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Silvia Macías Sánchez
hace 6 años
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1 ÍNDCES.. Índice General Índice de Figuras. Índice de Tablas... V X RESÚMENES... Resumen (Castellano). Summary (English)... Resum (Valencià).. X X XV XV NTRODUCCÓN El tomate y la mejora El desarrollo floral en tomate Morfología de la flor de tomate Etapas del desarrollo floral El modelo ABC (DE) en tomate Desarrollo de las anteras y del polen Desarrollo de los óvulos y del ovario El desarrollo de fruto en tomate Morfología del fruto de tomate Etapas del desarrollo del fruto Control hormonal del desarrollo del fruto Cuajado de fruto y partenocarpia mplicación de las auxinas en el cuajado mplicación de las giberelinas en el cuajado mplicación de las citoquininas en el cuajado mplicación del etileno en el cuajado mplicación del ácido abscísico en el cuajado Mutantes partenocárpicos y genes homeóticos florales ntegración de los diferentes componentes implicados en el cuajado de fruto Mutagénesis insercional.. 47

2 5.1. Genómica funcional y genética del desarrollo Los mutantes como herramienta de genómica funcional Mutagénesis insercional con T- DNA Naturaleza de las mutaciones en las planas transgénicas Vectores modificados. Etiquetado mediante trampas génicas (trapping) 54 OBJETVOS MATERAL Y MÉTODOS Material vegetal Técnicas básicas de cultivo in vitro Esterilización de semillas Germinación y obtención de plántulas axénicas Cultivo de explantes primarios Regeneración de plantas a partir de explantes primarios nducción de organogénesis Enraizamiento de los brotes y clonación de las plantas Determinación del nivel de ploidía de las plantas regeneradas mediante citometría de flujo Re- introducción de brotes a condiciones de cultivo in vitro Transformación genética Agrobacterium tumefaciens: cepa bacteriana, plásmido y genes incluidos en el T- DNA Cultivo de Agrobacterium tumefaciens Método de transformación: selección y regeneración de plantas transgénicas Enraizamiento de los brotes transgénicos Aclimatación y trasplante Polinización cruzada Caracterización del desarrollo reproductivo Caracterización de flores Estadios del desarrollo floral evaluados Análisis de la viabilidad de los granos de polen Preparación de muestras para microscopía óptica... 73

3 4.2. Caracterización de frutos Estadios del desarrollo del fruto evaluados Evaluación de las características del fruto Análisis de co- segregación: resistencia a la kanamicina en brotes reintroducidos a condiciones in vitro Análisis de expresión del gen delator UidA. 77 RESULTADOS Caracterización fenotípica del cultivar de tomate Moneymaker Caracterización fenotípica del desarrollo vegetativo Caracterización fenotípica del desarrollo reproductivo Respuesta al ensayo histoquímico GUS Generación de una colección de líneas T- DNA de tomate (cv. Moneymaker) e identificación de mutantes dominantes con alteraciones en caracteres del desarrollo Generación de una colección de líneas T- DNA de tomate Detección de mutantes con efectos dominantes Descripción de algunos mutantes con alteraciones en el desarrollo vegetativo Descripción de algunos mutantes alterados en el desarrollo de la inflorescencia, la flor o las zonas de abscisión Descripción de algunos mutantes alterados en el desarrollo de fruto Caracterización de mutantes de fruto partenocárpico Tom1648 (PAB = Premature Abscission in Breaker) Descripción de fenotipo mutante Análisis de las alteraciones en el desarrollo reproductivo Análisis de la expresión del gen delator UidA Corolario Tom Descripción de fenotipo mutante Análisis de las alteraciones en el desarrollo reproductivo Análisis de la expresión del gen delator UidA Corolario Tom

4 Descripción de fenotipo mutante Análisis de las alteraciones en el desarrollo reproductivo Análisis de la expresión del gen delator UidA Análisis genético de la descendencia procedente del cruce entre el mutante y el WT Corolario Tom Descripción de fenotipo mutante Análisis de las alteraciones en el desarrollo reproductivo Análisis de la expresión del gen delator UidA Análisis genético de la descendencia procedente del cruce entre el mutante y el WT Corolario Tom Descripción de fenotipo mutante Análisis de las alteraciones en el desarrollo reproductivo Análisis de la expresión del gen delator UidA Análisis genético de la descendencia procedente del cruce entre el mutante y el WT Corolario DSCUSÓN Utilidad de los mutantes para la disección genética de caracteres complejos Generación de una colección de líneas T- DNA en tomate Mutantes partenocárpicos y alteraciones en el desarrollo vegetativo Mutantes partenocárpicos y alteraciones en el desarrollo reproductivo Mutantes partenocárpicos y alteraciones en la tasa de cuajado de fruto Mutantes partenocárpicos y androesterilidad Mutantes partenocárpicos y desarrollo de los óvulos nferencias en torno a la base de la expresión del gen delator y la inserción del T- DNA 223 CONCLUSONES BBLOGRAFÍA V

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ÍNDICE ABREVIATURAS... XI I. INTRODUCCIÓN... 1 1 EL TOMATE... 3 1.1 Taxonomía... 3 1.2 Características generales... 3 1.3 La flor... 4 1.4 Características del fruto... 5 2 CUAJADO Y DESARROLLO DEL FRUTO...