El peso molecular de estos polímeros es muy elevado: en el caso del hombre, es de 3,6 X 10 12, que equivale a 5,6 X 10 9 pares de nucleótidos.
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- Diego Robles Soto
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2 INTRODUCCIÓN Los ácidos nucleicos son biomoléculas muy grandes. El peso molecular de estos polímeros es muy elevado: en el caso del hombre, es de 3,6 X 10 12, que equivale a 5,6 X 10 9 pares de nucleótidos. Fueron aisladas por primera vez por Miescher en 1870, a partir del núcleo de las células del pus; su nombre se origina del hecho de que la primera vez que se identificaron se observó que eran ácidos, además de que fueron identificados por primera vez en el núcleo celular.
3 INTRODUCCIÓN Características generales de los ácidos nucleicos En las células se encuentran dos variedades de ácidos nucleicos: el ácido desoxirribonucleico (ADN). el ácido ribonucleico (ARN). El ADN forma genes, el material hereditario de las células, y contiene instrucciones para la producción de todas las proteínas que el organismo necesita. El ARN está asociado a la transmisión de la información genética desde el núcleo hacia el citoplasma, donde tiene lugar la síntesis de proteínas, proceso al cual está estrechamente relacionado. Hay varios tipos de ARN, los tres más importantes: ARN mensajero (ARNm), ARN de transferencia (ARNt) ARN ribosómico (ARNr), 3
4 INTRODUCCIÓN Características generales de los ácidos nucleicos En las células eucariotas, el ADN se encuentra principalmente en el núcleo, pero también en las mitocondrias y en los cloroplastos. El ADN de las mitocondrias y de los cloroplastos es similar al de las células procariotas. El ADN nuclear está asociado a proteínas, las llamadas nucleoproteínas. Estas, básicamente, son histonas. También hay una pequeña cantidad de un grupo heterogéneo de proteínas, llamadas proteínas no histónicas. 4
5 INTRODUCCIÓN Características generales de los ácidos nucleicos El ADN de las mitocondrias y de los cloroplastos es similar al de las células procariotas. Durante mucho tiempo se creyó que el ADN procariota no estaba asociado a proteínas (ADN desnudo) y que estaba disperso en el citoplasma. En la actualidad, se ha observado que está asociado a proteínas no histónicas, formando una condensación llamada nucleoide, que, a diferencia del núcleo, carece de envoltura. También en los virus se han observado proteínas básicas asociadas al ADN. 5
6 Nucleótidos Subunidades de los ácidos nucleicos Los ácidos nucleicos son biopolímeros donde los monómeros son los nucleótidos, unidades moleculares que constan de: a. Un azúcar de cinco carbonos, -D-ribosa en el ARN o -D-desoxirribosa en el ADN. b. Un grupo fosfato (ácido fosfórico). c. Una base nitrogenada, o una purina de doble anillo o una pirimidina de anillo simple. 6
7 Nucleótidos Subunidades de los ácidos nucleicos 7
8 Nucleótidos Subunidades de los ácidos nucleicos El ADN contiene las bases púricas Adenina (A) y Guanina (G) y las bases pirimidínicas Citosina (C) y Timina (T), junto con el azúcar desoxirribosa y el fosfato. El ARN contiene las mismas bases púricas (A y G), pero en cuanto a las bases pirimidínicas, el Uracilo (U) reemplaza a la timina y contiene la citosina (C). 8
9 Nucleótidos Nucleósidos La unión de la base nitrogenada con la pentosa se realiza mediante un enlace N-glucosídico entre en C1 de la pentosa y el nitrógeno que ocupa la posición 1 en las bases pirimidínicas y el nitrógeno de la posición 9 en las bases púricas. Esta molécula recibe el nombre de nucleósido y pueden ser ribonucleósidos o desoxirribonucleósidos. Nucleósido 9
10 Nucleótidos Nucleósidos EL C1 DE LA PENTOSA SE UNE MEDIANTE ENLACE N-GLICOSÍDICO AL: -N9 EN BASES PÚRICAS (TERMINACIÓN OSINA ) -N1 EN BASES PIRIMIDÍNICAS (TERMINACIÓN IDINA )
11 Nucleótidos Ribonucleósidos
12 Nucleótidos Desoxirribonucleósidos desoxiadenosina desoxicitidina desoxiguanosina desoxitimidina
13 Nucleótidos Cuando al nucleósido se le une el fosfato mediante un enlace éster (éster fosfórico entre el carbono 5 de la pentosa y el grupo fosfato) tenemos los nucleótidos. Los nucleótidos se pueden separar en sus componentes por hidrólisis. Si es hidrólisis alcalina se separa en el nucleósido y el fosfato. Si es hidrólisis ácida en la base nitrogenada por un lado y la pentosa con el fósforo por otro. Nucleótido 13
14 Nucleótidos NH 2 HO O P N OH HO N O N N H OH adenina enlace N-glucosídico HO O P N O NH 2 N CH 2 O N N OH fosfato enlace OH desoxirribosa OH OH ester 14
15 Nucleótidos Los ácidos nucleicos están formados por cadenas de nucleótidos, unidos por enlaces covalentes entre la molécula de azúcar de un nucleótido (el carbono 3 de la ribosa o de la desoxirribosa) y la molécula de fosfato del siguiente nucleótido que a su vez está unido al carbono 5 de la pentosa. Estos enlaces son llamados uniones o puentes fosfodiéster, porque el fosfato está unido por una unión éster fosfato al azúcar del nucleótido y por otra unión equivalente al azúcar del nucleótido que lo precede. 15
16 16
17 Nucleótidos Las moléculas de ADN son considerablemente más grandes que las de ARN, pero además poseen una estructura doble, ya que están constituidas por dos cadenas que son complementarias entre sí. Las dos cadenas se enfrentan por las bases, que se mantienen unidas por la existencia de puentes de hidrógeno. La complementariedad proviene de que siempre una base púrica (de mayor dimensión) se enfrenta con una base pirimídinica y que el acoplamiento siempre enfrenta a A con T y a G con C. Este hecho es fundamental para permitir la duplicación ( replicación ) del ADN, ya que cada una de las cadenas sirve de molde para que se produzca la cadena complementaria respectiva. 17
18 Importancia de los nucleótidos Nucleótidos que no forman parte de los ácidos nucleicos. Se encuentran libres en las células. Pueden actuar como: Moléculas acumuladoras y donantes de energía. Adenosín monofosfato cíclico (APMc). Moléculas con función coenzimática. 18
19 Importancia de los nucleótidos Moléculas acumuladoras y donantes de energía ADP - ATP Son moléculas transportadoras de energía. Los fosfatos se unen mediante enlaces ricos en energía. En las reacciones que se libera energía (exergónicas) se forma ATP a partir de ADP. En las reacciones que se necesita energía (endergónicas) se hidroliza el ATP y da ADP y ácido fosfórico. También pueden actuar en estos procesos nucleótidos de guanina (GTP GDP). 19
20 Importancia de los nucleótidos 20
21 Importancia de los nucleótidos ATP como donador de energía 21
22 Importancia de los nucleótidos Moléculas con función coenzimática FAD Un coenzima es una molécula no proteica que interviene en reacciones enzimáticas. No son especificas de un tipo de sustrato. Los más importantes son: Nucleótidos de flavina FAD y FMN Nucleótidos de piridina NAD y NADP Coenzima A 22
23 Importancia de los nucleótidos Moléculas con función coenzimática Nucleótidos de flavina FAD y FMN Son coenzimas de deshidrogenasas (catalizan reacciones redox). 23
24 Importancia de los nucleótidos Moléculas con función coenzimática Nucleótidos de piridina NAD y NADP Son coenzimas de deshidrogenasas (catalizan reacciones redox).el NAD en la respiración celular y el NADP en la fotosíntesis. NAD NADP 24
25 Importancia de los nucleótidos Moléculas con función coenzimática Coenzima A Es un derivado del ADP. Interviene en procesos metabolicos como transportador de grupos acilo (R-CO-) procedentes de ácidos orgánicos. El acetil CoA, un derivado de la CoA con gran importancia en el metabolismo celular. 25
26 Ácidos nucleicos. Ácido desoxirribonucleico (ADN) ADN-A ADN-B ADN-Z los surcos son más parecidos en anchura: Más corta 19º surco mayor estrecho y profundo surco menor ancho y superficial Más larga bases algo inclinadas: 9º el surco mayor no existe, es muy poco profundo surco menor, profundo y estrecho dextrógira levógira 26
27 Ácidos nucleicos. Ácido desoxirribonucleico (ADN) Tipos de ADN según su estructura, su forma y su empaquetamiento ESTRUCTURA FORMA EMPAQUETAMIENTO Monocatenario (Virus) Lineal Asociado a histonas (Eucariotas) Bicatenario Circular (Procariotas) No asociado a histonas 27
28 Ácidos nucleicos. Ácido desoxirribonucleico (ADN) Estructura ADN Primaria Secundaria Terciaria 28
29 Ácidos nucleicos. Ácido desoxirribonucleico (ADN) ESTRUCTURA DEL ADN En el ADN se distinguen los tres niveles estructurales: 1. La estructura primaria o secuencia de nucleótidos. 2. La estructura secundaria o doble hélice. 3. La estructura terciaria o ADN superenrollado: torsión de la doble hélice sobre sí misma. Para conseguir que el ADN quepa dentro del núcleo, se encuentra muy empaquetado, y aún más cuando se condensa para formar un cromosoma. 29
30 ESTRUCTURA DEL ADN En 1953, James Watson y Francis Crick publicaron el primer modelo estructural de la molécula de ADN, (Premio Nobel de Medicina en 1962)
31
32 ESTRUCTURA PRIMARIA Es la secuencia de desoxirribonucleótidos. En un extremo 5 hay un fosfato. En el extremo 3 hay un OH. En un lateral se sitúan los fosfatos y en el otro las bases nitrogenadas.
33 ESTRUCTURA SECUNDARIA Se dispone en el espacio según el modelo de doble hélice propuesto por Watson y Crick. Previamente se produjeron dos importantes avances que permitieron llegar a las conclusiones sobre su estructura: E. Chargaff (1950): observó en muestras muy diferentes de organismos que existía siempre la misma proporción de bases nitrogenadas púricas que pirimídinicas. Estos resultados constituyen la denominada ley de equivalencia de bases de Chargaff.
34 Rosalind Franklin y M. Wilkins ( ): sus estudios mediante difracción de rayos X demostraron que la molécula posee una estructura helicoidal con dos periodicidades una cada 0,34 nm y otra cada 3,4 nm.
35 Modelo de Watson y Crick: El ADN está formado por dos cadenas polinucleotídicas unidas entre sí en toda su longitud. Las dos cadenas son antiparalelas (el extremo 3 de una de ellas se enfrenta con el extremo 5 de la otra).
36 Fosfatos van unidos al azúcar en el C-5 y el C-3 Hebras antiparalelas Punta 3 libre Punta 5 libre ACIDOS NUCLEICOS
37 Las bases de ambas cadenas se mantienen unidas por enlaces de hidrógeno. Adenina Timina 2 Enlaces de hidrógeno Guanina Citosina 3 Enlaces de hidrógeno El número de enlaces de hidrógeno depende de la complementariedad de las bases.
38 Las formas A y Z se estudian en unidad 21. FORMA B Es una doble hélice de 2 nm de diámetro. Armazón fosfoglucídico 0,34 nm 2 nm 3,4 nm Las bases nitrogenadas se encuentran en el interior. Las parejas de bases se encuentran unidas a un armazón formado por las pentosas y los grupos fosfato. Las cargas quedan en el exterior, estabilizando la estructura El enrollamiento es dextrógiro y plectonémico. Par de bases nitrogenadas Cada pareja de nucleótidos está situada a 0,34 nm de la siguiente y cada vuelta de doble hélice contiene 10 pares de nucleótidos. Las dos cadenas son antiparalelas y complementarias.
39 Extremo 5 Extremo 3 Extremo 3 Extremo 5
40 ADN monocatenario lineal (virus) Dímero concatenado (mitocondrias) ADN bicatenario lineal (virus) ADN monocatenario circular (virus) Cromatina (eucariotas) Cromosomas ADN bicatenario circular (bacterias) ADN asociado a histonas
41 ULTRAESTRUCTURA DEL ADN Y ORGANIZACIÓN DEL CROMOSOMA
42 Desnaturalización e hibridación del La desnaturalización se produce ADN al separarse las dos hebras por la rotura de los enlaces de hidrógeno. ph>13 o Tª 100 C Desnaturalización Desenrollamiento de las hélices Desnaturalización Renaturalización Dobles hélices de ADN Renaturalización Cadenas sencillas de ADN Manteniendo una temperatura de 65 C durante un tiempo prolongado se puede producir la renaturalización o hibridación del ADN.
43 Ácidos nucleicos. Ácido desoxirribonucleico (ADN) FUNCIÓN BIOLÓGICA DEL ADN El ADN es la molécula almacén de la información genética y contiene todas las instrucciones necesarias para construir todas las moléculas del cuerpo de un ser vivo. Para ello tiene que ser capaz de realizar copias de si mismo (replicarse) mediante un proceso basado en la complementariedad de las bases. En cuanto a su longitud, el ADN mide 1,7 µ en el virus del polioma; 1,36 mm en Escherichia coli; 11,2 cm en cada célula de Drosophila; 0,57 m en el erizo de mar; 0,93 m en el gallo; 1,89 m en el perro, 2,36 m en el hombre (sumando el ADN de los 46 cromosomas), etc. La longitud del ADN no siempre guarda relación con la complejidad del organismo. Muchas especies tienen mucho más ADN que el necesario para codificar su estructura y fisiología. Esto ha dado lugar a numerosas hipótesis sobre las funciones de ese ADN supernumerario. 43
44 EL ARN (Ácido Ribonucleico) No ramificado (=ADN) Tiene como pentosa la ribosa (diferente de ADN) En lugar de Timina tiene Uracilo (diferente del ADN) Suele ser monocatenario (excepción reovirus) Aparece en el núcleo y en el citoplasma.
45 Ácidos nucleicos. Ácido ribonucleico (ARN) El ARN se encuentra en muchos tipos de virus y en las células procariotas y eucariotas. En éstas hay de cinco a diez veces más ARN que ADN. Los ARN se clasifican en: 1. ARN bicatenario (en los reovirus) 2. ARN monocatenario: a. ARN de transferencia (ARNt) b. ARN mensajero (ARNm) c. ARN ribosómico (ARNr) d. ARN nucleolar (ARNn) El hecho de que las células que fabrican grandes cantidades de proteínas sean ricas en ARN fue una de las pistas para desvelar la transmisión de la información genética. 45
46 El ácido ribonucleico (ARN) Excepto en algunos virus, el ARN es monocatenario. Zona de doble hélice (horquilla). Bases complementarias. Bucle
47 ARN mensajero (mrna) Constituye una copia del ADN, que saldrá del núcleo llevando la información al citoplasma para que allí poder producirse la síntesis de proteínas. Una vez producida la síntesis de proteínas son destruídos ya que de lo contrario producirían proteínas indefinidamente. Constituye de un 3 a un 5% del total de ARN celular
48 ARN RIBOSÓMICO (rrna) Forma los RIBOSOMAS y participa activamente en la unión de los aa para formar las proteínas. No es específico de un organismo 80-85% del total de ARN celular Ribosoma 70s (procariotas) Ribosoma eucariotas 80 S (60s+40s)
49 ARN de transferencia Transportan los aminoácidos hasta los ribosomas. Todos los tipos de ARNt comparten algunas características: En el extremo 5 un triplete que tiene guanina y un ácido fosfórico libre. En el extremo 3 tres bases (C-C-A) sin aparear. Por este extremo se une al aminoácido. En el brazo A un triplete de bases llamado anticodón diferente para cada ARNt en función del aminoácido que transportan % del total de ARN Pueden aparecer otras bases
50 Ácidos nucleicos. Ácido ribonucleico (ARN) FUNCIONES DE LOS ÁCIDOS RIBONUCLEICOS Las funciones de los ARN pueden resumirse en tres: 1. Transmisión de la información genética desde el ADN a los ribosomas. Las enzimas ARN-polimerasas a partir de un gen de ADN, es decir, una secuencia de nucleótidos de ADN con información sobre una proteína, sintetizan, mediante la complementariedad de las bases, un ARN mensajero, proceso denominado transcripción. Luego, este ARNm llegará hasta los ribosomas. El ADN es utilizado únicamente como almacén de información genética. 2. Conversión de la secuencia de ribonucleótidos de ARNm en una secuencia de aminoácidos. Este proceso se denomina traducción y se realiza en los ribosomas. En él intervienen, además del ARNm, el ARNr de los ribosomas y el ARNt que transportan los aminoácidos. 3. Almacenamiento de la información genética. Algunos virus carecen de ADN y, por ello, contienen su información biológica en forma de ARN. Por ejemplo, el virus de la gripe, el de la polio, el de la inmunodeficiencia humana, los reovirus (que poseen ARN bicatenario), etc
51 Diferencias entre DNA y RNA 51
52 Diferencias entre DNA y RNA DNA RNA Doble cadena helicoidal Tiene las bases A, T, G y C La pentosa es una desoxirribosa Es una Macromolécula Esta en el Núcleo Constituye los Genes (se replica o se trascribe a RNA) Cadena Simple Tiene las bases A, U, G y C La pentosa es una ribosa Es más pequeña que el DNA Se encuentra en el citoplasma Es una molécula involucrada en la síntesis de proteínas 52
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