Requisito parcial para optar al titulo de Medico Veterinario-UNEFM. AGRADECIMIENTOS

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1 RESUMEN Análisis retrospectivo de ehrlichiosis canina Periodo enero-diciembre 2004 en el consultorio veterinario Pro-Avícola Catia, Municipio Libertador, Distrito Capital, Caracas. Zanfir Daniel La ehrlichiosis canina es una enfermedad infecciosa de alta casuística en el país, considerada zoonotica y emergente, producida por bacterias Gram negativas del orden Rhickettsiales, familia Anaplasmataceae (antes Ricketsiaceae), cuyos vectores principales son las garrapatas marrón (Rhipicephalus sanguineus), pertenecientes a la familia Ixodidae. El presente trabajo tuvo como objetivo principal, determinar la ehrlichiosis, en caninos atendidos en el Consultorio Veterinario Pro-Avícola Catia, municipio Libertador, Caracas, D.C., entre enero y diciembre del 2004, y relacionar la misma con factores de riesgo como: edad, sexo, raza, hábitat y valores hematológicos. En este estudio de un total de 2166 pacientes caninos, se recolectaron un numero de 343 muestras de sangre, que se procesaron para determinar los valores hematológicos y la presencia de hemoparasitos. Para la detección de los microorganismos se empleo la técnica del frotis de capa blanca. Para este estudio se ha determinado una prevalencia de 55,97±2,8%, encontrándose 192 casos positivos. Los microorganismos despistados han sido los siguientes:anaplasma platys (157 casos) con una prevalencia de 45,77% y Ehrlichia canis (54 casos) con una prevalencia de 15,74%. Cabe remarcar la concurrencia de ambas entidades en 19 de los casos encontrados. La ocurrencia de la ehrlichiosis ha sido probada prácticamente en pacientes de todas las edades. Aparentemente los machos (58,3%) se ven mas afectados que las hembras (41,7%). La raza no representa un factor de riesgo real. Se determino que la permanencia a la intemperie, en mayor contacto con el medio ambiente, constituyen factores de riesgo importantes para la transmisión de la ehrlichiosis, siendo el sitio donde las garrapatas vectoras realizan la muda entre sus estadios. En la analítica sanguínea, se destaca la trombocitopenia como acompañante de la ehrlichiosis en 66,67% de los casos. La anemia y la leucopenia también se han hecho presentes en este estudio, con un 27,08% y 24,48% respectivamente. La pancitopenia (3,65%) es alteración típica de la ehrlichiosis crónica. Se recomienda como medida preventiva, un control serologico semestral de todos los perros de las zonas con presencia de garrapatas, con o sin signología, ya que gran parte de los animales infectados son asintomáticos y pueden ser reservorio de rickettsias y un serio problema para la salud. Se deben fomentar estas medidas por ser responsabilidad profesional del médico veterinario a nivel de Salud Animal y Salud Pública. Palabras clave: Ehrlichiosis, prevalencia, zoonosis, garrapata.

2 Requisito parcial para optar al titulo de Medico Veterinario-UNEFM. AGRADECIMIENTOS Al Profesor M.V. Francisco Duno, por haberme dirigido como Profesor tutor, además por su paciencia y el apoyo mostrado durante todo el desarrollo de este trabajo. Al Profesor M.V. José Curiel, por su asesoría en el área epidemiológico del trabajo y su valioso aporte en el análisis de los datos. Al colega M.V. Jorge Luis Tartaret, quien facilito el material practico, objeto de este estudio.

3 INTRODUCCIÓN Las hemoparasitosis en caninos son preocupaciones de reciente data en Venezuela. Los casos han crecido vertiginosamente a lo largo de pocos años y se han tomado en consideración seriamente por su potencial zoonótico. El amplio cuadro de síntomas, que se observo en los primeros casos diagnosticados, corroborado con la variedad de resultados reflejados en la bibliografía, en cuanto a la eficacia terapéutica de distintos protocolos empleados, dieron motivos para profundizar los conocimiento sobre estas enfermedades. 3.1.HISTORIA Ehrlichia canis fue identificada por primera vez en el año 1935, en el Instituto Pasteur de Argelia por Donatien y Lestoquard, tras observar que algunos perros alojados en sus instalaciones e infestados por garrapatas desarrollaban ocasionalmente un proceso febril agudo que cursaba con anemia. En las extensiones sanguíneas de los perros afectados, observaron unos pequeños microorganismos en el interior de los monocitos, creyendo en un principio que se trataba de alguna especie de Rickettsia (Donatien y Lestoquard, 1935). Inicialmente el microorganismo recibió el nombre de Ricketsia canis (Donatien y Lestoquard, 1935). Moshkovskii sustituyó en 1945 ese nombre por el actual de Ehrlichia canis, como reconocimiento a Paul Ehrlich, gran biólogo alemán (Moshkovskii, 1945 citado por Ristic y Huxsoll, 1984).

4 4. Durante la década de los 40, se describieron casos de ehrlichiosis canina en distintos países del centro y sur de Africa y en la India (Ewing, 1969). En América tenemos noticias de la enfermedad a partir del ano 1957, cuando los investigadores Bool y Sutmöller la detectaron en perros de Aruba (Boll y Sütmoller, 1957). La primera descripción de Ehrlichia canis en Estados Unidos se produjo en Oklahoma (Ewing, 1963). En la década de los 60 perros militares británicos sufrieron en Singapur un cuadro agudo de etiología desconocida (Wilkins et al., 1967). Poco después un proceso de características similares apareció en la población canina americana destacada en Vietnam (Huxsoll et al., 1969; Huxsoll et al., 1970a; Huxsoll et al., 1970b;). La enfermedad cursa fundamentalmente con manifestaciones hemorrágicas graves, pancitopenia y emaciación, causando un elevado número de muertes en estas poblaciones (Walker et al., 1970; Nims et al., 1971). El proceso, debido a las dudas surgidas en cuanto a su etiología, recibió diferentes nombres, tales como rickettsiosis canina, tifus canino, fiebre hemorrágica canina, síndrome hemorrágico idiopatico, enfermedad del perro de rastreo y pancitopenia tropical canina, si bien el mas aceptado fue este ultimo (Penissi, 1989). A pesar de que la ehrlichiosis era conocida desde la década de los 30, los investigadores intensificaron su atención en ella tras la aparición de estos brotes epizooticos en perros de las fuerzas armadas y el posterior cultivo de

5 5. E. Canis (Nyindo et al., 1971; Huxsoll, 1990). Más tarde, Ewing et al. (1971), hallo otro tipo de Ehrlichia en perros, la cual parasitaba principalmente los granulocitos, y que parecía idéntica a la que afectaba a los caballos, conocida como Ehrlichia equi. Sin embargo, en 1992 fue admitida como una especie diferente y se la denominó Ehrlichia ewingii (Anderson et al., 1992). En 1978, fue descrita otra Ehrlichia que parasitaba las plaquetas de los perros, y que producía en ellos trombocitopenia cíclica infecciosa, (Harvey et al., 1978). Años más tarde fue denominada E. platys. En Venezuela, Arraga reporta el hallazgo de diversas ehrlichiosis caninas en Maracaibo, Estado Zulia, empezando con el año 1982 (Arraga, 1992). Ehrlichiosis humana. En Japón fue descubierto el primer agente ehrlichial en humanos por Misao y Kobayashi (1955). El síndrome producido por este agente fue llamado fiebre de Sennetsu, el que se asemeja a la mononucleosis. Se le asignó posteriormente el nombre de Ehrlichia sennetsu. Cabe hacer notar que esta especie se encuentra filogenéticamente relacionada con Ehrlichia risticii, causante de la fiebre equina del Potomac y de algunas infecciones en perros (López et al., 2003). Diagnosticada por primera vez, fuera de Asia, en los Estados Unidos en 1986, la ehrlichiosis humana era una enfermedad desconocida hasta el momento, producida por un organismo íntimamente relacionado con E. canis

6 6. (Maeda et al., 1987). En 1990, con motivo de prácticas militares que realizaban en Fuerte Chaffee, Arkansas Occidental, quince miembros de la Guardia Nacional del Estado de Iowa presentaron síntomas parecidos a una rickettsiosis humana transmitida por garrapatas, denominada Fiebre Manchada de las Montañas Rocosas. Los síntomas más frecuentes fueron: fiebre, cefalea, mareos, náuseas y, en algunos casos, erupciones cutáneas. Los organismos causantes fueron aislados e identificados como una nueva especie de Ehrlichia, a la que se denominó E. chaffeensis (Dawson et al., 1991; Anderson et al, 1991). En Venezuela, un país tropical donde la ehrlichiosis es una enfermedad endémica en perros y caballos, el primer caso de ehrlichiosis humana ha sido reportado en una niña de 17 meses de edad (Arraga, 1994). Se establecieron diferentes diagnósticos hasta concluir que era ehrlichiosis. Mediante el test de IFI se detectaron anticuerpos de E. chaffeensis (Arraga et al., 1996). Posteriormente en 1994, se lleva al cabo en Cacaras, un trabajo pionero de ehrlichiosis en animales y humanos, causada por una especie de Ehrlichia trombocitotrópica o trombocítica. En dicho trabajo se analizaron 103 muestras de sangre, evidenciándose diferencias significativas entre los tres grupos estudiados: 1) perros que fueron llevados a clínicas veterinarias, con 32% de positividad; 2) personas que mantienen contacto estrecho con garrapatas y animales con ehrlichiosis, con 45% de positividad;

7 7. 3) personas que manifestaron no tener contacto con animales o garrapatas, con 0% de positividad (grupo control). Las mórulas de Ehrlichia identificadas se encontraron ubicadas en el citoplasma de plaquetas. (Tamí, 1994). En una posterior publicación, se informó de la detección de mórulas en plaquetas mediante el examen de frotis sanguíneo de dos pacientes con un cuadro clínico compatible con la enfermedad. La identificación del ADN del microorganismo, por medio de la PCR, dio bases para pensar que se había identificado en el país una nueva especie propia del ser humano, similar a Ehrlichia platys en caninos (Tamí, 2002). Ha sido sorprendente la rapidez, con la cual se ha difundido y reportado casos de la enfermedad, en los últimos años. Hoy en día, continúan reportándose en Los Estados Unidos, Canadá, Europa, Asia, América de Sur y África (Laboratorios Arriaga, 2004) FAMILIA ANAPLASMATACEAE Los integrantes de esta familia son bacterias intracelulares obligatorias, con especificidad para un solo tipo de célula diana. Dependiendo de la especie de bacterias, los granulocitos, plaquetas, células endoteliales, monocitos, macrófagos, hematíes y células de invertebrados son específicamente infectados (Rikihisa, 2003).

8 8. Taxonomia La clasificación taxonómica de estos microorganismos ha experimentado variaciones a medida que se profundiza en su estudio. En la anterior nomenclatura, la tribu Ehrlichieae se clasificaba dentro de la familia Rickettsiaceae y del orden Rickettsiales (Ristic y Huxsoll, 1984; CDC, 2000). Con los recientes estudios genéticos y moleculares sobre la secuencia genética 16S rrna, se ha sugerido la reorganización etimológica dentro del orden Rhickettsiales. Así mismo Dumler et al. (2001) propone la sustitución del tribu Ehrlichieae por la familia Anaplasmataceae y la reorganización de las ya existentes, resultando 4 géneros: Anaplasma, Neorickettsia, Wolbachia y Ehrlichia. El genero Cowdria, con su única especie Cowdria ruminantium, desaparece, pasando a ser denominada como Ehrlichia ruminantium. El genero Anaplasma reagrupa, de un modo subjetivo, las especies E. phagocytophilum, E.equi y la Ehrlichiosis Granulocitica Humana (EGH) en una sola especie, con el nombre de Anaplasma phagocytophilum (Dumler et al., 2001; Euzeby, 2004) y la especie Ehrlichia platys como Anaplasma platys (Dumler et al., 2001; Arraga et al., 2003; Euzeby, 2004). El genero Neorickettsia se expande, incluyendo las especies E. sennetsu y E. risticii como: Neorickettsia sennetsu y respectivamente Neorickettsia risticii. En el genero Ehrlichia quedan las especies E. canis, E. chaffeensis, E. muris, E. ewingii y E. ruminantium. El genero Wolbachia

9 9. tiene una sola especie W. pipientis (Dumler et al., 2001). Orden Rhickettsiales: -Familia Anaplasmataceae: 1.Genogrupo Ehrlichia, conformado por: Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii Ehrlichia canis Ehrlichia muris Ehrlichia (Cowdria) ruminantium. 2. Genogrupo Anaplasma, constituido por: Anaplasma (Ehrlichia) phagocytophilum: (E. phagocytophila, E. equi, Agente de la Ehrlichiosis Granulocitica Humana (EGH) Anaplasma (Ehrlichia) platys Anaplasma (Ehrlichia) bovis Anaplasma margínale. 3. Genogrupo Neorickettsia, integrado por: Neorickettsia (Ehrlichia) sennetsu Neorickettsia (Ehrlichia) risticii Neorickettsia helmintoeca.

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