Biometrología y los nuevos desafíos en los ensayos de laboratorio Dr. Esteban Paredes-Osses MSc., PhD.
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- Roberto Gutiérrez Correa
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1 Biometrología y los nuevos desafíos en los ensayos de laboratorio Dr. Esteban Paredes-Osses MSc., PhD. Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones Seminario Día Internacional de la Metrología
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3 Nuevos Desafíos Mediciones en: proteínas, ácidos nucleícos, azúcares, lípidos y células Confiabilidad, validez y comparabilidad?
4 Nuevos Desafíos a nivel internacional 1. Secuencias genómicas 2. ADN / Proteínas interacciones 3. Secuencias de ARN 4. Concentraciones de transcriptos de ARN 5. Locación de transcriptos de ARN 6. Modificación de ADN 7. Secuencias de proteínas 8. Modificación de proteínas 9. Movimientos y locación de proteínas 10. Interacción de proteínas con otras moléculas (Lípidos, ácidos nucleicos, etc.) 11. Actividad celular 12.Recuento celular Mediciones de alta calidad! - Biometrología esta en una necesidad urgente de desarrollo - Permitiría mejorar la confiabilidad y validez de los resultados de las medidas en bioanálisis.
5 Biometrología? La Biometrología es el campo de la metrología asociado a la biotecnología moderna. Se basa fundamentalmente en mediciones en el campo de la biología molecular y se orienta al desarrollo de patrones de medición o calibradores analíticos de utilidad para el diagnóstico clínico humano y de animales, la identificación y cuantificación de microbios y de microorganismos de interés industrial y en la denominación de origen. Con trazabilidad al SI o unidades acordadas internacionalmente. Medidas biológicas: genes, proteínas, ADN, enzimas, anticuerpos, antígenos, compuestos biológicos, metabolitos, biomembranas, microbios, células, etc. Valor característico biológico: contenido, secuencia, actividad, estructura, etc., con número y unidades específicas determinadas por métodos primarios, métodos de referencia o procedimientos de referencia.
6 ADN La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información para construir otros componentes de las células, como las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética.
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8 Método de medición ADN (Cuantitativo) 1. Espectrometría de masa de isotopo diluido Ultrasónico (IDMS) Método permite una medida de concentración trazable y precisa de ADN genómico
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10 Método de medición ADN (Cuantitativo) 2. PCR digital (Reacción en cadena de la polimerasa) Análisis preciso de cantidad de genes presentes en muestra.
11 Desarrollo de Sistema Estándar de Medidas Métodos de Referencia Comparabilidad Procedimientos de Referencia Trazabilidad de Estándares Datos de Referencia Material de Referencia Certificado
12 Biometrología en el mundo China - NIM
13 BW5201 El ADN humano material de referencia chino El Instituto Nacional de Metrología, China, junto con BGI y otros institutos y compañías de investigación del genoma, lanzaron el ADN humano RM (BW5201) y ADN de E. coli O157 RM (BW5202) en junio de 2015 BW5202 Fasmidos seleccionados desde librerias de celulas YH BW5202 E. coli O157 ADN Material de referencia 54 Fasmidos 4 plataformas de seq 22 set de datos En un futuro se podría requerir más secuenciación del genoma completo de celulas YH.
14 Biometrología en el mundo Unión Europea JRC
15 Biometrología en la Comunidad Europea Cuantificación de ADN/ nucleótidos y proteínas / péptidos Sistemas de Medición de Referencia en Salud Internacional armonización y estandarización
16 Biometrología en el mundo USA - NIST
17 Biometrología en USA Un nuevo rumbo: Organismos Genéticamente modificados Métodos de Referencia y Estándar para OGM - Modificaciones genéticas en alimentos - Proteínas expresadas para modificación genética Actividades que se realizan con USDA/GIPSA Biotech Grains - Bio-cultivos, acuerdos de transferencia de material completo - Workshops y encuestas con GIPSA para encontrar estándar - Interlaboratorios - Colaborativos internacionales para desarrollar material referencia candidatos
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21 Biometrología en el mundo Brasil - INMETRO
22 Biometrología en la región / Brasil (INMETRO)
23 Biometrología en el mundo Argentina - INTI
24 Biometrología en la región / Argentina (INTI)
25 Biometrología en el mundo Colombia - INM
26 Biometrología en la región / Colombia (INM)
27 Biometrología en el mundo Chile ISP-INN
28 Biometrología en Chile / ISP Material de Referencia Microbiológico 1. Recuento Staphylococcus aureus en leche 2. Detección de Listeria monocytogenes en leche 3. Detección de Salmonella sp. en leche. Ensayos de aptitud Material control Proyecciones. 1. Identificación y recuento molecular de especies bacterianas en muestras de Material de Referencia para asignación de valor 2. Estudios de nuevos microorganismos para elaborar nuevos MR en distintas matrices 3. Estudio de necesidades país, para la elaboración de material genético de referencia
29 Quantification of Escherichia coli in drinking water Propuesto por NIM China, y coordinado con BAM Diseño por China- Chile Estudios pilotos Procariotas (CAGW) Enumeración E. coli en agua 2017 se propuso el estudio 2018 se amplió el alcance 2018 Se discutieron diferencias regulatorias entre países Características Cepa CICC de E. coli liofilizada, caracterizada fenotípicamente, determinación del número de células por vial, UFC por vial. El número de células viables (UFC) se midió según ISO 9308 (método de filtración por membrana: incubación de membranas en medios selectivos a C y recuento de colonias después de 24 h, basado en la producción de ácido de lactosa o la producción de la enzima β-galactosidasa). China dispone de los datos sobre la homogeneidad de 15 viales, la incertidumbre a corto plazo (hasta 14 días a -20 C) y la estabilidad a largo plazo (hasta 6 meses a -80 C). Los resultados muestran que el nivel de homogeneidad y la estabilidad a corto plazo pueden ajustarse al objetivo de la comparación. El valor del material de referencia basado en 8 laboratorios diferentes utilizando el método ISO Asignación del valor por Citometría de flujo 12
30 Conclusiones
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32 Conclusiones La Biometrología es una ciencia que esta en progreso constante y debe ser parte de las estrategias que todo país desarrollado o en vías de desarrollo debe considerar. La Biometrología permite estandarizar y desarrollar materiales de referencia en los nuevos procesos biotecnológicos que el mundo esta produciendo. La mayoría de los Institutos Nacionales de Metrología (NMI) cuentan con un área dedicada a la Biometrología y al desarrollo de nuevos estándares, MR y/o MRC Chile se encuentra expandiendo su área de Biometrología. El ISP es el laboratorio designado internacional para el desarrollo de material de Instituto referencia de Salud Pública microbiológico. de Chile
33 Biometrología y los nuevos desafíos en los ensayos de laboratorio Dr. Esteban Paredes-Osses MSc., PhD. Cuarta revolución Industrial. Impactos en las mediciones Seminario Día Internacional de la Metrología
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