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1 Artisan Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit Nº de catálogo AR179 Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro. Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit ha sido diseñado para su uso en laboratorio con objeto de identificar, por microscopía óptica, las fibras de reticulina en muestras de tejidos. 1-3 Se pueden utilizar muestras (incluidas en parafina) procesadas de la manera habitual. El fijador preferido es formol tamponado neutro. La interpretación clínica de cualquier tinción positiva, o la ausencia de la misma, debe ser complementada por estudios morfológicos con los controles adecuados y debe ser evaluada por un patólogo cualificado dentro del contexto de la historia clínica del paciente y otras pruebas diagnósticas. Todos los reactivos del Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit se han preparado de forma óptima para su uso en el Dako Artisan Staining System y no precisan ni mezcla ni dilución. Resumen y explicación El Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit se emplea para identificar una forma primitiva de tejido conjuntivo denominada reticulina. Este procedimiento se basa en los trabajos de Gomori 1 y Snook, 2,3 y emplea una solución de nitrato de plata amoniacal para teñir las fibras de reticulina presentes en el tejido. A continuación, se reduce la plata para producir una coloración negra de las fibras, que quedan visibles mediante microscopía óptica. Principio del procedimiento La reticulina no se tiñe con hematoxilina ni eosina. El Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit es una modificación de los métodos originales de Gomori y Snook. El Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit ha sido optimizado para uso con el Artisan Staining System. Todos los pasos de tinción van seguidos por pasos de lavado. Tras la tinción, los portaobjetos secados al aire se retiran del instrumento, se aclaran con xileno o un sustituto de xileno y se montan utilizando un medio de montaje adecuado. Los resultados se interpretan con un microscopio óptico estándar. Tejido de control: Hígado, bazo o nodo linfático Reactivos suministrados El Reticulin-Nuclear Fast Red Stain Kit está compuesto por ocho cartuchos de dispensador listos para su uso, que contienen: Permanganato de potasio al 1% Permanganato de potasio en agua desionizada Ácido oxálico al 5% Ácido oxálico en agua desionizada Sulfato férrico de amonio al 2,5% Sulfato férrico de amonio en agua desionizada Nitrato de plata amoniacal Nitrato de plata, hidróxido de amonio e hidróxido de potasio en agua desionizada Formol alcohólico al 30% Formaldehido al 30% en alcohol etílico desnaturalizado Cloruro de oro al 0,2% Cloruro de oro en agua desionizada Tiosulfato de sodio al 5% Tiosulfato de sodio en agua desionizada con antibiótico Rojo nuclear sólido Sulfato de aluminio y rojo nuclear sólido al 0,1% en agua desionizada Los cartuchos de reactivo del sulfato férrico de amonio al 2,5% y del rojo nuclear sólido deben agitarse antes del cebado. Deje que los cartuchos de reactivo de rojo nuclear sólido para reticulina se equilibren a temperatura ambiente antes de su uso. Dako suministra estos reactivos con una formulación óptima para su uso según las instrucciones facilitadas para la tinción en cortes de tejido preparados. Cualquier desviación de los procedimientos recomendados de las pruebas puede invalidar los resultados declarados esperados. ( ) P04305ES_01/AR179/ p. 1/5

2 Material necesario, pero no suministrado 1. Portaobjetos 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (nº de catálogo AR102) Precauciones 1. Para usuarios profesionales. 2. Minimice la contaminación microbiana de los reactivos, ya que es posible que se incrementen las tinciones inespecíficas. 3. Los cartuchos de reactivos pueden contener solución residual tras completar el número de pruebas especificado. 4. El uso de tiempos de incubación o temperaturas diferentes a los especificados puede producir resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio realizado sobre el procedimiento original. 5. Almacene los cartuchos de reactivos en posición vertical cuando no se estén utilizando en el instrumento. 6. Mantenga los cartuchos de reactivos alejados de la luz solar directa y de otras fuentes generadoras de calor. 7. Como norma general, no se permite a los menores de 18 años utilizar este producto. Los usuarios deben ser instruidos meticulosamente en los procedimientos laborales adecuados, las propiedades peligrosas del producto y las instrucciones de seguridad necesarias. Consulte la ficha de datos de seguridad para obtener más información. 8. Utilice el equipo de protección personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel. 9. La solución que no se utilice deberá desecharse con arreglo a las normativas locales, provinciales y nacionales. 10. Puede solicitar la hoja de datos de seguridad que se encuentra disponible para usuarios profesionales. Oxalic Acid 5%: 1-5% Ethanedioic acid, hydrate (1:2) P P303 + P361 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P338 + Ammoniacal Silver Nitrate: 1-5% Potassium hydroxide, 1-5% Silver nitrate, 0.1-1% Ammonia H370 Provoca daños en los órganos. H372 Provoca daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P307 + P311 EN CASO DE exposición: Llamar a un CENTRO DE P P303 + P361 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P338 + ( ) P04305ES_01/AR179/ p. 2/5

3 Alcoholic Formalin 30%: % Ethanol, 10-30% Formaldehyde, 1-5% Methanol H225 Líquido y vapores muy inflamables. H301 + H311 + Tóxico en caso de ingestión, en contacto con la piel o si se inhala. H331 H350 Puede provocar cáncer. H360 Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. H341 Se sospecha que provoca defectos genéticos. H371 Puede provocar daños en los órganos. H335 Puede irritar las vías respiratorias. H336 Puede provocar somnolencia o vértigo. H373 Puede provocar daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. P210 Mantener alejado del calor, superficies calientes, chispas llamas al descubierto y otras fuentes de ignición. No fumar. P241 Utilizar un material eléctrico, de ventilación o de iluminación/antideflagrante. P242 No utilizar herramientas que produzcan chispas. P243 Tomar medidas de precaución contra las descargas electrostáticas. P233 Mantener el recipiente herméticamente cerrado. P271 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P309 + P311 EN CASO DE exposición o malestar: Llamar a un CENTRO DE P P303 + P361 + Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. P302 + P352 + P312 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Llamar un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico si la persona se encuentra mal. P338 + P403 Almacenar en un lugar bien ventilado. P235 Mantener fresco. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- P261 Evitar respirar vapores. P P303 + P361 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P302 + P352 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua/... ( ) P04305ES_01/AR179/ p. 3/5

4 P338 + Atención Sodium Thiosulfate 5%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone Usar guantes de protección. P261 Evitar respirar vapores. P302 + P352 + P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Atención Nuclear Fast Red: 0.1-1% Nuclear Fast Red H373 Puede provocar daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. Almacenamiento Todos los componentes se deben conservar a la temperatura que se indica en la etiqueta. No utilizar después de la fecha de caducidad. Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas, el usuario debe comprobar dichas condiciones. No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto. Por consiguiente, se debe analizar el tejido adecuado como forma de control de dicha verificación. En caso de observarse una coloración inesperada que no pueda ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio o por un almacenamiento incorrecto, póngase en contacto con la Asistencia Técnica de Dako. Procedimiento del instrumento / Procedimiento de tinción Observaciones preliminares Consulte la Guía del usuario del Artisan para conocer las instrucciones detalladas. Cebado de los cartuchos de reactivos Antes de comenzar la tinción, es necesario cebar los cartuchos de reactivos y comprobar que no presenten fugas. Compruebe el cebado de cada cartucho de reactivo siempre que se utilice un nuevo kit y antes del primer ciclo de tinción de la jornada. 1. Sobre una toalla de papel, retire la tapa de envío de color rojo o negro, si existen, del conjunto de dispensación del cartucho de reactivos tirando suavemente del tapón hacia abajo. 2. Para cebar un cartucho de reactivos justo tras la recepción, mantenga el cartucho de reactivos con el conjunto de dispensación apuntando hacia abajo y golpee suavemente el lateral del cartucho de reactivos 2 3 veces a fin de expulsar cualquier burbuja de aire que pueda estar atrapada en el conjunto de dispensación. 3. Comprima y suelte completamente el émbolo 3 4 veces con rapidez, teniendo cuidado de absorber cualquier líquido expulsado con una toalla de papel, una gasa absorbente o un material similar, hasta que se consiga un flujo uniforme. 4. Evite dispensar cantidades de reactivo excesivas durante el cebado. Un cebado excesivo tendrá como resultado una pérdida de reactivo, que provocará que el cartucho de reactivos se agote antes de completar el número de pruebas indicado. 5. Antes de cada uso, los cartuchos de reactivos se han de cebar 1 2 veces, comprobando que se obtenga un flujo uniforme. 6. Manteniendo el cartucho de reactivos en una mano, deslice la guía de montaje de la parte trasera del cartucho de reactivos por las ranuras del tambor de reactivos hasta que el cartucho quede perfectamente colocado. Procedimiento Consulte la sección Informes del procedimiento del software de ordenador Artisan para conocer el procedimiento detallado recomendado. Una vez completada la tinción, los portaobjetos estarán secos. Sumerja los portaobjetos en xileno o sustituto de xileno y monte permanentemente. Nota: El rojo nuclear sólido empezará a precipitarse si se expone a temperaturas frías. Para retirar el precipitado de los portaobjetos terminados, coloque los portaobjetos en agua corriente del grifo hasta eliminar el precipitado. Deshidrate en alcohol, y a continuación sumerja los portaobjetos en xileno o sustituto de xileno y monte permanentemente. Interpretación de la tinción Fibras de reticulina:...negro Fondo:...Rojo Características de resultados Reproducibilidad Se determinó una reproducibilidad intraensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en un instrumento. ( ) P04305ES_01/AR179/ p. 4/5

5 Se determinó una reproducibilidad interensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en tres instrumentos distintos. Solución de problemas Consulte la sección Mantenimiento y solución de problemas de su Guía del usuario del Artisan o póngase en contacto con nuestra asistencia técnica. Referencias 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition. Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition, McGraw-Hill Book Company, New York, New York, Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods is Histotechnology, 1st edition. American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 Edición 08/15 ( ) P04305ES_01/AR179/ p. 5/5

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