Control de calidad de productos biológicos.

Transcripción

1 Control de calidad de productos biológicos. CONTROLAR Y ASEGURAR LA CALIDAD La calidad se produce y se asegura Mediante medidas tomadas en el proceso de producción. Para esto se deben cumplir con una serie de requisitos: Personales: cumplir con un patrón de aptitud técnico-profesional Construcciones y locales: de acuerdo a normas internacionales especificadas para cada tipo de producto o planta. Por ej.: contar con barreras para insectos y roedores; plantas de tratamiento de residuos; materiales de construcción; distribución adecuada de ambientes; separación estricta de las secciones de producción de las dependencias de otros del establecimiento; medios de construcción y mecánicos para trabajo en forma estéril ( esterilización del aire por filtración, rayos UV, medios de desinfección, autoclaves, esterilizadores de aire caliente, cabinas de flujo laminar,etc.); control y regulación automática de temperatura. Higiénicos y de Higiene de la producción: Reconocimiento médico regular de los operarios, con exclusión de la producción de los que presenten una enfermedad infecciosa; vestimenta protectora; limitación de visitas; esterilización regular de recipientes y útiles de cultivo; vigilancia sanitaria de los animales, cuarentenas; exclusión de los animales enfermos; etc. Tecnológicos y de organización de la producción: Organización de espacios y tareas; protocolos de producción (preferentemente en sistema cerrado) y trabajo; documentación de la producción (sistematización); identificación inequívoca de las sustancias de partida de la producción, de los productos intermedios y del producto terminado; etc. Medidas de orden y seguridad: Establecer itinerarios para el tránsito de personas; delimitación de funciones de responsabilidad; verificación en el cumplimiento de normas establecidas por el Director responsable; limitación de acceso a zonas de estibaje o restringidas; disposición de cierre de locales de producción, almacén,etc; custodia de llaves; etc. Controles de producción: Comprobación de las materias de producción: 1. Sustancias químicas: análisis de identidad, pureza y riqueza o actividad.

2 2. Animales de producción, incluídos los del suero y material orgánico, incluyendo control sanitario por Médico Veterinario. 3. Estirpes de producción, semillas, líneas celulares,etc. Control de las etapas del producto intermedio: (mediante técnicos de control operativo o colaboradores de la producción) 1. Esterilidad. 2. Identidad de la cepa de producción y del sustrato de multiplicación. 3. Número de gérmenes vivos o título viral. 4. Parámetros químicos ( ph, determinación de concentración de determinados productos, conservadores,etc) 5. Controles de higiene de la producción en las diversas etapas ( por ej. Nro. de gérmenes en el aire) Cierre por el Operador Técnico de Control de Calidad del producto terminado. Comprobación del producto terminado por el Control Estatal: 1. Esterilidad 2. Inocuidad 3. Eficacia y valoración 4. Parámetros químicos Autorización estatal para la salida al mercado. Acondicionamiento y remisión. Con todo esto podemos definir lo que se denomina ORDEN DE CALIDAD, que es un documento sancionado por el Estado en el cual se determinan todos los criterios de calidad y medidas de control esenciales para los medicamentos ( englobando aquí genéricamente los de origen químico y los de origen biológico o biotecnológico). El contenido de la Orden de Calidad para los preparados inmunológicos sobrepasa lo dispuesto para los demás medicamentos, habiendo requisitos particulares para asegurar la producción de estas biológicos. Se exige conocer lo siguiente: Nombre del producto inmunizante Composición cuali-cuantitativa Características ( datos sobre aspecto, olor, sabor, solubilidad,etc) Plazos de conservación y empleo. Descripción de las envolturas externa e interna. Indicación de los procesos laborales sometidos a control especial, y descripción de tales controles.

3 Por ej.: control de cepas de producción y del sustrato de multiplicación, controles bacteriológicos y de otro tipo, de todas las fases de producción, prescripciones y control de inactivación, determinaciones de calidad de los controles de animales de producción y métodos de control recomendados para ellos. Manifestación escrita de las prescripciones de depósito de productos intermedios y terminados. Normas sobre contenido y amplitud de la documentación de producción. Prescripción de tallada de la comprobación estatal. Como forma de expresión de las características de calidad se utilizan medios informativos ( etiquetas, prospectos de empleo, material de difusión, etc) con la debida aprobación estatal. La Orden de Calidad es una disposición obligatoria para el fabricante y el inspector, y contribuye a que las partidas de productos exhiban una calidad uniformemente elevada. Las vacunas y otros preparados inmunológicos deben cumplir con los siguientes requisitos: ESTERILES o AUSENTES DE CONTAMINACION INOCUOS EFICACES Satisfacer las pruebas físico-químicas Los métodos biológicos de comprobación de preparados inmunitarios implican ciertos problemas: 1. Las pruebas son en general muy laboriosas y demandan un tiempo horahombre considerable, lo que influye lógicamente sobre los costos de las mismas. 2. El resultado de la comprobación viene determinado por la calidad del material animal usado. Por lo que se necesita disponer de animales estandarizados y genéticamente controlados. Teniendo como requisito mínimo el de un óptimo estado de salud definido mediante Certificado Veterinario. 3. La comprobación debe realizarse e interpretarse de acuerdo a las pautas propias de la estadística biológica. Sirviendo para determinar la amplitud de las muestras al azar a tomar, para valorar la mecánica de la comprobación y para valorar los resultados de ésta. Efectuadas por métodos biológicos de comprobación, pruebas sobre animales de experimentación o de explotación.

4 Todo esto obliga al controlador de la vacuna a conocer la proporción de los pros y los contras en que se hallan entre sí en el producto final y que fueran determinados en la prueba de las partidas de producto. Tomando como base el cálculo de probabilidades, puede evidenciarse, por ejemplo, que con una prueba de muestras tomadas al azar no puede comprobarse eficazmente la esterilidad e inocuidad de una partida. Sólo con un gran gasto en la comprobación y recurriendo al examen de muchas pruebas tomadas al azar se consigue disminuir aceptablemente la probabilidad de aceptar partidas contaminadas. Por otro lado sólo puede mantenerse bajo el costo de comprobación cuando existe ya una experiencia de años en lo referente a estabilidad de proceso de fabricación y de la inocuidad y la eficacia. No se regatean esfuerzos por reducir el trabajo que supone la comprobación de las partidas de los productos terminados, sin influir negativamente en la validez de los resultados. Por esto el principio más importante es el de la comprobación del material de siembra en las vacunas vivas o muertas, estableciendo pautas rígidas de trabajo con cepas estables, reconocidas y dentro de una zona definida de pases. El número de pases intermedios dependerá de la estabilidad de la cepa destinada a la producción y vendrá expresado en la Orden de Calidad. El Control de Calidad de Productos Biológicos incluye : Normas estrictas de fabricación Inspección de la fabricación Normas para envasado y recipientes. Inspección de producto acabado. 1. Pruebas de identidad 2. Pruebas de esterilidad o ausencia de contaminación 3. Pruebas de actividad, potencia o inmunogenicidad 4. Pruebas de inocuidad ( no específica) 5. Pruebas de toxicidad específica 6. Pruebas de piretógenos 7. Pruebas de estabilidad: térmica y a través del tiempo. 8. Pruebas de reversión: en toxoides o en cepas vivas atenuadas (*) 9. Anafilaxia: prueba la presencia de antígenos sensibilizantes provenientes del medio de cultivo, de origen bovino, en la antoxina purificada y concentrada. Se aplica a toxoides diftérico y tetánico. (**) 10. Prueba de agentes adventicios: Asociados al sustrato de producción, por ejemplo investigación de retrovirus en líneas celulares, virus de la

5 leucosis aviar, etc. Se efectúan en diferentes animales de laboratorio, sustratos celulares, huevos embrionados, pruebas in vitro, etc. 11..Determinaciones físico-químicas: Tasa de aditivos y conservantes Tasa de inactivantes Concentración de adsorbentes y adyuvantes ph Humedad residual Opacidad Contenido de N2 y proteínas Corridas electroforéticas, geles de poliacrilamida,etc (*) Reversión: se efectúa sometiendo el producto a distintas temperaturas, C durante 6 semanas. Luego se inocula SC a cobayos que son pesados al 1, 3 y 5 día después de inoculados, y posteriormente semanalmente durante 3 semanas. No deben mostrar síntomas de intoxicación diftérica o tetánica. (**) Hay pruebas de anafilaxia activa donde los animales (cobayos) se desafían inyectando albúmina bovina. Mientras que en las de anafilaxia pasiva se inocula el suero de los animales vacunados y se desafían con albúmina bovina. Inspección general del producto: muestras, rótulos, prospectos, etc. Condiciones de almacenamiento, fecha de vencimiento. Inspección de la distribución, expedición, cadena de frío. Inspección de licencias de circulación. Pruebas de campo. Evaluaciones clínicas.

6 PRUEBAS O CONTROLES DE ESTERILIDAD O AUSENCIA DE CONTAMINACIÓN Es importante la comprobación desde el material de siembra que requiere y posibilita el ensayo del pool de semillas. Por otra parte la prueba de las partidas producidas a partir del pool de material de siembra puede reducirse sin que ello disminuya la eficacia de la información, ya que no se deberían esperar desviaciones de dicho pool de siembra, siempre que no se produzcan contaminaciones en las respectivas partidas durante el proceso de producción. Esto es aplicable no sólo a este tipo de pruebas sino también para reducir el número de pruebas de comprobación de eficacia y de inocuidad. En la prueba de esterilidad se busca determinar la ausencia de microorganismos con capacidad de reproducirse o multiplicarse en un determinado producto. Por otro lado en una prueba de ausencia de contaminantes se trata de probar la no existencia de otra especie viva que no sea la que constituye el preparado biológico en sí.( por ej. vacunas con bacterias o virus atenuados) Para lograr esto es necesario cumplir determinadas condiciones: Ensayar un número razonable de muestras que permita la detección de la contaminación, que por lo general debe ser elevado para que sea estadísticamente representativo y permita y la determinación de la contaminación en un lote. Que la contaminación esté presente en un alto porcentaje. Se debe efectuar sobre producto final y en control de proceso. Este gráfico nos permite ver el número de unidades que deberíamos ensayar para lograr con certeza eficacia en el control: Amplitud de la muestra al azar P=90% P=95% P=99% Grado de contaminación de la partida en %

7 Este cuadro nos muestra el tamaño de la muestra a tomar y el grado de contaminación de la partida para poder probar contaminación con probabilidad de %. En las partidas pequeñas existe la probabilidad de declarar estéril, lo que en realidad no lo es. Muestreo: Producto terminado a granel: 10 ml Producto final: 1 ml de cada recipiente o todo si es < de 1ml; la máxima dosis si es > a 1ml, peor nunca más de 10 ml. Número de recipientes a ensayar: no menos de 20 ni más de 200. Lote constituido por < de 500 unidades : 10 recipientes Lote 100 unidades: 10 %. Fórmula aconsejada por OMS (TRS Nº530) 0,4 N = n donde n : número de recipientes a ensayar y N : número de unidades que componen una partida de producción. Una de las cosas a tener en cuenta es el efecto inhibitorio que pueden tener en la prueba las sustancias adicionadas como preservadores, para los cuales según su naturaleza química existen métodos para eliminarlos. Método directo: por dilución, aumentando la cantidad de medio de cultivo; o colocando un inactivante del conservador. Método indirecto: por filtración del producto y posterior lavado del filtro con inactivantes o diluyentes especiales. Relación inóculo/medio de cultivo: Se debe respetar la utilización de un volumen no mayor de 10 a 100 veces. Medios de cultivo: Caldo tripticasa soya, Caldo fluido de tioglicolato. Incubando durante 14 días a dos temperarturas: 22 ó 28 ºC y 37ºC. Relación volumen de medio- producto-recipiente: 10 ml 1 ml ml 40 ml 5 ml ml +50ml 10 ml 125 ml Controles : - de medios - de ambiente - de operación - de material Medios turbios por producto: resembrar a los 3 a 5 días post- inoculación.

8 Interpretación de resultados: 1. Ninguna contaminación: SATISFACTORIO 2. desarrollo en cualquier tubo: repetición con doble número de muestras. Desarrollo (+): RECHAZADO Desarrollo (-): APROBADO Este tipo de controles se debe realizar no solamente en los productos sino que también debe realizarse como Control de operación de envase, dos veces al año pasando medio de cultivo apropiado por el circuito de envase. A tal fin se envasan como mínimo 1000 unidades con medio nutritivo y se incuban 14 días en estufa a 37ºC. No debe aparecer más del 0,3% de contaminación.