El experimento de protón es el primer paso en la elucidación estructural de una molécula, siendo éste el más común de los experimentos de RMN en fase líquida. Notas: El equipo debe tener siempre un tubo vacío en el interior el cual se retira antes de empezar a trabajar. Al finalizar deja siempre un tubo vacío en el magneto. El lock mantiene la frecuencia del espectrómetro estable lo que impide el desplazamiento del campo magnético (magnet field drifft) que puede generarse con el tiempo o con interferencia externa. El proceso del locking permite que el campo de resonancia del deuterio en el disolvente coincida con la frecuencia del lock. La señal del lock es también utilizada para el ajuste de la homogeneidad, es decir, el shimming, lo cual se lleva a cabo ajustando un conjunto de bobinas dentro del magneto lo que provoca cambios en la forma del campo magnético. ACCESAR Para accesar al sistema no es necesario ningún password por lo que con la tecla enter podrá ingresar a la interfaz. En caso de que el interfaz no esté abierta en el escritorio encontrará la siguiente imagen y deberá dar doble click en el icono VNMRJ. Elaboró Revisó Autorizó Responsables del Proceso Cristina Rodríguez / Raúl Villamil Blanca E. Domínguez M. Ma. Yolanda Ríos Gómez 1 de 7
Al accesar verá una pantalla como la siguiente: INSERTAR LA MUESTRA 1. En la pestaña START dar click en eject para remover la muestra anterior. 2. Inserte la muestra en la turbina y con la ayuda del gauge (medidor) ajuste el nivel del tubo asegurando una correcta medida del tubo para evitar su ruptura al introducirlo al imán. 3. Dar click en insert para regular el aire y que la muestra se introduzca correctamente. 4. Seleccionar el disolvente de acuerdo con la siguiente figura: 2 de 7
AJUSTAR DE LOCK Y SHIM 1. En la línea de comandos escribir lo siguiente: rts cdcl3 load= y su con estas instrucciones usted estará cargando los shimms para cloroformo que son los shims iniciales para cualquier disolvente. 2. Asegúrese que el spin este encendido y girando a 20Hz de acuerdo a la siguiente figura: 3. Asegúrese que el lock se encuentre apagado. 3 de 7
4. Dar click en el icono lockscan para visualizar el nivel del lock. 5. Para homogeneizar la frecuencia de deuterio (lock = Z0) deberá ajustar el lock power y el lock gain a los valores máximos (lock apagado) y mover la barra del Z0 suavemente hasta encontrar el valor máximo de Z0 como se ve en la figura: 6. Baje los valores de power y gain aproximadamente 30 y 35 respectivamente y mueva el valor de Z0 y phase de 1 en 1 alternadamente hasta observar un nivel de lock de aprox. 50 como en la siguiente figura (quizá sea necesario incrementar o reducir los valores de lock y gain): 4 de 7
7. Vaya a la pestaña shim y ajuste los valores Z1C y Z2C (ajuste grueso) y posteriormente ajuste Z1 y Z2 (ajuste fino) hasta encontrar un valor máximo, si el valor llegara a 100 será necesario reducir los valores de Lk power y Lk gain. ADQUIRIR EL ESPECTRO. 1. En el panel de experimentos seleccione protón con un click y automáticamente se desplegará la secuencia de pulsos del experimento. 2. Escribir en la barra de comandos: nt=1 ga Esto indica que el experimento se adquirirá con una transiente, para acumular más puntos deberá cambiar el número de transientes (nt=16, 32, 64, 128) y bs=4 con la finalidad de mejorar la relación señal ruido y dependerá de la concentración de la muestra, cada vez que se adquiere un bs podrá dar wft para ir visualizando el progreso del experimento. 3. Al finalizar la adquisición se desplegará el espectro en pantalla 5 de 7
PROCESAR EL ESPECTRO 1. Después de la adquisición el espectro se puede procesar con los siguientes macros, los cuales se escriben en la barra de comandos: vsadj (ajusta la intensidad de la señal máxima en la ventana) aph ( ajuste de fase) ds (despliega el espectro) cz (resetea las integrales) nl rl(xp) donde X es el valor de la referencia (0 ppm en el caso de TMS) 2. Utilizando los iconos que se encuentran a la derecha del espectro podrá manipular las expansiones, integrales y frecuencias: 6 de 7
IMPRIMIR 1. En la barra de comando escribir los siguientes macros según lo requiera: graf1 (imprime el espectro con integrales) graf (imprime el espectro con frecuencias) GUARDAR DATOS 1. Dar click en el icono de salvar y elegir la carpeta del investigador correspondiente. Los nombres de archivo no deben contener símbolos ni espacios. 7 de 7