ADAPTACIÓN, MICROPROPAGACIÓN Y CONSERVACIÓN DE ORQUÍDEAS (Cattleya sp) NATIVAS DE CLIMA TROPICAL HÚMEDO LLUVIOSO. LAMBAYEQUE PERÚ C. E. Villanueva (1), O. V. Vallejos (1), C. Ortiz (1), C.S. Purisaca (1) (1) Laboratorio de Biotecnología y Control Integrado de Plagas (LABCIP) Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo. Calle Atahualpa No 345. Lambayeque Perú. villabal53@gmail.com olgavvv@yahoo.com, cynthiaorgo@gmail.com, cesarpurisaca@hotmail.com
Introducción Orquídeas: plantas ornamentales de mayor demanda Amenazadas y en peligro de extinción Explotación irracional (comercio ilegal y la deforestación de su habitad) Exigencias medioambientales para su reproducción y desarrollo natural Distribución en el Perú: rica diversidad, 3.000 especies en 750 géneros, crecimiento natural epifita restringidas al Bosque Húmedo Tropical (100 y 4.600 m.s.n.m). (Dpto. de San Martín, Cajamarca, entre otros)
El Departamento de Lambayeque: zona costera de clima cálido - seco situado a 46 m.s.n.m, 15 28 C Laboratorio de Biotecnología y Control Integrado de Plagas Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo Lambayeque. Preservar colección científica de plantas vivas para investigación, enseñanza, difusión y propagación Conservación y uso sostenible de especies en peligro de extinción
Objetivos Adaptación, micropropagación y conservación de especies de orquídeas Cattleya sp procedentes del Dpto. de San Martín y Cajamarca ubicados en la Región Nor Oriental del Perú Preservar una colección de especímenes ornamentales silvestres en extinción para la implementación y regeneración de viveros y jardines botánicos Promover su comercialización como una actividad económica alternativa en la región.
Material y métodos 1. Colecta de especímenes y cápsulas verdes conteniendo las semillas San Ignacio CAJAMARCA (940 m.s.n.m.) de clima lluvioso nublado 25-32 C Se recolectaron semillas contenidas en capsulas no indehiscentes de Cattleya máxima Tarapoto SAN MARTIN (353 m.s.n.m ) de clima tropical húmedo 18 29 C; Se colectaron plantas adultas de Cattleya simbodium y Cattleya rex
Especímenes transportados al Laboratorio de Biotecnología y Control Integrado de Plagas (LABCIP) Ciudad Lambayeque Nor Este del Perú, 46 m.s.n.m, clima semitropical húmedo escasas precipitaciones seco 22.5 ºC.
2. Aclimatación de las orquídeas colectadas 1. Tratamiento: 30 ml/20 L, fungicida (PROTEXIN) base de carbendazin 511 g/l y aditivos 489 g/l 2. Acondicionadas y mantenidas: condiciones climáticas costeras a nivel de vivero 3. Sustratos de adaptación: regulador de crecimiento BIOZYME conteniendo: giberelina, 0.031g/L, auxinas 0.031g/L, citoquininas 0.083g/L en solución acuosa (1 ml/l).
3. Micro propagación de las semillas de orquídeas colectadas 3.1. Inducción in vitro de la semilla y transferencia de protocormos 1. Desinfección de capsulas: sol. acaricida (PROTEXIN) 0.05% 15 min. / alcohol etílico 70%, 30 seg. / Hipoclorito de sodio 2.5% 15 min.. 2. Extracción de semillas: aprox. 1000 a 1500 semillas (0.5 y 1.20 mm de longitud) 3. Transferencia de semillas: a Medio Base Murashige & Skoog (macro y micro nutrientes) + vitaminas (mioinositol 100 mg, piridoxina HCL 0.5 mg, ac nicotínico 0.5 mg, ac. Pantotenico de calcio 2 mg y tiamina 0.1 mg) + acido giberelico 30.35 mg + agua de coco 100 ml, + azúcar 20 g, + agar 5.6 g + carbón activo 2 mg por litro, a ph 5.5. 4. Incubación: 16 ºC con foto períodos de 16-8 horas luz, 5. Evaluación: número de semillas germinadas y tiempo de germinación. De las semillas germinadas (fase de protocormo), 6. Selección de protocormos: 3 a 4 mm de diámetro y se sembrados en medio semisólido base Murashige & Skoog 7. Incubación: 16 ºC con foto períodos de 16-8 horas luz, 8. Evaluación: crecimiento de los protocormos. y tiempo de crecimiento
3.2. Multiplicación y enraizamiento de plántulas. 1. Multiplicación: de yemas terminales y laterales (explantes) 2. Siembras: Medio Base Murashige & Skoog 3. Evaluación: crecimiento de explantes y tiempo de crecimiento. 4. Conservación: in vitro en medio de mantenimiento 5. Aclimatación: invernadero. 4. Mantenimiento de las plántulas Por transferencia al Medio Base Murashige & Skoog para el mantenimiento de las plántulas por periodos largos (1-2 años).
Resultados y Discusión 1. Aclimatación de las orquídeas colectadas Cattleya máxima Cattleya rex 1. Orquídeas aclimatadas a las condiciones climáticas costeras de la ciudad de Lambayeque Perú a nivel de vivero 2. Presentaron floración bianual manteniendo su viabilidad en su condición nativa durante 7 años consecutivos.
Cattleya máxima presentó un mayor periodo de floración (aprox. 60 días sin formación de capsulas con semillas debido a la ausencia de condiciones favorables para la polinización. Floración de Catleya máxima Floración de Catleya rex
2. Micro propagación de las semillas Tabla 1. Germinación y crecimiento de protocormos de especies de orquídeas Especie N semillas germinadas/cm 2 a los 2 meses Crecimiento de protocormos (cm) a los 5 meses C. máxima 150 (15 %) 5-6 C. simbodium - - C. rex 100 (10 %) 4-5 Cattleya máxima obtuvo un promedio de 150 semillas germinadas /cm2 y el crecimiento de protocormos alcanzó una altura de 5 a 6 cm.
Tabla 2. Crecimiento de plántulas de especies de orquídeas a los 6 meses Especie Altura de plántulas (cm) Enraizamiento de plántulas (%) N brotes / yemas C. máxima 6 7 50 3-4 C. simbodium - - - C. rex 5-6 30 2-3 Cattleya máxima presento una mejor multiplicación, crecimiento, enraizamiento y numero de brotes a los 6 meses
1. Se ha logrado establecer condiciones adecuadas para la micropropagación in vitro de 2 especies de orquídeas. 2. El empleo del Medio Base Murashige & Skoog con reguladores de crecimiento (gliberelina, BAP y ANA) favorecieron la inducción in vitro de la semillas, crecimiento de los protocormos, multiplicación y enraizamiento de plántulas de las especies de Cattleya máxima y Cattleya rex 3. La sobrevivencia in vitro al parecer estuvo influenciada por el medio de cultivo. 4. Las plántulas obtenidas presentaron germinación del 15 % en Cattleya. maxima y 10 % en Cattleya rex
3. Mantenimiento de plántulas de C. máxima y C. rex Figura 5. Orquídea Catleya maxima conservada in vitro. 17 /02/2011. Lambayeque -Perú. 1. Los plántulas multiplicadas (yemas terminales) se lograron conservar in vitro 2. El Medio Base Murashige & Skoog demostró efectividad para el mantenimiento de orquídeas durante periodos largos (1-2 años)
Figura 6. Orquídea Catleya rex conservada in vitro. 17 /02/2011. Lambayeque -Perú. Figura 7. Conservación de orquídeas Cattleya maxima y Cattleya rex in vitro. 17 /02/2011. Lambayeque -Perú.
Principales aportaciones del presente trabajo 1. Protocolos del cultivo in vitro de 2 de 3 especies estudiadas, con alto potencial ornamental, 2. Alternativa económica real de este recurso poco explotado 3. Crear conciencia sobre la importancia de mantener y cuidar los ecosistemas que albergan esta riqueza. 4. La micropropagación de especies representa uno de los medios más efectivos para conservar y salvaguardar las poblaciones silvestres de orquídeas 5. El desarrollo de paquetes tecnológicos, que puedan ser adoptados por horticultores, comunidades organizadas e interesadas en la explotación racional de sus recursos, contribuye directamente a su conservación, disminuyendo en gran medida la presión de colecta de poblaciones silvestres
Figura 10. Banco de germoplasma de orquídeas Lambayeque -Perú.
Conclusiones 1. Las orquídeas Cattleya maxima y Cattleya rex se adaptaron a las condiciones climáticas costeras de la ciudad de Lambayeque Perú 2. Las especies mostraron viabilidad en la micropropagación y conservación a nivel de Laboratorio siendo aptas para su multiplicación masiva y factibles de comercialización.
GRACIAS