Artisan Grocott s Methenamine Silver Stain Kit * Nº de catálogo AR176. Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro.
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- Juan José Bustamante Lozano
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1 Artisan Grocott s Methenamine Silver Stain Kit * Nº de catálogo AR176 Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro. El Grocott s Methenamine Silver (GMS) Stain Kit está diseñado para su uso en laboratorio con objeto de identificar, por microscopía óptica, organismos fúngicos y Pneumocystis jirovecii (conocidos anteriormente como carinii) en muestras de tejidos.1-3 Se pueden utilizar muestras (incluidas en parafina) procesadas de la manera habitual. El fijador preferido es formol tamponado neutro. La interpretación clínica de cualquier tinción positiva, o la ausencia de la misma, debe ser complementada por estudios morfológicos con los controles adecuados y debe ser evaluada por un patólogo cualificado dentro del contexto de la historia clínica del paciente y otras pruebas diagnósticas. Todos los reactivos del GMS Stain Kit se han preparado de forma óptima para su uso en el Dako Artisan Staining System y no precisan ni mezcla ni dilución. *Pendientes patentes de EE.UU. y otros países Resumen y explicación El GMS Stain Kit se emplea para identificar organismos fúngicos en cortes de tejido. Resulta más adecuado para identificar las infecciones fúngicas que las tinciones con hematoxilina y eosina y el ácido periódico Schiff (PAS), en especial en los casos en los que exista un número reducido de organismos. La aplicación más ampliamente utilizada de esta técnica es la identificación de Pneumocystis jirovecii, un hongo oportunista que puede crecer en los pulmones de los pacientes con SIDA. 1 Principio del procedimiento Los organismos fúngicos resultan visibles en preparaciones con hematoxilina y eosina utilizando microscopía óptica. No obstante, se consigue mayor sensibilidad para detectar la presencia de hongos con la aplicación de esta tinción especial. El GMS Stain Kit es una modificación del método de metenamina de plata de Grocott original. 2 El GMS Stain Kit ha sido optimizado para uso con el Artisan Staining System. Todos los pasos de tinción van seguidos por pasos de lavado. Tras la tinción, los portaobjetos secados al aire se retiran del instrumento, se aclaran con xileno o un sustituto de xileno y se montan utilizando un medio de montaje adecuado. Los resultados se interpretan con un microscopio óptico estándar. Tejido de control: Tejido con Aspergillus, Candida o Neumocistis Reactivos suministrados El GMS Stain Kit está compuesto por ocho cartuchos de dispensador listos para su uso, que contienen: Cromato de sodio 10% Cromato de sodio en agua desionizada Ácido perclórico 10% Ácido perclórico en agua desionizada Bisulfito de sodio 1% Bisulfito de sodio en agua desionizada Nitrato de plata 0,21% Nitrato de plata en agua desionizada Borato de metenamina 3% 2,7% metenamina y 0,38% borato de sodio en agua desionizada Cloruro de oro 0,2% Cloruro de oro en agua desionizada Tiosulfato de sodio 2% Tiosulfato de sodio en agua desionizada con 0,05% ProClin 300 Verde claro 0,2% SF verde claro y 0,2% ácido acético en agua desionizada ( ) P04303ES_01/AR176/ p. 1/5
2 Deje que los cartuchos de reactivo de GMS se equilibren a temperatura ambiente antes de su uso. Dako suministra estos reactivos con una formulación óptima para su uso según las instrucciones facilitadas para la tinción en cortes de tejido preparados. Cualquier desviación de los procedimientos recomendados de las pruebas puede invalidar los resultados declarados esperados. Material necesario pero no suministrado 1. Portaobjetos 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (nº de catálogo AR102) Precauciones 1. Para usuarios profesionales. 2. Evite la contaminación microbiana de los reactivos, ya que podrían incrementarse las tinciones inespecíficas. 3. Los cartuchos de reactivos pueden contener solución residual tras completar el número de pruebas especificado. 4. El uso de tiempos de incubación o temperaturas diferentes a los especificados puede producir resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio realizado sobre el procedimiento original. 5. Almacene los cartuchos de reactivos en posición vertical cuando no se estén utilizando en el instrumento. 6. Mantenga los cartuchos de reactivos alejados de la luz solar directa y de otras fuentes generadoras de calor. 7. Como regla general, los menores de 18 años no pueden manipular este producto. Los usuarios deben ser meticulosamente instruidos en el correcto procedimiento, las propiedades peligrosas del producto y las instrucciones de seguridad necesarias. 8. Utilice el equipo de protección personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel. 9. La solución que no se utilice deberá desecharse de acuerdo a las normativas locales, estatales o federales. 10. Puede solicitar la hoja de datos de seguridad que se encuentra disponible para usuarios profesionales. Sodium Chromate 10%: 10-30% cromato de sodio, tetrahidrato H311 + H331 H302 H334 H340 H350 H360 H372 P201 P202 P281 P285 P271 P260 P270 P314 P308 + P313 P342 + P311 P P312 P333 + P313 P338 + Tóxico en contacto con la piel o si se inhala. Nocivo en caso de ingestión. Puede provocar síntomas de alergia o asma o dificultades respiratorias si se inhala. Puede provocar defectos genéticos. Puede provocar cáncer. Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. Provoca daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. Procurarse las instrucciones antes del uso. No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. En caso de ventilación insuficiente, llevar equipo de protección respiratoria. Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. No respirar vapores. No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. Consultar a un médico si la persona se encuentra mal. EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. para respirar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE En caso de síntomas respiratorios: Llamar a un CENTRO DE TOXICOLOGÍA/médico/... EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Llamar un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico si la persona se encuentra mal. En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. inmediatamente a un CENTRO DE ( ) P04303ES_01/AR176/ p. 2/5
3 Perchloric Acid 10%: 5-10% ácido Perclórico H272 Puede agravar un incendio; comburente. H370 Provoca daños en los órganos. P210 Mantener alejado del calor, superficies calientes, chispas llamas al descubierto y otras fuentes de ignición. No fumar. P220 Mantener alejado de la ropa y otros materiales combustibles. P221 Tomar todas las precauciones necesarias para no mezclar con materias combustibles... P260 No respirar vapores. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P307 + P311 EN CASO DE exposición: Llamar a un CENTRO DE para respirar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P338 + inmediatamente a un CENTRO DE Methenamine Borate 3%: 30-60% Borax (B4Na2O7.10H2O), 30-60% metenamina H360 Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. Usar guantes de protección. P308 + P313 EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. P333 + P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- para respirar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE P302 + P352 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. P333 + P313 P338 + En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. inmediatamente a un CENTRO DE ( ) P04303ES_01/AR176/ p. 3/5
4 Atención Sodium Thiosulfate 2%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone Usar guantes de protección. P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. P333 + P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. Almacenamiento Todos los componentes se deben conservar a la temperatura que se indica en la etiqueta. No utilizar después de la fecha de caducidad. Si los reactivos se almacenan bajo condiciones diferentes a las especificadas, dichas condiciones deben ser verificadas por el usuario. No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto. Por consiguiente, se debe analizar el tejido adecuado como forma de control de dicha verificación. En caso de observarse una coloración inesperada que no pueda ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio o por un almacenamiento incorrecto, póngase en contacto con la Asistencia Técnica de Dako. Procedimiento del instrumento / Procedimiento de tinción Observaciones preliminares Consulte la guía del usuario del Artisan para conocer las instrucciones detalladas. Cebado de los cartuchos de reactivos Antes de comenzar la tinción, es necesario cebar los cartuchos de reactivos y comprobar que no presentan fugas. Compruebe el cebado de cada cartucho de reactivo siempre que se utilice un nuevo kit y antes del primer ciclo de tinción de la jornada. 1. Sobre una toalla de papel, retire la tapa de envío de color rojo o negro, si existen, del conjunto de dispensación del cartucho de reactivos tirando suavemente del tapón. 2. Para cebar un cartucho de reactivos tras su primera recepción, mantenga el cartucho de reactivos con el conjunto de dispensación apuntando hacia abajo y golpee suavemente el lateral del cartucho de reactivos 2 3 veces a fin de expulsar cualquier burbuja de aire que pueda estar atrapada en el conjunto de dispensación. 3. Comprima y suelte completamente el émbolo 3 4 veces con rapidez, teniendo cuidado de absorber cualquier líquido expulsado con una toalla de papel, una gasa absorbente, o un material similar, hasta que se consiga un flujo uniforme. 4. Evite dispensar cantidades de reactivo excesivas durante el cebado. Un cebado excesivo tendrá como resultado una pérdida de reactivo, que provocará que el cartucho de reactivos se agote antes de completar el número de pruebas indicado. 5. Antes de cada uso, los cartuchos de reactivos se han de cebar 1 2 veces, comprobando que se obtiene un flujo uniforme. 6. Manteniendo el cartucho de reactivos en una mano, deslice la guía de montaje en la parte trasera del cartucho de reactivos en las ranuras del tambor de reactivos hasta que el cartucho quede perfectamente colocado. Procedimiento Consulte la sección Informes del procedimiento del software del ordenador Artisan para conocer el procedimiento detallado recomendado. Una vez completada la tinción, los portaobjetos estarán secos. Sumerja los portaobjetos en xileno o sustituto de xileno y monte permanentemente. Interpretación de la tinción Hongos:...Negro Pneumocystis:...Negro Fondo:...Verde claro Solución de problemas Consulte la sección Mantenimiento y solución de problemas de su Guía del usuario del Artisan o póngase en contacto con nuestro grupo de asistencia técnica. Características de rendimiento Reproducibilidad Se determinó una reproducibilidad intraensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en un instrumento. Se determinó una reproducibilidad interensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en tres instrumentos distintos. Referencias 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition, McGraw-Hill Book Company, New York, New York, Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods in Histotechnology, 1st edition, American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 ( ) P04303ES_01/AR176/ p. 4/5
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