Lupus Eritematoso Sistémico y su relación con exposición ambiental a plaguicidas

Transcripción

1 1 Lupus Eritematoso Sistémico y su relación con exposición ambiental a plaguicidas Dra. Ma. Fernanda Simoniello Cátedra de Toxicología, Farmacología y Bioquímica Legal. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad Nacional del Litoral

2 América y la producción agrícola 2

3 América y la producción agrícola 3

4 Cambios Tecnológicos Argentina: Principal Cultivo: Soja Campaña superficie récord de ha sembradas. 4

5 Cambios Tecnológicos Argentina: Principal Cultivo: Soja Campaña superficie récord de ha sembradas. 5

6 Antecedentes Población ocupacionalmente expuesta a mezclas de plaguicidas PARAMETROS DE EXPOSICIÓN PARAMETROS DE ESTADO OXIDATIVO PARAMETROS DE GENOTOXICIDAD BChE CAT ENSAYO COMETA AChE GSH/GSSG BASES OXIDADAS TBARS MICRONÚCLEOS EN MUCOSA BUCAL 6

7 Antecedentes Poblaciones expuestas ambientalmente a mezclas de plaguicidas PARAMETROS DE EXPOSICIÓN PARAMETROS DE ESTADO OXIDATIVO PARAMETROS DE GENOTOXICIDAD BChE CAT ENSAYO COMETA AChE GSH/GSSG BASES OXIDADAS TBARS MICRONÚCLEOS EN MUCOSA BUCAL 7

8 INTA: Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria SAMCO: Servicio Atención Médica a la Comunidad Ministerio de Salud, Ministerio de Ambiente, Ministerio de Producción 8

9 INTA: Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria SAMCO: Servicio Atención Médica a la Comunidad Ministerio de Salud, Ministerio de Ambiente, Ministerio de Producción 9

10 Biomonitoreosen en poblaciones expuestas a Plaguicidas Variables ambientales Selección de Biomarcadores Vigilancia de cada población 10

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12 Estudio de Tipo caso-control, transversal Controles (n=100) y Pacientes con LES (n=95, ACR 1997) Con características semejantes en edad, sexo, residencia LES URBANO LES RURAL SANO URBANO SANO RURAL Encuesta Datos socio-demográficos Medicación Hábitos (consumo y frecuencia) Consumo de suplementos dietarios Enfermedad actual o crónica Datos laborales 12

13 Biomarcadores LES URBANO LES RURAL SANO URBANO SANO RURAL Sustitutos de Exposición: AChE y BChE(Elman, 1959) Estado Oxidativo: Actividad de Catalasa (Aebi, 1984); % Inhibición de SOD (Kit comercial Sigma ), TBARS (Buege y Aust, 1978) Genotoxicidad: Ensayo Cometa y Ensayo Cometa modificado (Singh et al, 1988; Collins et al 1993; 1997) 13

14 Enzimas Colinesterasas: BChEy AChE 14

15 Biomarcadores LES URBANO LES RURAL SANO URBANO SANO RURAL Sustitutos de Exposición: AChE y BChE(Elman, 1959) Estado Oxidativo: Actividad de Catalasa (Aebi, 1984); % Inhibición de SOD (Kit comercial Sigma ), TBARS (Buege y Aust, 1978) Genotoxicidad: Ensayo Cometa y Ensayo Cometa modificado (Singh et al, 1988; Collins et al 1993; 1997) 15

16 Estado Oxidativo Desordenes patológicos Xenobióticos R Radicales libres R. Enzimáticos Procesos metabólicos Acidos nucleicos oxidados Especies reactivas de oxigeno Antioxidantes Aminoacidos oxidados Noenzimáticos Nucleótidos oxidados o-tirosina 8-hidroxiguanosina Peróxidos de lípidos 8-isoprostano Timidina glicol Dienos conjugados Alcanos Productos aldehidicos n-aldehidos Aldehídos insaturados malondialdehido Tras-4-hidroxialquenal 16

17 Estado Oxidativo Desordenes patológicos Xenobióticos R Radicales libres R. Enzimáticos Procesos metabólicos Acidos nucleicos oxidados Especies reactivas de oxigeno Antioxidantes Aminoacidos oxidados Noenzimáticos Nucleótidos oxidados o-tirosina 8-hidroxiguanosina Peróxidos de lípidos 8-isoprostano Timidina glicol Dienos conjugados Alcanos Productos aldehidicos n-aldehidos Aldehídos insaturados malondialdehido Tras-4-hidroxialquenal 17

18 Biomarcadores LES URBANO LES RURAL SANO URBANO SANO RURAL Sustitutos de Exposición: AChE y BChE(Elman, 1959) Estado Oxidativo: Actividad de Catalasa (Aebi, 1984); % Inhibición de SOD (Kit comercial Sigma ), TBARS (Buege y Aust, 1978) Genotoxicidad: Ensayo Cometa y Ensayo Cometa modificado (Singh et al, 1988; Collins et al 1993; 1997) 18

19 Daño en el ADN: Ensayo cometa 19

20 Daño oxidativoen el ADN Ensayo Cometa modificado con enzimas: Sitios FPG DICA & DICA-FPG Subjects 20

21 Resultados LES URBANO LES RURAL SANO URBANO SANO RURAL 21

22 Resultados: característicassocio socio- demográficas similares. Edad (p = 0,653) 22

23 Resultados: característicasclínicas clínicas similares Pacientes con LES. Medicación (p >0,085) Hidroxicloroquina Inmunosupresores Corticoides 23

24 Marcadoresde de exposición a plaguicidas BChE U/l (p=0.599) AChE U/l gr (*p=0.048) * BChE AChE 24

25 Marcadoresde de estrés oxidativo: Catalasa 300 Catalasa ku/g Hb(p=0.613) Control Urbano Control Rural LES Urbano LES Rural 25

26 Marcadoresde de estrés oxidativo: SOD SOD % inhibición (*p<0.05) * * Control Urbano Control Rural LES Urbano LES Rural Resultados similares Zhang et al

27 Marcadoresde de estrés oxidativo: TBARS 450 * TBARS nmol/g Hb(*p<0.05) * * Control Urbano Control Rural LES Urbano LES Rural Tewthanomet al. (2008) y Shah et al.(2010, 2011) 27

28 Marcadoresde de daño genotóxico: Ensayo Cometa 160 I D (p>0.05) Control Urbano Control Rural LES Urbano LES Rural 28

29 Marcadoresde de daño oxidativoen el ADN: Sitios Endo 45 * I D (*p<0.05) * * Control Urbano Control Rural LES Urbano LES Rural Asociaciones epidemiológicas de Balluzet al. (2001) y Parkset al. (2006) 29

30 Conclusiones AChEmostró diferencias estadíticamentesignificativas entre las personas de aéreas rurales respecto a los urbanos: EXPOSICIÓN A PLAGUICIDAS Se encontraron diferencias significativas en el balance oxidativo (SOD Y TBARS) en todos los pacientes con LES respecto a los controles: DAÑO OXIDATIVO LES Los marcadores de daño oxidativoen lípidos (TBARS) y en el ADN (Sitios FPG) mostraron incrementos significativos en pacientes con LES rurales respecto a los urbanos y los controles: LES y AMBIENTE Esta investigación demuestra la importancia del uso de biomarcadoresde daño oxidativoy genotóxicoen el seguimiento clínico de pacientes con LES, con el fin de determinar los factores ambientales que podrían estar relacionado con la patogenia de la enfermedad. 30

31 Muchas gracias Servicio de Reumatología Hospital Provincial Cullen: Dr. Sergio Paira Dra. Susana Roverano Dr. Emilio Benavente Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, UNL: Dra. Gisela Poletta- Mg. Adriana Paonessa Esp. Tox. Carlos Mastandrea- Bioq. Alicia Loteste Mg. Jorge Scagnetti- Bioq. Raúl Grigolato Mg. Ing. Liliana Contini Biol. Leonardo Martínez Biol. Gabriela Martino-Durussel 31

32 Lupus Eritematoso Sistémico y su relación con exposición ambiental a plaguicidas Dra. Ma. Fernanda Simoniello Cátedra de Toxicología, Farmacología y Bioquímica Legal. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad Nacional del Litoral 32