1.- Denominación, Carácter: Carreras Universitarias de Postgrado: Carreras de Doctorado
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- Margarita Peralta Paz
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1 1.- Denominación, Carácter: Carreras Universitarias de Postgrado: Carreras de Doctorado 2.- Nombre del Curso: TOXICOLOGÍA GENÉTICA 3.- Directoras del Curso: Dra. María Fernanda Simoniello, Dra. Gisela Laura Poletta 4.- Docentes Invitados: Dra. Marta A. Carballo Dr. Rafael Lajmanovich Dra. Nancy Andrioli Colaboradores: Mag. Jorge Scagnetti Bioq. Raúl Grigolatto Bioq. Alicia Loteste Esp. Tox. Carlos Mastandrea 5.- Objetivos del Curso -Revisar los conceptos básicos y fundamentos de la Toxicología. -Comprender las bases bioquímicas de la toxicidad. -Conocer diversas pruebas para evaluación de toxicidad celular y en particular toxicidad sobre el genoma. -Estudiar las bases moleculares de daño al ADN y los mecanismos de reparación del mismo. -Comprender el proceso de mutagénesis y su relación con la carcinogénesis - Revisar los conceptos básicos y fundamentos de Ecotoxicología e interpretar los diseños experimentales de los trabajos propuestos. - Integrar los conocimientos teóricos con las actividades de laboratorio. 6.- Perfil de los alumnos a quienes está orientado el curso: Graduados de las Carreras de Bioquímica, Licenciaturas en Biotecnología, en Biología y Biodiversidad, en Saneamiento Ambiental, Ciencias Veterinarias, Agronomía, Medicina y carreras afines. Se evaluará la participación de estudiantes avanzados de estas carreras, y estudiantes con becas de iniciación que estén trabajando en la temática 7.- Fecha del curso: 19 al 24 de noviembre de Carga horaria y distribución de las actividades Carga horaria total: 45 horas Nº de clases teóricas: 10 (25 horas) Nº de clases prácticas: 5 (15 horas) 9.- Número de vacantes Teóricas: 30 Prácticas: 15 (exclusivo para graduados) Criterios de selección: por Curriculum vitae (art 9º) y carta de intención 10.- Requisitos de formación previa de los inscriptos Graduados de las Carreras de Bioquímica, Licenciaturas en Biotecnología, en Biología y Biodiversidad, en Saneamiento Ambiental, Ciencias Veterinarias, Agronomía, Medicina y carreras afines. En el caso de no graduados deberán justificar por su currículum vitae condiciones de formación suficientes que serán evaluadas por las Directoras del Curso. 1
2 11.-Programa analítico del Curso: detallando número de clases (teóricas, prácticas, etc.), horarios y responsables de los mismos. MODULO I Clase 1. Fundamentos Básicos de Toxicología Definiciones históricas de la disciplina. Dosis. Exposición. Efecto. Relación dosis-respuesta. Toxicinética de los xenobióticos (biodisponibilidad, absorción, distribución, depósito, eliminación). Metabolismo de los xenobióticos. Toxicodinamia. Clase 2. Mecanismos de la Acción Tóxica Efectos bioquímicos. Mecanismos moleculares de toxicidad. Inhibición e Inducción enzimática. Activación y supresión de vías metabólicas. Potenciación y sinergismo, antagonismo. Clase 3. Medida de Exposición y Efectos Test de Toxicidad. Aspectos generales. Estrategias. Test de Toxicidad aguda y crónica. Test de toxicidad in vitro e in vivo. Monitorización biológica. Biomarcadores. Definición y clasificación. Métodos predictivos. MODULO II Clase 1. Genética Toxicológica Impacto de las alteraciones genéticas en células somáticas y germinales. Mutagénesis. Teratogénesis. Carcinogénesis. Significado. Implicancias. Biomarcadores. Evaluación de daño inducido o espontáneo. Biomonitoreo mediante bioindicadores de exposición, susceptibilidad y efecto. Niveles de Evaluación de daño genético. Ensayos de corto (STT) y largo plazo para la evaluación de daño. Batería mínima de STT. Clase 2. Biomarcadores de Efecto en Genética Toxicológica. Diferentes ensayos para la detección de alteraciones numéricas y estructurales. Tests de aberraciones cromosómicas, intercambio de cromátides hermanas, cinética de proliferación celular, índice mitótico y retardo en anafase como indicadores de distinto tipo de daño. Su análisis combinado y aplicaciones. Citotoxicidad, citostaticidad, clastogénesis e inestabilidad cromosómica como evaluación de daño genético inducido. Avances en nuevas técnicas citogenéticas aplicadas a genotoxicidad. Aplicaciones de la citogenética molecular en Genética Toxicológica. MODULO III Clase 1. Modelos de estudio en Genética Toxicológica I. Evaluaciones en Linfocitos de sangre periférica humana Mutagénesis Química. Monitoreo y análisis in vitro e in vivo con potenciales genotóxicos naturales, ambientales, de uso terapéutico y por estilos de vida. Las plantas medicinales y su potencialidad como agentes genotóxicos y/o antioxidantes. Clase 2. Modelos de estudio en Genética Toxicológica II. Estudios en líneas celulares y modelos experimentales no humanos El uso de modelos alternativos para experimentación en Genética Toxicológica. Ejemplos de distintos animales y vegetales, casos de especies exóticas o silvestres y su aplicación en monitoreo ambiental. Otros usos aplicables en el laboratorio experimental. Los antiparasitarios como modelo de mutagénesis química. Benzimidazoles y Nitroimidazoles. MODULO IV Clase 1. Evaluación de Riesgo Individualización y cuantificación del peligro. Elementos de la evaluación de riesgo. Evaluación de la exposición. Emisión, transporte y transformación. Evaluación de la exposición de los 2
3 seres humanos. Evaluación epidemiológica. Caracterización del riesgo. Riesgo en salud humana. Clase 2. Test de Micronúcleo (MN). Mecanismo de formación de micronúcleos. El test de MN como indicador de aneugenicidad y clastogenicidad, adaptaciones. Utilidad. Ventajas y desventajas. Criterios de identificación. Frecuencia espontánea o basal de MN. Significado. Aplicación in vivo e in vitro. Método de bloqueo de la citocinesis. Aplicación en distintos modelos experimentales y poblaciones celulares. Ejemplos. Clase 3. Electroforesis en gel de una sola Célula o Ensayo Cometa Fundamentos de la técnica. Tipos de daños evaluados mediante el Ensayo Cometa. Metodología y Controles. Análisis de Resultados: análisis visual vs software. Sensibilidad y especificidad. Cinética de reparación. Modificación del Ensayo Cometa por el uso de enzimas de restricción. Aplicaciones. MODULO V Clase 1. Principios de Ecotoxicología: Diseño de ensayos y efectos. Organismos de prueba: bacterias, algas, invertebrados y vertebrados. Ensayos de toxicidad: diseño, sistemas de renovación y exposiciones al tóxico. Análisis estadístico de los resultados. Mesocosmos. Estudios in situ. Biomarcadores en fauna silvestre. Otras medidas de evaluación ecotoxicológica, descriptores ecológicos. Clase 2. Seminario de Ecotoxicología Clase 3. Práctico de Test de Micronúcleo. Aplicación del test en distintos modelos experimentales y poblaciones celulares. Técnicas de tinción. Observación, determinación de frecuencia y análisis. Clase 4. Práctico de Electroforesis en gel de una sola Célula. Aplicación del ensayo a distintas poblaciones celulares. Técnica. Evaluación al microscópico. Análisis de resultados. Clase 5. Seminario de Ensayo Cometa y Micronúcleo MODULO VI Clase 1. Ensayos de corto plazo con organismos vegetales. El modelo de Allium cepa en monitoreo ambiental. Las plantas como biomonitores de toxicidad y genotoxicidad. Evaluación de efectos genotóxicos en células meristemáicas de Allium cepa. Técnicas para la obtención de preparados cromosómicos. Aplicaciones en monitoreo ambiental y evaluación de riesgo. Clase 2. Práctico de Allium cepa Obtención de preparados cromosómicos. Técnicas de tinción. Reconocimiento de figuras indicadoras de daño (end point). Cuantificación. Obtención de parámetros. Evaluación de efecto genotóxico. 3
4 Día y Horarios Tema Docente Responsable 10,30 a 12,30 13,30 a 15,00 15,30 a 20 8 a 13 hs 14 a hs a hs Mierc 21/nov/12 8 a 13 hs Mierc 21/nov/12 15 a 20 hs Jue 22/nov/12 8 a 16 Jue 22/nov/12 16 a 20 Vier 23/nov/12 9 a 14 hs Sab 24/nov/12 8 a 10 Fundamentos Básicos de Toxicología Mecanismos de Acción Tóxica Medida de Exposición y Efecto Genética Toxicológica Genética Toxicológica Biomarcadores de Genotoxicidad Biomarcadores de Genotoxicidad Evaluación de Riesgo Ensayo Cometa Test de Micronúcleo Principios de Ecotoxicología Seminario de Ecotoxicología T. P. Ensayo Cometa y Test de Micronucleo (Primera Parte) T. P. Ensayo Cometa y Test de Micronucleo (Segunda Parte) Seminario Ensayo Cometa y Test de Micronúcleo Eval. de genotoxicidad en tejido vegetal T.P. Eval. de genotoxicidad en tej. Vegetal Examen escrito presencial Dr. Rafael Lajmanovich Dra. Nancy Andrioli 12.- Bibliografía del curso (indicando forma de acceso a la misma) BIBLIOGRAFÍA GUÍA DEL CURSO -Genética Toxicológica (2006). Mudry, M.D.; Carballo, M.A. Ed. De Los 4 Vientos, Buenos Aires, Argentina. 669pp. -Klaassen, C.D. Casarett and Doull s Toxicology: The Basic Science of Poisons (2007). Mc Graw-Hill. Seventh Edition. -Principles and Methods of Toxicology, fourth edition (2001). Hayes, A.W. Taylor and Francis, London. Fourth edition. BIBLIOGRAFÍA DE CONSULTA -Fundamentals of Ecotoxicology 3rd. ed. (2010). Newman, M.C. Boca Raton: CRC Press. Pp Handbook of human toxicology (1997). Massaro, E.J. CRC Press, Boca Raton, OECD Guideline for testing of chemicals. Números: 412, 413, 417, , 451, , 478, 479, 482, 283, 485 y 486. En línea: -Principles of ecotoxicology 3rd. ed. (2006) Walker, C.H.; Hopkin, S.P; Sibly, R.M; Peakall, D.B. Boca Raton: CRC Taylor & Francis. Pp Toxicology: Principles and applications (1996). Niesink, R.J.M.; de Vries, J. And Hollinger, M.A. CRC Press, Boca Raton. 4
5 -WHO, "Biomarkers and risk assessment: concepts and principles". Environmental Health criteria; 155. VÍHO, Geneva, WHO, "Biomarkers and risk assessment: validity and validation concepts and principles". Environmental Health Criteria; 222. VÍHO, Geneva, WHO, "Principles for the Assessment of Risks to Human Health from Exposure to Chemicals". Environmental Health Criteria; 210, VJHO, Geneva, Artículos sobre los temas a desarrollar provenientes de revistas científicas de publicación periódica: Mutation Research, Mutagenesis, Toxicology, Toxicology Letters, Genetics and Molecular Biology, Environmental and Molecular Mutagenesis, Molecular and Cellular Biochemistry, Chemical Research in Toxicology, Biochimica et Biophysica Acta, Chromosome Research, Drug and Chemical Toxicology, Journal of Experimental Medicine, Journal Chromatography, Toxicology and Applied Pharmacology (material que entregaran los docents a los cursantes, y accesibles en Método de evaluación y promoción del curso Examen escrito presencial 14.- Currículo Vitae del Director si no es Docente-Investigador de la Facultad 5
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