Efectos subagudos de bajas dosis de nitrato de plomo y cloruro de mercurio exposición en riñón de ratas
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- Julián Sáez Miguélez
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1 Efectos subagudos de bajas dosis de nitrato de plomo y cloruro de mercurio exposición en riñón de ratas -Cruz García Salma Yamil -Soriano Pérez Luis Alfonso -Torres Paniagua Alicia -Vargas Hernández Zaira
2 Recordar que
3 Plomo 1. Afinidad a grupos -SH, e inhibe enzimas dependientes de -SH esenciales para procesos biológicos. 2. Biomimetismo con Calcio 3. Afecta transcripción del ADN por interacción con proteínas de unión a ácidos nucleicos. Mercurio 1. Produce toxicidad sistémica a concentraciones mucho menores. 2. Inhibición de diversas enzimas (principalmente las que contienen el grupo -SH) 3. Induce supresión de la inmunidad humoral y celular 4. incrementa frecuencia de tumores
4 Material y métodos Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Control 1 ml/kg H2O destilada Nitrato de plomo 45 mg/kg Cloruro de mercurio 0.02 mg/kg Nitrato de plomo 45 mg/kg + Cloruro de mercurio 0.02mg/kg 24 Ratas Wistar albinas adultas ( g) 28 días Disecadas con ketamina + xilazina Riñones removidos para observar los niveles de MDA, las actividades de enzimas antioxidantes y exámenes microscópicos. Muestras de sangre de los animales tomadas del corazón y recogidas en tubos estériles para analizar niveles séricos de urea, ácido úrico y creatinina.
5 Análisis Análisis MDA y enzimas antioxidantes de los riñones Riñones Lavados con buffer de fosfatos ph 7,2 y homogeneizados Obtención de: -Actividad de SOD -Actividad de CAT renal -Actividad de GST -Actividad de GPx -Niveles de MDA (+ácido tiobarbitúrico) -Concentración protéica
6 Análisis Muestras de sangre del corazón 3500 rpm Determinación de niveles en suero, con kit enzimático-espectrofotométrico: -Urea -Ácido úrico -Creatinina Autoanalizador Bayer ope-ra
7 Análisis Disección de ratas Remoción de riñones y deshidratación Cortes de 4-6 μm, teñidos con hematoxilina-eosina Evaluación al microscopio óptico MC Dilatación tubular Lobulación glomerular Degeneración tubular LN MC+ LN Análisis estadístico ANOVA -----> Tukey Significancia P<0.05
8 Resultados El tratamiento con nitrato de plomo (LN) y cloruro de mercurio (MC) disminuyeron las actividades de SOD, CAT, GPx y GST en tejidos de riñón, pero MC mostró más toxicidad que LN, excepto en actividad GST. En combinación, LN y MC indujeron más daños que el uso de ellos solos
9 Resultados El tratamiento con LN y MC aumentó los niveles de urea, niveles de ácido úrico y creatinina en comparación con el grupo control. El examen histológico de los tejidos renales de las ratas control mostró estructura normal. Las ratas tratadas con LN solo exhibieron degeneración tubular. El grupo tratado con MC mostró dilatación tubular y lobulación glomerular. En ratas tratadas con LN + MC también se demostró la degeneración tubular. No hay diferencias significativas entre los grupos LN, MC y LN + MC.
10 Discusión Hg y Pb Incrementa Estrés Oxidante y ROS Incrementa LPO disminuye Antioxidantes Inhibición de las actividades de la SOD, CAT, GPx y GST y el aumento en los niveles de MDA en ratas tratadas con MC y LN.
11 Discusión Esto puede deberse a la producción de ROS o a que plomo y mercurio pueden cambiar la actividad antioxidante de las enzimas al inhibir los grupos SH funcionales por su alta afinidad. La potenciación de la Lipoperoxidación por MC y LN se debe a la consecuencia de la inhibición de las enzimas antioxidantes.
12 Discusión Hg Apoptosis y necrosis en diferentes tipos celulares Degeneración tubular Causa insuficiencia renal Estos cambios patológicos en los grupos tratados con LN, MC y LN más MC pueden deberse a un aumento de la producción de LPO y ROS que a su vez produce estrés oxidante.
13 Discusión Urea, ácido úrico y creatinina sérica. La urea elevada, en sangre se relaciona con un aumento del catabolismo de proteínas, o con una mayor síntesis de la enzima arginasa (implicada en la producción de urea). El aumento de las concentraciones plasmáticas de urea, ácido úrico y creatinina son debidas a al deterioro de la función renal tal como sugieren los cambios patológicos de los tejidos y el estrés oxidante.
14 Conclusiones. El estudio demostró que dosis bajas de exposición a MC y LN inducen respuestas de estrés oxidativo nefróticos, caracterizados por el daño histopatológico y alteraciones a los parámetros bioquímicos del suero. El cloruro de mercurio tiene mayor efecto tóxico que el nitrato de plomo. A pesar del tratamiento de dosis LD50 de plomo y mercurio, el mercurio causó mayores efectos dañinos en los riñones.
15 Bibliografía
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