Reproducción Asistida
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- Óscar Romero Espinoza
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1 Reproducción Asistida
2 REVISTA IBEROAMERICANA DE COORDINADORA CIENTIFICA DE REPRODUCCION HUMANA Fallos de Implantación Implantation failure Sánchez-Aparicio P. y Ricciarelli E. Clínica de Medicina de la Reproducción y Ginecología, FivMadrid, Madrid, Spain. Resumen La implantación embrionaria es un proceso de extraordinaria complejidad que requiere un embrión competente y un endometrio receptivo, así como el establecimiento de un estrecho dialogo endometrio-embrión. En el campo de la Reproducción Asistida, el Fallo de Implantación (FI) se diagnostica en ausencia de gestación después de al menos tres ciclos de fecundación in vitro (FIV) o transferencia de más de 10 embriones de buena calidad. Las causas del FI son múltiples y no muy bien definidas aunque pueden estar implicados tanto factores embrionarios como maternos; entre ellas, las anomalías cromosómicas embrionarias y las alteraciones maternas uterinas, endocrinas e inmunológicas. Entre las técnicas propuestas para abordar el FI se encuentran: el cultivo prolongado de embriones hasta el estadio de blastocisto, el Hatching Asistido y el Diagnóstico Genético Preimplantacional (DGP). La controversia sobre la eficacia de alguna de estas técnicas así como alternativas futuras se discuten en este artículo. Palabras clave: Implantación. Fallo de Implantación. Procedimientos. Summary Embryonic implantation is a very complex process which requires a competent embryo and a receptive endometry, as well as the establishment of a close endometry-embryo dialogue. In the field of Assisted Reproduction, Implantation Failure (IF) is diagnosed in the absence of pregnancy after three or more in vitro fecundation (IVF) cycles or transfer of more than 10 good quality embryos. The causes of IF are multiple and poorly defined, although both embryonic and maternal factors may be involved, among them embryonic chromosomal anomalies and maternal alterations (uterine, endocrine, immunological). Among the techniques proposed to address IF are: prolonged embryo culture to the blastocyst stage, Assisted Hatching and Preimplantation Genetic Diagnostic (PGD). Controversial arguments regarding some of these procedures as well as future alternative approaches are discussed in this article. Key words: Implantation. Implantation Failure. Procedures. Correspondencia: Paloma Sánchez-Aparicio Paseo de los Olmos, 13- Esc. B 6º D MADRID aparicio@fivmadrid.es Fallos de implantación- 157
3 DEFINICIÓN DEL FALLO DE IMPLANTACIÓN La implantación embrionaria es un proceso complejo que implica tanto al embrión como al endometrio. Una implantación exitosa requiere un embrión competente y un endometrio receptivo; el embrión se fija al endometrio y anida gracias al establecimiento de un eficiente diálogo endometrio-embrión durante la ventana de implantación. El endometrio está sujeto a una estricta regulación hormonal, participando activamente en la implantación embrionaria y asegurando el desarrollo último del embrión. En el campo de la Reproducción Asistida se habla de Fallo de Implantación (FI) en aquellos casos en los que existe ausencia de gestación después de haber realizado tres o más ciclos de fecundación in vitro (FIV) o después de haber transferido en su conjunto un total de 10 embriones de buena calidad (1). El FI constituye un problema de difícil abordaje y plantea serias dificultades sobre los procedimientos a aplicar. CAUSAS DEL FALLO DE IMPLANTACIÓN Las causas del fallo de implantación son múltiples y están poco definidas en la actualidad, aunque lógicamente pueden estar implicados tanto factores embrionarios como maternos. En algunos casos coinciden con las causas del aborto de repetición. Entre las causas descritas para el FI se incluyen las anomalías cromosómicas del embrión así como todo un conjunto de alteraciones maternas. Estas abarcan desde malformaciones uterinas, alteraciones endocrinas, trombofilias, factores inmunológicos (Ac. Antifosfolípidos) y defectos en la fase lútea, hasta determinadas infecciones. Además, se consideran también como asociados al FI, los efectos negativos de determinados protocolos de estimulación, las alteraciones del diálogo endometrio-embrión y las disfunciones de aquellos genes implicados en implantación embrionaria. Asimismo, se ha observado en algunos casos que la deficiencia de moléculas de adhesión como miembros de la superfamilia de las integrinas (2) y mediadores intercelulares como el factor inhibitorio de leucemia (LIF) podría también estar relacionado con el FI (3). Recientemente se ha descrito además como factor de susceptibilidad el polimorfismo del gen supresor tumoral p53 (4) así como la asociación epidemiológica entre el FI y la endometriosis, con una posible correlación inmunológica (5). ESTRATEGIAS PROPUESTAS PARA ABORDAR EL FALLO DE IMPLANTACIÓN Los casos de FI constituyen en la actualidad casos de difícil evaluación en el campo de la Reproducción Asistida. Se han propuesto básicamente tres técnicas que se describen a continuación: 1. Cultivo in vitro de embriones hasta el estadio de blastocisto Este procedimiento propone el cultivo de embriones hasta que estos alcanzan el estadio de blastocisto. El objetivo último del cultivo prolongado de embriones es seleccionar embriones óptimos en una cohorte de embriones. Algunos autores han propuesto además el co-cultivo con otros linajes celulares con el objetivo de mejorar las tasas de implantación tras el cultivo embrionario in vitro (6-7). 2. Hatching Asistido Antes de la implantación en el útero, el embrión sale de la membrana pelúcida, gracias a un proceso denominado hatching o eclosión embrionaria, permitiendo así que el embrión entre en contacto directo con el endometrio. Podría ser que el FI se debiera a la incapacidad del propio embrión de liberarse de la membrana pelúcida. La eclosión del embrión se puede favorecer en el laboratorio y el procedimiento, que se realizó por primera vez en los años 90 (8), se denomina Hatching Asistido. En la actualidad se aplican técnicas mecánicas (punzón), químicas (ácido tirote) así como pulsos de láser para crear un orificio de pequeñas dimensiones en la membrana pelúcida que facilite la salida del embrión (9-10). 3. Diagnóstico Genético Preimplantacional (DGP) La técnica de Diagnóstico Genético Preimplantacional (DGP) tiene como objetivo descartar alteraciones genéticas en embriones antes de ser transferidos al útero materno. Los embriones se biopsian y la carga genética de las células biopsiadas se analiza por técnicas de biología molecular mientras los embriones permanecen en cultivo. El análisis genético de los embriones puede realizarse en estadios muy tempranos o en estadios más avanzados. El estudio en los primeros estadios se realiza a través del análisis del segundo corpúsculo polar que se libera inmediatamente después de la fecundación del ovocito por el espermatozoide. Además, es Fallos de implantación
4 posible llevar a cabo el análisis de los embriones en estadio de 6-8 células o incluso en estadio de blastocisto. El procedimiento más extendido, por ser el más ventajoso, es el estudio genético de embriones en estadio de 6-8 células. En este último caso las células están perfectamente individualizadas y son totipotenciales facilitando, respectivamente, la biopsia de blastómeras y la recuperación de la pérdida de una o dos blastómeras, que es fácilmente compensada. De esta forma, los resultados son suficientemente fiables y los efectos negativos se reducen al mínimo. Las células biopsiadas son posteriormente fijadas y analizadas por técnicas de biología molecular. La utilidad del DGP en el FI es un tema controvertido, existiendo un número creciente de autores que se muestran a favor (11-14) pese a los muchos detractores. La principal objeción es la discrepancia en los resultados obtenidos respecto a la mejora en las tasas de implantación tras DGP así como el principio de cautela para una técnica cuya seguridad, para algunos, no está totalmente demostrada. Platteau y colaboradores han demostrado recientemente que la mayoría de los FI se ven beneficiados del DGP aunque, según los autores, es imprescindible contar con al menos 10 ovocitos en MII, 8 ovocitos fecundados, y 6 embriones finales a biopsiar para obtener buenos resultados de implantación (15). Asimismo, el consorcio de DGP de la ESHRE ha confirmado en la monografía del 2006 su aprobación a la técnica de DGP, como alternativa válida, para aquellas parejas con mal pronóstico en el campo de la Reproducción Asistida (16). PROCEDIMIENTOS ALTERNATIVOS EN EL TRATAMIENTO DEL FALLO DE IMPLANTACIÓN Como tratamiento alternativo ante el FI, Fiedler y Wurfel han planteado para determinados pacientes, el empleo de anticoagulantes como la aspirina y la heparina (17) puesto que esta última estaría implicada en la adhesión al epitelio endometrial del blastocisto. Otros autores proponen la inmunoterapia con inmunoglobulinas intravenosas (18) así como la administración intrauterina de células mononucleares obtenidas de sangre periférica (19). Margalioth y colaboradores han mostrado en una revisión muy reciente los tratamientos quirúrgicos y de estimulación endometrial necesarios en algunos casos para mejorar la receptividad endometrial, así como otros procedimientos alternativos todavía en fase experimental (20). El abordaje futuro para las parejas con FI se plantea además en sendos trabajos de Chistiansen y Nardo (21-22). CONCLUSIONES En la actualidad, el tratamiento del FI constituye uno de los grandes retos dentro del campo de la Reproducción Asistida. Técnicas como el DGP, pese al principio de cautela, se plantea como una de las opciones más válidas para el tratamiento del Fallo repetido de Implantación. BIBLIOGRAFÍA 1. Stern C, Pertile M, Norris H, et al.: Chromosome translocations in couples with in vitro fertilization implantation failure. Human Reprod, 1999; 14: Lessey BA, Castelbaum AJ, Sawin SW, et al.: Integrins as markers of uterine receptivity in women with primary unexplained infertility. Fert Steril, 1995; 63: Hambartsoumian E.: Endometrial leukaemia inhibitory factor (LIF) as a possible cause of unexplained infertility and multiple failures of implantation. Am J Reprod Inmunol, 1998; 39: Kay C, Jeyendran RS, Coulam CB.: Tumour suppressor gene polymorphism is associated with recurrent implantation failure. Reprod Biomed Online, p53; 13(4): Tomassetti C, Meuleman C, Pexsters A, et al.: Endometriosis, recurrent miscarriage and implantation failure: is there an immunological link? Reprod Biomed Online, 2006; 13(1): Simon C, Mercader A, García-Velasco J, et al.: Coculture of human embryos with autologous human endometrial epithelial cells in patients with implantation failure. J Clin Endocrinol Metab, 1999; 84: Rubio C, Simon C, Mercader A, et al.: Clinical experience employing co-culture of human embryos with autologous human endometrial epithelial cells. Human Reprod, 2000; 15suppl: Cohen J.: Assisted hatching of human embryos. J In Vitro Fert Embryo Transf, 1991; 8(4): Magli MC, Gianaroli L, Ferraretti AP, et al.: Rescue of implantation potential in embryos with poor prognosis by assisted zona hatching. Human Reprod, 1998; 13: Stein A, Rufas O, Amit S, et al.: Assisted hatching by partial zona dissection of human pre-embryos in patients with recurrent implantation failure after in vitro fertilization. Fert Steril, 1995; 63: Fallos de implantación - 159
5 11. Gianaroli L, Magli MC, Ferraretti AP, et al.: Preimplantation genetic diagnosis increases the implantation rate in human in vitro fertilization by avoiding the transfer of chromosomally abnormal embryos. Fert Steril, 1997; 68: Gianaroli L, Magli MC, Ferraretti AP, et al.: Preimplantation genetic diagnosis for aneuploidies in patients undergoing in vitro fertilization with a poor prognosis: identification of the categories for which it should be proposed. Fert Steril, 1999; 72: Sandalias M, Sadowy S, Alikani M, et al.: Developmental ability of chromosomally abnormal human embryos to develop to the blastocyst stage. Human Reprod, 2001; 16: Findikli N, Kahraman S, Saglam Y, et al.: Embryo aneuploidy for repeated implantation failure and unexplained recurrent miscarriage. Reprod Biomed Online, 2006; 13(1): Platteau P, Staessen C, Michiels A, et al.: Which patients with recurrent implantation failure after benefit from PGD for aneuploidy screening? Reprod Biomed Online, 2006; 12(3): Soini S, Ibarreta D, Anastasiadou V et al.: The interface between medically assisted reproduction and genetics: technical, social, ethical and legal issues. ESHRE Monographs Oct Fiedler K and Wurfel W.: Effectivity of heparin in assisted reproduction. Eur J Med Res, 2004; 30(9): Coulam CB, Krysa LW and Bustillo M.: Intravenous immunoglobulin for in-vitro fertilization failure. Human Reprod, 1994; 9: Yoshioka S, Fujiwara H, Nakayama T, et al.: Intrauterine administration of autologous peripheral blood mononuclear cells promotes implantation rates in patients with repeated failure of IVF-embryo transfer. Human Reprod, 2006; 21: Margalioth EJ, Ben-Chetrit A, Gal M and Eldar- Geva T.: Investigation and treatment of repeated implantation failure following IVT-ET. Human Reprod, 2006; 21: Chistiansen OB, Nielsen HS, Kolte AM.: Future directions of failed implantation and recurrent miscarriage research. Reprod Biomed Online, 2006; 13(1): Nardo LG, Sallan HN.: Progesterone supplementation to prevent recurrent miscarriage and to reduce implantation failure in assisted reproduction cycles. Reprod Biomed Online, 2006; 13(1): Fallos de implantación
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