TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS CON IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA Y VETERINARIA

Transcripción

1 AMPAVE TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS CON IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA Y VETERINARIA Roger Iván Rodríguez Vivas Editor 2015

2 TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS CON IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA Y VETERINARIA Roger Iván Rodríguez Vivas MVZ, MSc, PhD. Editor de la edición Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad Autónoma de Yucatán, Laboratorio de Parasitología ~ I ~

3 Técnicas para el diagnóstico de parásitos con importancia en salud pública y veterinaria Primera edición electrónica, Vol. Único. 20 de mayo del 2015 Inscrito en el Registro Público del Derecho de Autor. CD-ROM Certificado: Prohibida la reproducción total o parcial por cualquier medio sin la autorización escrita del titular de los derechos patrimoniales Impreso y hecho en México. Diseño de portada y diseño editoral: Dr. Roger Iván Rodríguez Vivas Integración electrónica: Dr. Carlos Agustín Vega y Murguía Editor: Dr. Roger Iván Rodríguez Vivas. Profesor titular de tiempo completo de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad Autónoma de Yucatán. Miembro del Sistema Nacional de Investigadores de México, nivel III. El contenido de cada capítulo es responsabilidad de sus autores ~ II ~

4 AUTORES DE LOS CAPÍTULOS AUTOR Dr. Armando Aguilar Caballero Dra. Yazmín Alcalá Canto INSTITUCIÓN DE AFILIACIÓN Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Dr. Miguel Ángel Alonso Díaz Centro de Enseñanza, Investigación y Extensión en Ganadería Tropical. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Dr. Jesús Antonio Álvarez Martínez Dr. Manuel Emilio Bolio González Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Departamento de Salud Animal y Medicina Preventiva. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. M. en C. José Israel Chan Pérez Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. QFB. María Teresa Corona Souza Laboratorio de Inmunoparasitología, Coordinación de Investigaciones Inmunológicas. Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos, Secretaría de Salud. ~ III ~

5 Dra. Irene Cruz Mendoza Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Dr. Carlos Cruz Vázquez División de Estudios de Posgrado e Investigación. Instituto Tecnológico El Llano Aguascalientes /DGEST-SEP. Dr. Jorge Luis de la Rosa Arana Laboratorio de Inmunoparasitología, Coordinación de Investigaciones Inmunológicas. Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos, Secretaría de Salud. M. en C. Lisandro Encalada Mena Escuela Superior de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma de Campeche. M. en C. Ismael Escutia Sánchez Dirección General de Inocuidad Agroalimentaria, Acuícola y Pesquera SENASICA. SAGARPA. Dr. Juan Antonio Figueroa Castillo Dr. Julio Vicente Figueroa Millán MesSV. Cristina Guerrero Molina Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. M. en C. Carlos Jasso Villazul Centro Nacional de Servicios de Constatación en Salud Animal. SENASICA, SAGARPA. M. en C. Enrique Liébano Hernández Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Dra. María Eugenia López Arellano Centro Nacional de Investigaciones Disciplinarias en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. ~ IV ~

6 M. en C. Martín López Rojas Corazón del Camino Blanco, A.C. M. en C. Francisco Martínez Ibáñez Centro Nacional de Servicios de Constatación en Salud Animal. SENASICA, SAGARPA. Departamento de Ectoparásitos y Dípteros. Dr. Pablo Martínez Labat Facultad de Estudios Superiores, Cuautitlán. Universidad Nacional Autónoma de México. QFB. Ana Rosa Méndez Cruz Laboratorio de Inmunoparasitología, Coordinación de Investigaciones Inmunológicas. Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos, Secretaría de Salud. MVZ. Salvador Neri Orantes Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria. SENASICA, SAGARPA. M. en C. Melina Maribel Ojeda Chi Laboratorio de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. Dra. Nadia Florencia Ojeda Robertos Biol. Jorge Osorio Miranda División Académica de Ciencias. Universidad Juarez Autónoma de Tabasco. Centro Nacional de Servicios de Constatación en Salud Animal. SENASICA, SAGARPA. Dr. Adalberto A. Pérez de León Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory. ARS, USDA. Kerrville, Texas, USA. Dra. María Teresa Quintero Martínez Laboratorio de Entomología del Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México. Biól. Gabriel Ramírez Vargas Centro Nacional de Investigaciones Disciplinarias en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. ~ V ~

7 MVZ. Alberto Ramírez Guadarrama Dr. Roger Iván Rodríguez Vivas Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autónoma de México. Laboratorio de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán M. en C. Carmen Rojas Martínez Centro Nacional de Investigaciones Disciplinarias en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Dra. Evangelina Romero Callejas Dr. José Alberto Rosado Aguilar Departamento de Parasitología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. M. en C. Noé Soberanes Céspedes Lapisa Salud Animal. Dr. Juan Felipe de Jesús Torres Acosta Dr. Juan José Vargas Magaña Dr. Carlos A. Vega y Murguía Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad Autónoma de Yucatán. Escuela Superior de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma de Campeche. Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Parasitología Veterinaria. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Dr. Santiago Vergara Pineda Facultad de Ciencias Naturales de la Universidad Autónoma de Querétaro. Dr. Juan José Zárate Ramos Departamento de Parasitología Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Nuevo León. ~ VI ~

8 PREFACIO El Comité de Parasitología y Parasiticidas (CPP) del Consejo Técnico Consultivo Nacional de Sanidad Animal (CONASA) y la Asociación Mexicana de Parasitólogos Veterinarios A.C. (AMPAVE), han tenido a bien publicar el libro "Técnicas para el diagnóstico de parásitos con importancia en la salud pública y veterinaria". Este libro incluye los procedimientos y la metodología empleados para la identificación de parásitos: protozoarios, helmintos y artrópodos de importancia en la salud animal y pública. Durante los dos últimos años el CPP del CONASA acordó los temas a incluir e invitó a parasitólogos de todo el país, miembros de la AMPAVE a colaborar. A todos ellos una felicitación por su esfuerzo que ha concluido con la publicación de este libro que estamos seguros será de gran beneficio para la parasitología veterinaria y la salud pública del país. Dra. Consuelo Almazán García, presidenta de la AMPAVE Dr. Juan Joel Mosqueda, presidente actual de la AMPAVE ~ VII ~

9 PRÓLOGO La Parasitología es una rama de la Biología que trata el estudio integral del fenómeno del parasitismo, las relaciones existentes entre el parásito y el hospedero, así como los factores ambientales que influyen sobre esta comunidad. El reconocimiento de los parásitos y las enfermedades parasitarias depende en gran parte de los procedimientos diagnósticos de laboratorio y de campo que sirven para establecer, confirmar o descartar los diagnósticos presuntivos realizados durante el examen clínico. El diagnóstico de las enfermedades parasitarias depende principalmente del examen de las heces, orina, sangre, esputo y tejidos. Este diagnóstico de laboratorio será un elemento para que los profesionistas de la Parasitología, junto con los antecedentes y el estudio clínico-epidemiológico del caso, establezcan el diagnóstico definitivo que orientará al establecimiento de los programas de prevención y control del parasitismo. Existen en la literatura Mexicana y a nivel mundial, muchos textos sobre técnicas Parasitológicas para el diagnóstico de enfermedades en los animales y en el ser humano; sin embargo, muchos de ellos carecen de información actualizada, diagramas, ilustraciones, taxonomía, nomenclatura, etc. Por estas razones, en el seno de la Comisión de Parasitología y Parasiticidas del Consejo Técnico Consultivo Nacional de Sanidad Animal (CONASA), así como de la Asociación Mexicana de Parasitólogos Veterinarios, A.C., se gestó la idea de elaborar el presente libro denominado " TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS CON IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA Y VETERINARIA". Este libro tiene como propósito proveer al lector una guía estandarizada sobre las técnicas de laboratorio y de campo para el diagnóstico de los parásitos internos y externos que afectan a los animales domésticos y silvestres. En esta edición se cuenta con la aportación de 39 expertos mexicanos de 12 reconocidas Instituciones. Los autores colaboradores de este libro cuentan con una amplia experiencia en el campo de la Parasitología Veterinaria y tienen un destacado reconocimiento a nivel nacional e internacional por sus investigaciones y en la formación de recursos humanos de alto nivel. Muchas de las técnicas diagnósticas presentadas en este libro están basadas en los protocolos establecidos de las campañas de control de enfermedades parasitarias en México. Atentamente Dr. Roger Iván Rodríguez Vivas Coordinador de la edición Mérida, Yucatán, México a Julio de 2014 ~ VIII ~

10 TESTIMONIO DE GRATITUD Un profundo agradecimiento a los autores de los capítulos de este libro, quienes vertieron su gran experiencia en cada una de las técnicas diagnósticas presentadas. Quisera también agradecer a las Instituciones, revistas científicas y personas que proporcionaron esquemas, imágenes y cuadros. Extiendo mi agradecimiento a los integrantes de la Comisión de Parasitología y Parasiticidas del Consejo Técnico Consultivo Nacional de Sanidad Animal (CONASA), así como a la Asociación Mexicana de Parasitólogos Veterinarios, A.C., por ser el grupo que gestó la idea de este libro y por darme la oportunidad y confianza para ser el coordinador general de esta edición. De igual modo a los colegas, Dr. Rodrigo Rosario Cruz, Dr. Rubén Hernández Ortiz, Dr. Alberto Rosado Aguilar, M. en C. Melina Ojeda Chi y M. en C. Luis Carlos Pérez Cogollo, quienes me apoyaron en la revisión exhaustiva de los capítulos y en la edición final del libro. Al M. en C. Franklin Quiñones Avila por el diseño de los animales en la portada. Quisiera manifestar mi profundo agradecimiento a mi esposa Rossana y a mis hijos Lizette e Iván, por el amor y cariño que les tengo, así como por tener la suficiente paciencia y comprensión a mi persona y a mi profesión, especialmente cuando me ven trabajando en la casa, rebándoles tiempo a la convivencia familiar. Por último, al Campus de Ciencias Biológica y Agropecuarias de la Universidad Autónoma de Yucatán por darme la oportunidad de trabajar en esta prestigiada Institución y proporcionarme las facilidades para la edición de este libro. ~ IX ~

11 CONTENIDO Página CAPÍTULO 1. MICROSCOPÍA Introducción Breve reseña histórica Consideraciones especiales Enfoque interpupilar Enfoque ocular Partes del microscopio compuesto moderno Sistema mecánico del microscopio Sistema óptico del microscopio Óptica finita y óptica infinita Estructura de los objetivos Nomenclatura de los objetivos El ocular Sistema de iluminación Fuentes de luz Condensador Diafragma o iris Normas básicas para el cuidado del microscopio Frecuencias en el cuidado del microscopio Cuidados de frecuencia diaria Cuidados de frecuencia mensual Cuidados de frecuencia semestral Procedimientos de limpieza Identificación y solución de los problemas más comunes Sistema de iluminación Sistema mecánico Sistema óptico Sistema operativo Técnicas de microscopia Iluminación de Köhler Iluminación de campo oscuro Iluminación parcial de Rheinberg Observación con luz polarizada Observación con fluorescencia Observación mediante contraste de fases Fotomicrografía Micrometría 38 ~ X ~

12 CAPÍTULO 2. MUESTRAS BIOLÓGICAS Y MUESTREOS Introducción Técnica de colección de pasto Colecta de muestras de heces compuestas en rumiantes y equinos Colecta de muestras para Tritrichomonas foetus y Trichomonas 50 gallinae 2.5. Colecta de ectoparásitos: ácaros, garrapatas, moscas, piojos y pulgas 57 CAPÍTULO 3. EXAMEN COPROPARASITOSCÓPICO Introducción Examen macroscópico Examen microscópico Técnica directa Técnica de flotación Técnica de Faust Técnica de sedimentación (sedimentación múltiple, cualitativa) Técnica de Graham Técnica de McMaster Técnica coproparasitoscópica en cama de pollo Técnica de Kinyoun Técnica de migración larvaria o Baermann Técnica de cultivo larvario Técnicas para el diagnóstico de larvas infectantes de nematodos 117 gastrointestinales Técnica para la limpieza de larvas infectantes de nematodos 117 gastrointestinales por gradientes de densidad con sacarosa Identificación de larvas infectantes de estrongilidos de rumiantes Características morfológicas de las larvas infectantes de rumiantes 120 CAPÍTULO 4. EXAMEN DE LABORATORIO PARA PARÁSITOS DE LA SANGRE 4.1. Introducción Diagnóstico de hemoparásitos: microfilarias y amastigotes del 130 género Leishmania 4.3. Diagnóstico de microfilarias Examen en fresco Capa leucoplaquetaria o capa flogística ( Buffy coat ) Técnica modificada de Knott (método de sedimentación) Técnica de filtración sanguínea Identificación e interpretación de microfilarias Diagnóstico del género Leishmania Diagnóstico de amastigotes de Leishmania spp Improntas de tejido 136 ~ XI ~ 129

13 Punción de ganglios y médula Biopsias de piel Frotis de material subyacente de úlceras Frotis de líquido abdominal Identificación e interpretación de amastigotes de Leishmania spp Diagnóstico de hemoparásitos: protozoarios y rickettsias Interpretación del examen microscópico de frotis sanguíneo 140 CAPÍTULO 5. RECUPERACIÓN DE HELMINTOS A LA NECROPSIA 5.1. Introducción Técnica para la recuperación de helmintos a la necropsia Técnica para recuperar helmintos adultos (nematodos 161 gastrointestinales, nematodos pulmonares y trematodos) a la necropsia Obtención de nematodos del tracto gastrointestinal Obtención de nematodos adultos del sistema respiratorio Obtención de trematodos del hígado Recuperación de nematodos inmaduros del tracto digestivo Técnica para contar nematodos del tracto digestivo, del sistema pulmonar y complejo hepático Técnica para contar nematodos del lumen del tracto 168 gastrointestinal Conteo de larvas de nematodos tisulares en el tracto 169 gastrointestinal Conteo de nematodos del sistema pulmonar y el complejo hepático Identificación de nematodos adultos de los rumiantes Aspectos generales en la identificación Preparación de especímenes Claves para determinar el género de los principales nematodos gastrointestinales Claves para identificar géneros importantes de la familia Trichostrongylidae Claves para identificar géneros importantes de la familia Strongylididae Claves para identificar géneros importantes de la familia Trichuridae Claves para identificar géneros importantes de la familia Chabertiidae Claves para identificar géneros importantes de la familia Oxyuridae Claves para identificar géneros importantes de la familia Ascarididae ~ XII ~

14 Claves para identificar géneros importantes de la familia Ancylostomatidae Claves para identificar géneros importantes de la familia Dictyocaulidae Claves para identificar géneros importantes de la familia Protostrongylidae 5.5. Técnica para medir la longitud y contabilizar el número de huevos in utero de hembras de nematodos gastrointestinales CAPÍTULO 6. TÉCNICAS PARA LA FIJACIÓN, PREPARACIÓN Y PRESERVACIÓN DE PARÁSITOS 6.1. Introducción Recolección de parásitos al examen post mortem Fijación y conservación de parásitos Fijación de trematodos y cestodos para montaje Conservación de parásitos Aclarantes Montaje de parásitos Tinciones de parásitos 208 CAPÍTULO 7. PIOJOS DE IMPORTANCIA VETERINARIA Introducción Clasificación taxonómica de piojos Morfología y ciclo biológico de piojos Claves para subórdenes de piojos Morfología de las diferentes familias de cada suborden Esquemas de piojos de importancia médica veterinaria Imágenes fotográficas de algunos piojos Clave para la determinación de piojos de interés médico y 231 veterinario 7.9. Recomendaciones finales 234 CAPÍTULO 8. PULGAS DE IMPORTANCIA VETERINARIA Introducción Clasificación taxonómica de las pulgas Morfología general de las pulgas Descripción de las principales pulgas que afectan a los animales 241 domésticos Familia Pulicidae Género Ctenocephalides Género Spilopsyllus Género Echidnophaga Género Pulex Género Xenopsylla Género Tunga 250 ~ XIII ~ 200

15 Familia Ceratophyllidae Género Ceratophyllus Género Nosopsyllus 252 CAPÍTULO 9. GARRAPATAS DE IMPORTANCIA VETERINARIA Introducción Metodología para la identificación de garrapatas Definiciones taxonómicas Clave para la identificación de la familia Ixodidae Taxonomía del género Boophilus spp Taxonomía del género Amblyomma spp Taxonomía del género Dermacentor spp Taxonomía del género Anocentor nitens Taxonomía del género Haemaphysalis leporispalustris Taxonomía del género Ixodes scapularis Taxonomía del género Rhipicephalus sanguineus Clave para la identificación de la familia Argasidae Taxonomía del género Argas Taxonomía del género Ornithodoros Taxonomía del género Otobius 303 CAPÍTULO 10. ÁCAROS DE IMPORTANCIA VETERINARIA Introducción Clasificación taxonómica de los ácaros Morfología general de los ácaros Orden Mesostigmata Orden Trombidiformes Orden Sarcoptiformes Descripción de los principales ácaros que afectan a los animales Orden Mesostigmata Familia Macronyssidae Familia Dermanyssidae Familia Halarachnidae Orden Trombidiformes Familia Demodicidae Familia Cheyletidae Familia Trombiculidae Orden Sarcoptiformes Familia Sarcoptidae Familia Psoroptidae Familia Epidermoptidae 326 CAPÍTULO 11. MOSCAS DE IMPORTANCIA VETERINARIA Introducción Clasificación taxonómica de las moscas 334 ~ XIV ~

16 11.3. Morfología general de las moscas Descripción de las principales moscas que afectan a los animales Moscas del suborden Nematocera Familia Psychodidae Familia Ceratopogonidae Familia Culicidae Familia Simuliidae Moscas del suborden Brachicera Familia Tabanidae Familia Calliphoridae Familia Hippoboscidae Familia Muscidae Familia Oestridae Familia Sarcophagidae 350 CAPÍTULO 12. DIAGNÓSTICO DE RESISTENCIA A LOS ANTIPARASITARIOS EN RUMIANTES Introducción Pruebas para determinar la resistencia antihelmíntica Diagnóstico de campo para determinar la resistencia de los nematodos gastrointestinales a los antihelmínticos (prueba de reducción en el conteo de huevos en heces) Pruebas in vitro para el diagnóstico de la resistencia hacia los antihelmínticos Prueba de inhibición de la eclosión de huevos Prueba de inhibición de la migración larval Diagnóstico de laboratorio para determinar la resistencia de las garrapatas a los ixodicidas Prueba de paquete de larvas Prueba de inmersión de larvas Prueba de inmersión de larvas modificada (ivermectina) Prueba de inmersión de adultas Diagnóstico de resistencia a los insecticidas en las moscas Haematobia irritans CAPÍTULO 13. CULTIVO Y MANTENIMIENTO DE PARÁSITOS VIVOS Introducción Protozoarios Cultivo de Eimeria ninakohlyakimovae en células epiteliales 405 intestinales caprinas Cultivo de Babesia spp Cultivo del Trypanosoma theileri Cultivo y mantenimiento de Tritrichomonas foetus 421 ~ XV ~ 404

17 13.3. Helmintos Cultivos de nematodos gastrointestinales v.gr. Haemonchus Coprocultivos del nematodo pulmonar Dictyocaulus viviparus Artrópodos Colonias de garrapatas Colonias de dípteros (moscas) 446 CAPÍTULO 14. TRIQUINOSCOPÍA Y DIGESTIÓN ARTIFICIAL EN TEJIDO PARA EL DIAGNÓSTICO DE TRICHINELLA Introducción Triquinoscopía Fundamento de la triquinoscopía Materiales y equipo Procedimiento Interpretación de los resultados Consideraciones Digestión artificial Fundamento de la digestión artificial Materiales y equipo Procedimiento Interpretación de los resultados Consideraciones 470 APÉNDICE - PREPARACIÓN DE SOLUCIONES PARA ESTUDIOS PARASITOLÓGICOS Introducción Conservadores y fijadores Alcohol etílico al 70% Alcohol etílico glicerinado Dicromato de potasio al 2% Alcohol metílico absoluto Bouin Bouin alcohólico Formol o formalina Formol-aceto-alcohol (F.A.A.) Formol amortiguado al 10% Formol neutro al 4% Schaudinn Solución de mentol Aclarantes Cloral lactofenol de Amann Lactofenol Xilol fenicado Xilol fenicado creosotado 480 ~ XVI ~

18 15.4. Colorantes Azul de lactofenol Azul de metileno Carmín acético Carmín acético según Rausch Carmín bórax Carmín de Semichon Carmín propiónico Fucsina ácida de Gag Fucsina básica Giemsa Hematoxilina de Delafield Hemalumbre de Mayer Horen Paracarmín de Mayer Rojo neutro Tricrómica de Gomori Verde brillante Wright Ziehl-Neelsen modificada Medios de montaje Bálsamo de Canadá Gelatina glicerinada Líquido de Hoyer Otras soluciones Alcohol etílico ácido Alcohol etílico alcalino Dilución de bilis con solución salina fisiológica Jugo gástrico artificial Solución de ácido sulfúrico al 0.1 normal Solución de ácido sulfúrico al 10% Solución de flotación con sacarosa Solución de flotación con cloruro de sodio saturado Solución de flotación con nitrato de sodio Solución de flotación con sulfato de magnesio Solución de flotación con sulfato de zinc Solución de hidróxido de potasio al 10% Solución de hidróxido de sodio al 5% Solución de lugol (solución madre) Solución salina fisiológica al 0.85% 493 ~ XVII ~