le transfiere el Aa Requerimientos 20 aminoácidos aminoacyl-trna syntetasas trnas ATP, Mg 2+ 5

6 La traducción es un proceso de decodificación en dos pasos: 1 Cargado de los ARNt 6

7 La traducción es un proceso de decodificación en dos pasos: 2 Reconocimiento Codón-Anticodón 7

8 Iniciación traduccional procariotas Reunir los elementos necesarios Reconocer el sitio de inicio (AUG) Proveer sitios para que se inicie la elongación 8

9 9 El primer aminoácido

10 Iniciación traduccional procariotas Requerimientos mrna trna met codón de iniciación 2 subunidades ribosomales Factores de iniciación (IF-1, IF-2, IF-3) GTP, Mg 2+ 10

11 11 Iniciación traduccional eucariota

12 Elongación Agregado secuencial de Aa por una actividad peptidil transferasa Traslocación Requerimientos Ribosoma completo (complejo de iniciacion) Aa-tRNAs especificados por cada codon Factores de elongacion (EF-Tu, EF-Ts, EF-G) Actividad peptidil-transferasa (23s) GTP, Mg 2+ Durante la elongación cada Aa-tRNA pasa por tres sitios en enl ribosoma 12

13 13 La elongación eucariota es similar a la bacteriana

14 Enlace peptídico Reacción central de la síntesis proteica. La actividad peptidil-transferasa está en el rrna 23S. El centro catalítico es altamente conservado. La traslocación ocurre luego de la formación del enlace peptídico. 14

15 15

16 Terminación Requerimientos codón de terminación factores de liberación (RF 1, RF 2, RF 3 ) ATP Proceso similar en procariotas y eucariotas. Depende de factores que reconocen codón stop y de hidrólisis de peptidil-trna. 16

17 Acoplamiento Transcripción-traducción en procariotas La traducción en bacterias se inicia sobre transcriptos que aún no terminaron su síntesis. Esta coordinación entre ambos procesos permite una regulación más precisa de la síntesis proteica bacteriana. 17

18 Poliribosomas La traducción simultánea por múltiples ribosomas y su rápido reciclado incrementa la eficiencia de la síntesis proteica. 18

19 19

20 20 Destino celular de las proteínas

21 Antibióticos y síntesis proteica Mayoría son bacteriostáticos. Selectividad debida a diferencias entre ribosomas procariotas y eucariotas. Actúan a diferente nivel en la síntesis proteica. Inhibidores de la iniciación Aminoglicósidos: estreptomicina, kanamicina, gentamicina, neomicina Unión irreversible a rrna16s, bloqueo en complejo 30SmRNA-tRNA 21

22 Inhibidores de la Elongación Tetraciclinas: tetraciclina, minociclina Unión reversible a la subunidad 30S, inhibe la unión del Aa-tRNA Acido Fusídico Unión a EF-G, inhibe la disociación EF-G/GDP Cloramfenicol: Unión a subunidad 50s, inhibe la actividad peptidil-transferasa. Macrolidas: eritromicina, claritromicina Inhibe la translocación.

23 El Papel de la hidrólisis de GTP se hidrolizan 2GTPs por cada aminoácido incorporado. La hidrólisis promueve cambios conformacionales esenciales. Se gastan 4 enlaces fosfato de alta energía por aminoácido incorporado: CARGADO del ARNt-Aa con su aminoácido 1ATP (2 enlaces) / Aa 2N TRADUCCION a. Iniciación 1GTP 1 b. Elongación 2 GTP / Aa 2(N-1) c. Terminación 1 GTP 1 Gasto Total: 4 N * 23

24 24

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