ghep-isfg GRUPO DE HABLA ESPAÑOLA Y PORTUGUESA GRUPO ESPANHOL E PORTUGUÊS DA ISFG

Transcripción

1 ghep-isfg GRUPO DE HABLA ESPAÑOLA Y PORTUGUESA GRUPO ESPANHOL E PORTUGUÊS DA ISFG XVII Jornadas del GHEP-ISFG San Andrés, Colombia, 5-6 de junio de 2012 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS **** EJERCICIO Presentación n de resultados Josefina Gómez Fernández Coordinadora del Ejercicio INSTITUTO NACIONAL DE TOXICOLOGÍA Y CIENCIAS FORENSES Servicio de Garantía de Calidad Departamento de Madrid

2 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Nivel básico Módulo de Parentesco Nivel Avanzado Módulo de Parentesco Estudio práctico Estudio teórico Desafío teórico de Parentesco Módulo Forense Estudio práctico Estudio teórico Módulo Forense Estudio práctico Desafío Teórico Forense

3 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Nivel básico Módulo de Parentesco Estudio práctico 4 muestras de sangre/saliva Análisis genético Es obligatoria la participación con un mínimo de marcadores autosómicos(12 STRs, al menos 7 comunes con CODIS) Estudio teórico Estudio teórico de parentesco simple

4 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Nivel Avanzado Módulo de Parentesco Desafío teórico de Parentesco Resolución de un caso de parentesco complejo (ausencias de un progenitor, familiares, mutaciones, etc )

5 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS EJERCICIO 2012 Nivel básico Módulo de Parentesco Estudio práctico M1: Sangre M2: Sangre M3: Sangre M4 : Saliva 100 µl Whatman Bioscience : Blood Stain Storage System M 1-M 4 PREPARACIÓN DE MUESTRAS

6 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Módulo de Parentesco M1 M2 M3 EJERCICIO 2012 M4 M1: Sangre M2: Sangre M3: Sangre M4 : Saliva Nivel básico PREPARACIÓN DE MUESTRAS

7 la muestra M4 es una mancha de saliva, todas ellas aplicadas en el círculo inferior de una tarjeta Blood Stain Storage System (BSSS), Whatman cortada a la mitad Se informóa todos los participantes por el 27 de Febrero

8 M5 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Módulo Forense Nivel básico PREPARACIÓN DE MUESTRAS Sangre EJERCICIO 2012 Estudio práctico 70 µl Semen 1 muestra cabello (2) M5(2004)/M2 5 mlsangre + 2,5 mlsemen + 0,5 mlss M6 Sin bulbo M3

9 Preparación de M5 en tela de algodón

10 FORMA DE ENVÍO 11 de Enero se escribe a los participantes de Latinoamérica solicitando se especifique la forma de envío que desean: DHL o valija diplomática. Todos los laboratorios de Argentina especifican su deseo de recibirlos por valija diplomática En Brasil, todos, excepto tres prefieren el envío por DHL. También piden envío por valija laboratorios de México, Ecuador, Colombia y El resto o por DHL o no contesta. Se hacen los envíos según la solicitud de los participantes. Se envía muestra a 121 laboratorios Por Agencia se envía muestra a 93 laboratorios el 14 de Febrero de 2012 Por valija diplomática en total a 28 laboratorios.

11 Valija diplomática EMBAJADA CONSULADO Argentina Buenos Aires Mendoza Bahia Blanca Cordoba Rosario Brasil Brasilea Sao Paulo Rio de Janeiro Porto Alegre Salvador Bahia Colombia Bogotá Venezuela Caracas Bolivia La Paz Santa Cruz de la Sierra Perú Lima México México Monterrey Guadalajara Uruguay Montevideo Panamá Panamá Ecuador Quito Guayaquil Chile Santiago de Chile R. Dominicana Santo Domingo Costa Rica San José de Costa Rica Guatemala Guatemala Honduras Teguzigalpa Puerto Rico San Juan El Salvador San Salvador Nicaragua Managua

12 Valija diplomática 17 de Febrero Argentina: Embajada de Buenos Aires 2 Consulado de Córdoba 1 Consulado de Bahía Blanca 1 Consulado de Mendoza 1 Rosario 20 de Febrero Costa Rica : 1 Embajada de San José 21 de Febrero Brasil: 1 Consulado Porto Alegre 1 Consulado Sao Paulo Ecuador: 2 Embajada Quito México: 1 Consulado Monterey Panamá: 1 Embajada. Panamá Uruguay: 1 Embajada. Montevideo 27 de Febrero de 2012 Colombia: 5 Embajada de Bogotá A través de las Embajadas de: - Argentina 10 laboratorios. - Costa Rica 1 laboratorio. - Colombia 5 laboratorios. - Uruguay 1 laboratorio. - Panamá 1 laboratorio. - Ecuador 2 laboratorios. A través de los Consulados de: -Porto Alegre (Brasil) 1 laboratorio. -Sao Paulo (Brasil) 1 laboratorio - Córdoba (Argentina) 2 laboratorios. - Monterrey (México) 1 laboratorio. -Mendoza (Argentina) 1 laboratorio. -Rosario (Argentina 1 laboratorio - Bahía Blanca (Argentina) 1 laboratorio. Todos reciben las muestras sin incidencias: tiempo medio 10 días.

13 Incidencias envío DHL En Europa se recibieron todos antes del 17/2/2012 La mayor parte de los laboratorios de Latinoamérica no tuvieron problemas excepto: México, Brasil y Venezuela Se rechazaron 8 envíos, que fueron destruidos en origen y se volvieron a enviar nuevas muestras. Los últimos en recogerlas lo hacen el 16/4/2012 Quedan sin poder retirarlas 3 laboratorios De estos ocho laboratorios, 5 envían resultados y 3 no.

14 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Participación NIVEL BÁSICO

15 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Países País n España 38 Portugal 11 Italia 4 France 2 R. Checa 1

16 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Países País n Brasil 16 Argentina 15 Colombia 14 Venezuela 6 Uruguay 4 Ecuador 3 México 2 Costa Rica 2 Panamá 1 Chile 1 Perú 1 República Dominicana 1

17 Módulo Parentesco /Módulo Forense Nivel Básico País Parentesco Forense España 38 (37) 29 (29) Portugal 11 (11) 6 (6) Italia 4 (4) 4 (3) France 2 (2) 2 (2) R. Checa 1 (1) 1 (1) Brasil 16 (13) 2 (1) Argentina 15 (14) 15 (13) Colombia 14 (12) 6 (4) Venezuela 6 (5) 2 (1) Uruguay 4 (4) 3 (2) Ecuador 3 (3) 1 (1) México 2 (1) 0 Costa Rica 2 (2) 1 (1) Panamá 1 (1) 0 Chile 1 (1) 1 (1) Perú 1 (1)

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19 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS

20 Módulo de Parentesco. Nivel básico

21 Módulo de Parentesco. Nivel básico Estudio práctico de Parentesco M1-M4: muestras de referencia Se solicita análisis genético de las 4 muestras de referencia. No se pretende investigar relaciones de parentesco entre ellas. M1 M2 M3 M4

22 Módulo de Parentesco. Nivel básico

23 PENTA C Módulo de Parentesco. Nivel básico Estándar europeo (ESS) LPL F13B F13A01 FES_FPS SE33_ACTBP2 D12S391 D1S1656 D2S441 D22S1045 D10S1248 Penta_E Penta_D FGA D5S818 D18S51 TPOX VWA D19S433 D2S1338 D16S539 D13S317 TH01 D3S1358 CSF1PO D7S820 D21S11 D8S1179 AMELOGENINA

24 Módulo de Parentesco. Nivel básico Módulo de Parentesco. Nivel básico Información sobre la evaluación de resultados

25 Asignación de valores de referencia Los valores de referencia se obtienen, preferentemente, por consenso entre los resultados emitidos por todos los participantes, complementado con la evaluación de los expertos asesores. Para poder consensuar un resultado hace falta una participación mínima de 5 laboratorios y una concordancia de resultados al menos de un 70% de los participantes, siempre que en los restantes no haya un resultado mayoritario. The reference values are obtained, preferably, by consensus among the results reported by all participants, supplemented by the evaluation of expert advisers. To establish a consensus result at least a minimum participation of 5 laboratories and an agreement of results from at least 70% of the participants is required, provided that the remaining have not reported a main result.

26 EVALUACIÓN DE RESULTADOS Resultados consensuados Discrepancias en nomenclatura, formato formulario C N 12/ (7,4569E+06) Discrepancias por trascripción E+06(7,4569E+06) T Electro 12/15 formulario 13/15 Para tenerlo en cuenta en los certificados es necesario informaral coordinador dentro del plazo indicado. Es imprescindible que se haya enviado el formulario por correo o en el plazo establecido. Cualquier otro tipo de discordancia D Las 4 muestras del ejercicio de parentesco básico se engloban en una única evaluación

27 Marcador/Locus Módulo n % de Parentesco. M1 (111) M2 (111) Nivel M3 (111) básico M4(110) Resultados A-STRs y Amelogenina/A-STR markers and Amelogenin Results (N=111) AMELOGENINA % X X/Y X X/Y D8S % 15 11/ /15 D21S % 28/31 29/30 28/29 29/31 D7S % 9/10 10/11 8/11 11 CSF1PO 98 95% 11/12 11/13 10/11 10/11 D3S % 15/ /16 17/18 TH % 6/9.3 8/9 9/9.3 6 D13S % 11/12 8/ /13 D16S % 11 11/ D2S % 17/20 17/ /25 D19S % 13/16 13/ VWA % 18 15/17 16/18 15/18 TPOX 97 96% 8/9 8 9/11 8/12 D18S % 13/17 12/14 16/17 14/15 D5S % 11/ /13 11/12 FGA % 22/25 21/22 22/23 20/25 Penta_D 54 96% 9/11 9/15 9 9/10 Penta_E 53 95% 10/16 12/13 12/14 7/18 D10S % 16/17 14/17 13/14 14/15 D22S % 15/16 11/15 11/15 11/15 D2S % 11/ /11 11/14 11 D1S % 15/ / /14 13/16.3 D12S % 17/18 18/22 15/17 18/19 SE33_ACTBP % 24.2/ / /30.2 FES_FPS 18 95% 10/11 10/11 10/12 11 F13A % 5/7 5/7 5 5/7 F13B 21 95% 9/10 9/10 6/9 8/9 LPL 21 95% 11/ /13 10/11 PENTA C % 11/12 11/12 11/12 12/13 STRs Autosómicos: Consensuados 28 Sistemas + AMELOGENINA

28 Módulo de Parentesco. Nivel básico STRs Autosómicos 111 Laboratorios Determinaciones Consensuadas 56 discrepancias 0,65% 14 laboratorios con discrepancias 12,73% 2011

29 Módulo de Parentesco. Nivel básico Y-STRs/Y-STR markers (N-86) n M2 n M4 % DYS % DYS 389 I % DYS ,7% DYS 389 II % DYS ,7% DYS % DYS / /14 95% DYS % DYS % DYS 439 GATA A % DYS 635 GATA C % DYS % GATA H % DYS % DYS % DYS % DYS 460 GATA A % GATA A % 5 laboratorios tienen problemas y no emiten resultados para STRsY

30 STRs Y Módulo de Parentesco Nivel básico Laboratorios 80 72% Determinaciones Discrepancias 6 0,26% Laboratorios con disc. 5 7,5%

31 Módulo de Parentesco. Nivel básico X-STRs/X-STR Markers (N=41) n % M1 M2 M3 M4 DXS % 10/ /12 10 DXS % /13 12 DXS % 9/ GATA31E % 11/ /12 12 GATA172D % 8/10 6 8/10 11 DXS % /16 14 DXS % DXS % 12/ /15 12 DXS % 11/ /12 11 DXS % 21/ /23 20 DXS % /20 16 DXS % 39/ /37 32 DXS % 8/ /18 15 DXS % / DXS % 19/ /25 22 DXS % 28/ / DXS % /20 17 DXS % 18/ / HPRTB %

32 Módulo de Parentesco Nivel básico STRs X Marcador N n M1 Marcador N n M1 DXS DXS /X DXS /54 DXS /53.1 DXS />

33 Módulo de Parentesco. Nivel básico STRs X Laboratorios 37 33% Determinaciones 1644 Discrepancias 26 1,6% Laboratorios con disc. 8 21,6%

34 Módulo de Parentesco. Nivel básico Sistemas consensuados A-STR 28 de 46 (61%) Y-STR 18 de 20 (90%) X-STR 19 de 26 (73%) AMELOGENINA EN TOTAL 66 SISTEMAS

35 Módulo de Parentesco. Nivel básico Discrepancias A-STRs 56 0,65% Y-STRs 6 0,26% X-STRs 26 1,63% TOTAL: Determinaciones Discrepancias 88 0,7% 14% errores de trascripción Laboratorios con disc %

36 Información sobre la evaluación de resultados ADN MITOCONDRIAL Haplotipo consensuado (Siempre informado por asesores) C Posiciones distintas al consenso D Posición informada no incluida en el rango de edición informado Posición no informada en el rango de edición de edición informado D D / C 93G 263G 315.1G 16304C / D 263G 315.1G 16304C D 93G 263G 315.1G 16304C

37 Módulo de Parentesco. Nivelbásico ADN MITOCONDRIAL M1 Evaluación Haplotipo n C 153G 263G 315.1C 523d 524d 16291T 16519C 7 C 153G 263G 315.1C 16291T 16 C 153G 263G 315.1C 16291T 16519C 2 C 153G 263G 315.1C 522d 523d 16291T 3 C 153G 263G 315.1C 521d 522d 750G 16291T 1 c 153G 263G 315.1C 521d 522d 750G 16291T 1 D 67W 118C 120G 168G 278G 330.1C 16291T 1 D 153G 263G 315.1C 522d 16291T 2

38 Módulo de Parentesco. Nivelbásico ADN MITOCONDRIAL M2 Evaluación Haplotipo n C 93G 263G 315.1G 16304C 25 C 93G 263G 315.1G 456T 513A 16304C 16519C 8 C 93G 263G 315.1G 456T 513A 16304C 2 C 93G 263G 315.1G 16304C 16519C 1 C 263G 315.1G 16304C 1 C/D? 93G 263G 315.1G 456T 513A 15884A? 16304C D 108G 118C 278G 16030T 16304C 1 D 263G 315.1G 456T 513A 16304C 16519C 1 D 93G 263G 315.1G 456T 513A 16304C 1 D 93G 263G 315.1G 16304C 16519C 1

39 Módulo de Parentesco. Nivelbásico ADN MITOCONDRIAL M3 Evaluación Haplotipo n C 263G 293C 309.1C 315.1C 26 C 263G 293C 309.1C 315.1C C? 263G 293C 309.1C 315.1C 750G(NC) 1 D 118C 278G 308C 324.1C 331C 1 D 293C 309.1C 315.1C 1 D 263G 293C 309.1C D 263G 293G 309.1C 315.1C 2

40 Módulo de Parentesco. Nivelbásico ADN MITOCONDRIAL M4 Evaluación Haplotipo n C 72C 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T 25 C 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T 10 D? 263G 309.1C 315.1C 309.2C 16298C 16301T 1 D? 72C 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301y 1 D 88R 278G 325C 331C 16224Y 16311Y D 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T 1 D 72C 263G 309.1C 315.1C 523.1C 523.2A 16298C 16301T 1 D 153G 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T 1 D 72C 263G 315.1C 16298C 16301T 1

41 Módulo de Parentesco. Nivelbásico ADN MITOCONDRIAL M / D 93G* 293C 309.1C 315.1C M / D 72C* 263G 309.1C 315.1C M / D 93G 263G 315.1G 456T** 513A** 16304C * Faltan posiciones según las regiones editadas ** Posiciones fuera de las regiones editadas

42 Módulo de Parentesco. Nivel básico ADN MITOCONDRIAL Laboratorios 42 Determinaciones 175 Discrepancias 19 10,8% Laboratorios con discrepancias 11 26%

43 Módulo Forense. Nivel Básico Estudio práctico forense M5: muestra forense para identificación de fluidos y análisis genético M6: muestra de cabello para análisis de ADN mitocondrial Contestan 66 laboratorios (90% de los inscritos) M5 66 laboratorios (100%) M6 30 laboratorios (45%)

44 Módulo Forense. Nivel Básico M5: muestra forense para identificación de fluidos y análisis genético Podría la muestra forense M5 corresponderse con una mezcla de fluidos? Establezca la naturaleza de los posibles componentes de la misma. Podría haber contribuido a la muestra M5 alguno de los donantes de las muestras de referencia M1, M2, M3, M4? M5 Sangre Semen 2:1 M M2

45 Módulo Forense. Nivel Básico M5 La analizan 66 laboratorios M5 Pruebas preliminares 41 STRs A 66 STRs Y 55 STRs X 23 ADN Mitocondrial EIADN 2011

46 Módulo Forense. Nivel Básico M5 PRUEBAS PRELIMINARES 41 laboratorios M5 Positivos Negativos Inconcluyentes Sangre Saliva Semen

47 Módulo Forense Nivel Básico M5 STRsA Marcador/Marker n % M5-1 n M5-2 AMELOGENINA 64 97% X/Y 44 X/Y D8S % 11/12/ /12 D21S % 28/29/30/ /30 D7S % 10/ /11 CSF1PO 47 78% 9/11/ /13 D3S % 15/16/ TH % 8/9/ /9 D13S % 8/11/ /13 D16S % 11/12/ /12 D2S % 17/ /19 D19S % 12/13/ /15 vwa 58 88% 15/ /17 TPOX 48 81% 8/9/ D18S % 12/14/ /14 D5S % 11/ FGA 51 78% 20/21/22/ /22 Penta D 24 83% 9/10/ /15 Penta E 24 83% 5/12/13/ /13 D10S % 14/15/16/ /17 D22S % 11/15/16/ /15 D2S % 10/11/ /11 D1S % 15/16/ /18.3 D12S % 18/22/ /22 SE33_ACTBP % 27.2/28.2/29.2/ /30.2 FES FPS 8 80% 10/11/12 13 M (Sangre) M2 (Semen=M2)) XY X/Y 13 11/12 28/ / /11 9/11 11/13 15/ /9 11/13 8/13 12/13 11/12 17/19 17/19 12/15 13/ /17 9/ /15 12/ /25 21/22 9/10 9/15 5/18 12/13 14/17 11/15 10/11 16 (NC) 15/ /28 18/ / / /12 10/11 EIADN 2011

48 Módulo Forense Nivel Básico M5 STRsA EV. Marcador n M5-1 M5-2 C D8S /12/13 11/12 C D8S /12/13 C D8S /12 C? D8S /12 13 C? D8S /12 11/12/13 C? D8S /12/13 11/12/13 C D21S /29/30/ /30 C D21S /29/30/30.2 C D21S / /30 C? D21S /30 28/30.2 C? D21S /30 28/29/30/30.2 C? D21S /29/30/ /29/30/30.2 D D21S /29/ /30 D D21S /29/30/ /30 D D21S /29/30 9 laboratorios han separado ambas fracciones EIADN 2011

49 Marcador n M5-1 M5-2 D12S /22/28 18/22 D12S /22 18/22 D12S /22/28 D12S /22/>27 18/22 D12S /22 D12S /28 18/22 D12S /22/>27 D12S /22/>27(28) D12S /22 18/22/28 D12S /22 18 Módulo Forense Nivel Básico M5 A-STR Informa 18/22

50 Sin l.d. Con l.d. F1 Con l.d F2 Módulo Forense Nivel Básico M5 A-STR Marcador n M5-1 M5-2 M M2 (Sangre) (Semen=M2)) 10 10/11 D7S /11 10/11 D7S /11 D7S /11 10 D7S /11 D7S /11/12 10/11 D7S

51 Módulo Forense Nivel Básico M5 STRsY Marcador/Marker M5-1 M5-2 DYS DYS-389-I 13/14 13 DYS DYS-389-II 29/30 29 DYS /17 17 DYS DYS /12/14 11/14 DYS /13 12 DYS /11 10 DYS-439-GATA-A DYS-635-GATA-C4 23/24 23 DYS GATA-H DYS /15 15 DYS DYS /19 19 M5 (2004) M /14 11/

52 Marcador/Marker n M5-1 M5-2 DXS /12 12 DXS /12 DXS / DXS /12 DXS DXS GATA31E GATA31E GATA172D GATA172D DXS /17 17 DXS /17 DXS /33 DXS DXS /33 33 DXS /14 14 DXS /14 DXS /13 DXS /13 12 DXS /22 22 DXS /22 M2 M5 (2004) Módulo Forense Nivel Básico M5 STRsX EIADN 2011

53 Módulo de Forense Nivel Básico M5 Determinaciones consensuadas Errores % Laboratorios Laboratorios con errores % A-STR ,09% % Y-STR ,47% % X-STR ,77% % Total STRs ,38% %

54 Valores de referencia de componentes individuales de M5/Reference values for M5 individual components M5: G 309.1C 315.1C 16266T M2: G 263G 315.1C 456T 513A 16304C 16519C M5 Sangre Semen 2:1 M M2

55 Módulo Forense. Nivel básico M5 ADN MITOCONDRIAL M5: G 309.1C 315.1C 16266T M2: G 263G 315.1C 456T 513A 16304C 16519C Sin lisis diferencial / R 263G 315.1C 16266Y 16304Y / d 118C 120G 278G 331C 16266Y 16304Y / R 263G 310Y 16266Y 16304Y / R 263G 309.1C 315.1C 16266Y 16304Y 16519C / g/a 263G 309.1C 315.1C 16266T/C 16304T/C / A/G 263G 309.1C 315.1C 16266T/C 16304T/C / R 263G 315.1C 16266Y 16304Y R 263G 309.1C/NI 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C , G 309.1C 315.1C 16266Y 16304Y 1-577/ R 263G 309.1C=3 09(rCRS) 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C sangre esperma discordante

56 Módulo Forense. Nivel básico M5 ADN MITOCONDRIAL M5: G 309.1C 315.1C 16266T M2: G 263G 315.1C 456T 513A 16304C 16519C Con lisis diferencial Fr / G 263G 315.1C 16266Y 16304Y / R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 750G R 16266Y 16304Y 16519C / R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y / R 263G 309.1C 315.1C 16266Y 16304Y / R 263G 16266Y 16304Y 1-576/ R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C , G 16266Y / R 263G 309.1C 315.1C 16304Y 1-576/ R 263G 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C 1-576/ R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C / R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266T 16304Y 16519C / G 309.1C 315.1C 16266Y 263G 315.1C 16266T 16304T/ C 16519C 1-576/ G 309.1C 315.1C 16266Y 16304Y 16519C R 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C / R 263G 309.1C(HL) 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y R 263G 309.1C 315.1C 16266Y 16304Y 16519C sangre esperma discordante

57 Módulo Forense. Nivel básico M5 ADN MITOCONDRIAL M5: G 309.1C 315.1C 16266T M2: G 263G 315.1C 456T 513A 16304C 16519C Con lisis diferencial Fr / R 263G 315.1C 16266Y 16304Y / R 263G 315.1C 456T 513A 750G A 16304C 16519C / R 263G 315.1C R 263G 309.1C 315.1C / G 315.1C 456Y 513R 16304Y 16519C / G 263G 315.1C 16304C 1-576/ R 263G 315.1C 456Y 513R 16266Y 16304Y 16519C / A 263G 309.1C 315.1C 456Y 513R 16266T 1-576/ R 263G 315.1C 456Y 513R 16304Y 16519C R 263G 315.1C 16304Y 16519C sangre esperma discordante

58 Módulo Forense. Nivel Básico M5: Podría la muestra forense M5 corresponderse con una mezcla de fluidos? Establezca la naturaleza de los posibles componentes de la misma. Podría haber contribuido a la muestra M5 alguno de los donantes de las muestras de referencia M1, M2, M3, M4? 64(97%) laboratorios identifican a M2 como componente de M5, e informan de la contribución de dos componentes. Sangre M Semen M2 29 laboratorios (45%) dicen que en M5 contribuyen 2 varones 18 laboratorios (30%) dicen que M2 coincide con la fracción espermática

59 Módulo Forense. Nivel básico M6: muestra de cabello para análisis de ADN mitocondrial Puede el cabello M6 pertenecer a alguno de los donantes de las muestras M1 a M4? Pelo sin contaminación M6 M3

60 Módulo Forense. Nivel básico M6 Lo analizan 33 laboratorios (50%) Realizan análisis preliminares 20 laboratorios (66%) Analizan ADN Mitocondrial 30 laboratorios (91%)

61 Módulo Forense. Nivel básico M6 PRUEBAS PRELIMINARES 20 laboratorios (66%) M6 Positivos Negativos Inconcluyentes Sangre Saliva Semen

62 Módulo Forense. Nivel Básico M6 ADN MITOCONDRIAL Analizan 30 laboratorios Correctos: 22(24) 73% de los laboratorios Discrepancias: 4(6) 13% M3 (referencia) 263G 293C 309.1C 315.1C C 263G 293C 309.1C 315.1C 16 C 263G 293C 309.1C 315.1C 16519C 6 C? 263G 293C 315.1C 1 C? 263G 1 D 263G 293C 309.1C 315.1C 16126C 16172C 16294T 16304C D? 150Y 263G 293y 309.1C 315.1C D 263G 309.1C 315.1C 16519C D 73G 263G 293C 315.1C D 73A/G 263G 309.1C 315.1C 16519C 1 laboratorio no obtiene resultados

63 Módulo Forense. Nivel básico M6: muestra de cabello para análisis de ADN mitocondrial Puede el cabello M6 pertenecer a alguno de los donantes de las muestras M1 a M4? ADN Mitocondrial 30 Laboratorios (45%) 22 laboratorios indican que puede pertenecer a M3 (73%) 4 laboratorios dicen que no puede pertenecer a M3 4 No obtienen buenos resultados o no especifican M9 M3

64 Módulo Forense. Nivel Básico M6 ADN MITOCONDRIAL Muestra/Sample n Haplotipo/Haplotype M G 293C 309.1C 315.1C M G 293C 309.1C 315.1C 16519C Error interpretación / D 263G 293C 309.1C 315.1C 16126C 16172C 16294T / C? 263G 293C 315.1C / D 150Y 263G 293Y 309.1C 315.1C / D 263G 309.1C 315.1C 16519C / D 263G 293C 309.1C 315.1C (16519) , D 73G 263G 293C 315.1C D 73A/ G 263G 309.1C 315.1C 16519C / / ? 263G 293C 309.1C 315.1C 16519C C

65 Ejercicio Forense Avanzado Estudio práctico forense M7: muestra forense para identificación de fluidos y análisis genético M8: muestra forense para identificación de fluidos y análisis genético M9: muestra de cabello para análisis de ADN mitocondrial e investigación de posible contaminación

66 EJERCICIO DE INTERCOMPARACIÓN ESTUDIO DE POLIMORFISMOS DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLÓGICAS Módulo Forense Nivel Avanzado M7 Estudio práctico 50 µl Sangre

67 Nivel Avanzado Módulo Forense Estudio práctico M8 50 µl 2 COMPONENTES Saliva (no MR) 5 ml Semen (D2): 1 ml ss: 1 ml Semen diluido 1,25 ml

68 Nivel Avanzado Módulo Forense Estudio práctico M9 Contaminado 1 mlsangre Se le añaden los pelos Se deja secar Se separan Se envían dos cabellos Pelo (M9) M1 Sangre (M9-cont) M2 (2011)

69 Ejercicio Forense Avanzado PARTICIPACIÓN

70 Ejercicio Forense Avanzado M7 La analizan 37 laboratorios (88%) Pruebas preliminares: 32 laboratorios (86%) STRsA y X y Mitocondrial Citocromo B 1 laboratorio 9 laboratorios

71 Ejercicio Forense Avanzado M7Indique la naturaleza de los componentes y el número mínimo de contribuyentes detectados en las muestras M7. PRUEBAS PRELIMINARES: 32 laboratorios (86%) Sangre 32 Semen 29 Saliva 20 Positivo Negativo Saliva _ 20 Sangre 25 _ Semen Indeterminada 11 _ 2 laboratorios dicen que es humana

72 Ejercicio Forense Avanzado M7 Indique la naturaleza de los componentes y el número mínimo de contribuyentes detectados en las muestras M7. La analizan 37 laboratorios (88%)

73 Ejercicio Forense Avanzado M7 Podría haber contribuido a las muestras M7 alguno de los donantes de las muestras de referencia M1, M2, M3, M4? Todos los laboratorios descartan las muestras M1-M4 como contribuyentes de M7 Conclusiones y observaciones Fluido no humano 6 Sangre no humana 13 Animal 2 Gato 11 Sangre humana 2

74 Ejercicio Forense Avanzado M7 Técnicas Citocromo B 8 Citocromo B+ RNA 16S 1 No informa 1 ADN Mitocondrial 1 1 laboratorio informa de resultados para STRsA y X 1 laboratorio da resultados para ADN mitocondrial

75 Ejercicio Forense Avanzado M7 La analizan 37 laboratorios 30 laboratorios (81%) descartan que sea humana 11 laboratorios (30%) dicen que es sangre de gato 1 laboratorio dicen que es humana que ha sufrido degradación o inhibición (pruebas preliminares?) 1 laboratorio indica haber detectado hemoglobina humana (pruebas preliminares?) 5 no concluyen

76 M8 Ejercicio Forense Avanzado Participación Mujer? M4 Laboratorios 42 (100%)

77 M8 Ejercicio Forense Avanzado M8 Pruebas preliminares 32(76%) M8 n Positivo Negativo Sangre Saliva Semen Laboratorios con errores 3 (9%) Falsos negativos Saliva 2 (9%) Semen 1 (3%)

78 Marcador M8-1 M8-2 Saliva Semen (D4) AMELOGENINA X/Y X/Y D8S /14/15 13/15 D21S11 28/29/30/31 29/31 D7S820 11/12 11 CSF1PO 10/11 10/11 D3S /18 17/18 TH01 6/9 6 D13S317 12/13/14 12/13 D16S539 12/13/14 12 D2S /24/25 20/25 D19S433 12/14/ vwa 15/16/17/18 15/18 TPOX 8/11/12 8/12 D18S51 14/15/16 14/15 D5S818 10/11/12/14 11/12 FGA 20/22/23/25 20/25 Penta-D 9/10/12/13 9/10 Penta-E 5/7/18 7/18 D10S /14/15 14/15 D22S /15 11/15 D2S D1S /16/ /16.3 D12S391 17/18/19 18/19 SE33-ACTBP2 19/20/ /30.2 F13A01 5/7 x X/Y 14 13/ /31 11/ / /18 6/9 6 12/14 12/13 13/ /25 12/ /17 15/18 8/11 8/12 14/16 14/15 10/14 11/12 22/23 20/25 12/13 9/10 5/7 7/ / / / / /19 20/30.2 5/7 Ejercicio Forense Avanzado M8 F13B 6/8/9 8/9 LPL 10/11 10/11 CD4 5/6 MBPB 7/12

79 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 D8S /14/15 13/15 C D8S /14/15 C D8S /15 C D8S /15 14? D8S /14/15 13/14/15? No separan (ld) D8S /15 D D8S /15 D perfil único Sin lisis Con lisis 1ªF Con lisis 2ªF

80 Ejercicio Forense Avanzado M8 Evaluación media STRs A n Evaluación % 32 Consenso 76,19 4 Perfiles por separado 9,76 3 Cambian fracción 7,14 2 No separa 4,76 1 Discordante 2,38

81 Marcador n M8-1 M8-2 DYS DYS DYS-389-I DYS-389-I DYS DYS DYS-389-II DYS-389-II DYS DYS DYS DYS DYS /14 11/14 DYS /14 DYS DYS DYS DYS DYS-439-GATA-A DYS-439-GATA-A DYS-635-GATA-C DYS-635-GATA-C DYS DYS GATA-H GATA-H DYS DYS DYS DYS DYS DYS M / Módulo Forense Nivel Avanzado M8 Y-STR

82 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 Marcador/Marker n M8-1 M8-2 DYS DYS DYS DYS 389 I DYS 389 I DYS 389 I 5 13 DYS 389 I DYS DYS DYS

83 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 Marcador n M8-1 M8-2 DXS /12 10 DXS /12 DXS /13 12 DXS /13 DXS DXS GATA31E /12 12 GATA172D05 4 (NC) 8/11 11 DXS /16 14 DXS /16 Saliva Semen (M4) Módulo Forense Nivel Avanzado M8 X-STR DXS / DXS /13 DXS9902 4(NC) 11/12/ DXS6789 4(NC) 20/ EIADN 2011

84 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 No consensuado Marcador n M8-1 M8-2 DXS /15/16 15 DXS /15 15 DXS /15/16/18 DXS /15/16 DXS /15/16 15 DXS /22/31 22 DXS /22/31 22 DXS /21/22/31 DXS /22/31 DXS /22/31 22 Módulo Forense Nivel Avanzado M8 X-STR Da lugar a error de interpretación (3 contribuyentes) EIADN 2012

85 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 RESUMEN STRs A-STR Y-STR X-STR Laboratorios Determinaciones Sistemas consensuados 29+ Am 16 6 Discrepancias % Discrepancias 2,7% 0,8% 9% Laboratorios con discrepancias 9(*) 4 4(*) % laboratorios 21% 12 33% (*) 2 laboratorios aportan el 48% de las discrepancias (**) 1 laboratorio que no ve la mezcla aporta el 69% de las discrepancias En total 13 laboratorios (31%) tienen alguna discrepancia

86 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla M8 ADN MITOCONDRIAL Participan 19 laboratorios (45%) Muestra/Sample Haplotipo Saliva M8 263G, 309.1C, 315.1C Muestra/Sample Semen M8 (D4) Haplotipo 72C 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T Mujer? M4

87 Muestra/Sample Semen M8 (D4) Saliva M8 Sin lisis diferencial M8 263G 309.1C 315.1C M8 72T/C 263G 309.1C 315.1C 16298T 16301C/T M8 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y M8 263G 309.1C 315.1C M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y M8 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y Con lisis diferencial Haplotipo 72C 263G 309.1C 315.1C 16298C 16301T 263G 309.1C, 315.1C 16519C 1ª FRACCION M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 750G 15904Y 16298Y 16301Y 16519Y M8 72Y 263G 309.1C 309.2C 315.1C 750G 15904Y 16298Y 16301Y 16519Y M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 750G 15904Y 16298Y 16301Y M8 263G 309.1C M8 263G 309.1C 315.1C 16519C M8 72Y 263G 309.1C 309.2C 315.1C 16298Y 16301Y 16519Y M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y 16519Y M8 72Y 263G 309.1C 315.1C 16298Y 16301Y 16519Y 2ª FRACCIÓN M8 72C 263G 309.1C 315.1C 750G 15904T 16298C 16301T 16519Y M8 263G 309.1C 315.1C M8 263G 309.1C M8 263G 309.1C 309.2C 315.1C M8 263G 309.1C 315.1C 16519C M8 72Y 263G 309.1C EIADN 315.1C20(2012) 16298Y 16301Y 16519Y El mismo

88 Ejercicio Forense Avanzado M8 Establezca la naturaleza de los posibles componentes de la misma 1 laboratorios no ve la mezcla 1 informa de 1 varón y 2 mujeres (STRsX cont?)

89 Ejercicio Forense Avanzado M8 Podría haber contribuido a la muestra M8 alguno de los donantes de las muestras de referencia M1, M2, M3, M4? Mujer? M4 35 laboratorios (83%) M4 12 laboratorios (29%) informan: Semen (M4) y saliva (mujer desconocida) 1 laboratorio indica que detecta el mismo componente que en M9?(Mitocondrial)

90 M8 Ejercicio Forense Avanzado Mezcla-M8 CONCLUSIONES M8 El 76% investigan la presencia de fluidos (pruebas preliminares) El 70% hacen lisis diferencial El 71 % de los laboratorios detectan la presencia de ESPERMA El 45 % de los laboratorios detectan la presencia de SALIVA El 83% de los laboratorios identifican a M4 como componente de la mezcla. Tan solo 12 laboratorios (29%) informan que es una mezcla de saliva y semen, mujer y hombre y que el perfil de este es compatible con M4.

91 M9 Ejercicio Forense Avanzado Se detecta contaminación en el cabello con algún fluido biológico? En caso positivo, podría el contaminantede la muestra de cabello proceder de alguno de los donantes de las muestras M1 a M4? Puede el cabellom9 pertenecer a alguno de los donantes de las muestras M1 a M4? La investigan 36 Laboratorios (86%) Pelo (M9) M1 Sangre (M9-cont) M2 (2011)

92 Ejercicio Forense Avanzado M9 PRUEBAS PRELIMINARES: 32 laboratorios (89%) n Positivo Negativo Sangre Saliva Semen 22 1 Indeterminada 7 EIADN 2011

93 Marcador/Marker n M9 M2:2011 DYS_ DYS_389_I DYS_ DYS_389_II DYS_ DYS_ DYS_ /14 11/14 DYS_ DYS_ DYS_439_GATA_A DYS_635_GATA_C DYS_ GATA_H DYS_ DYS_ DYS_ Marcador/Marker n M9 M2:2011 DXS DXS DXS DXS DXS GATA31E GATA172D DXS DXS DXS HPRTB DXS DXS DXS DXS DXS Ejercicio Forense Avanzado M9 Marcador/Marker n M9 M2:2011 AMELOGENINA 27 X/Y X/Y D8S /15 10/15 D21S / /32.2 D7S /12 10/12 CSF1PO 26 11/13 11/13 D3S /18 16/18 TH /9.3 7/9.3 D13S D16S /12 9/12 D2S /19 17/19 D19S /13 12/13 VWA 29 15/16 15/16 TPOX D18S /16 15/16 D5S /11 10/11 FGA 25 19/ /22.2 Penta_D 13 9/12 9/12 Penta_E 12 10/13 10/13 D10S /16 12/16 D22S /14 11/14 D2S D1S /16 12/16 D12S / /18.3 SE33_ACTBP / /22.2 F13B 3 6/8 6/8 LPL 3 11/13 11/13

94 Ejercicio Forense Avanzado M9 Contaminante STRs A STRs Y STRs X Laboratorios Determinaciones Sistemas consensuados 23+Am 16 3(16*) Discrepancias % 2% 1% 4% Laboratorios con discrepancias % 17% 4% 17%

95 Fracción 1 Sin lisis diferencial 10 laboratorios 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 153G 263G 310C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 16519C 16519C M9 Fracción 2 153G 263G 315.1C 16291T 16354Y 153G 263G 315.1C T 153G 263G 315.1C 16291T 153G 263G 315.1C 16291T 153G 263G C 16291T 153G 263G 315.1C 16291T 153G 263G 315.1C T 16519C 263G 309.1C 315.1C 153R 263G 309.1C 315.1C 16291Y Muestra/Sample Haplotipo/Haplotype M1 (PELO) 153G 263G 315.1C 523d 524d 16291T 16519C M2(2011)(SANGRE) 263G 309.1C 315.1C 16519C

96 Fracción 1 Con lisis diferencial 11 laboratorios 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 16519C 263G 309.1C 315.1C 16519C 263G 309.1C 315.1C 16519C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 263G 309.1C 315.1C 16519C 72Y 263G 309.1C 315.1C 153G 263G 315.1C 16291T M9 Fracción 2 153G 263G 315.1C 16291T 153G 263G 315.1C T 16519C 263G 309.1C 315.C 153G 263G 315.1C T 263G 309.1C 315.1C 153G 263G 315.1C 16291T 153G 263G 315.1C T 16519C Muestra/Sample Haplotipo/Haplotype M1 (PELO) 153G 263G 315.1C 523d 524d 16291T 16519C M2(2011)(SANGRE)263G 309.1C 315.1C 16519C

97 Ejercicio Forense Avanzado M9 Se detecta contaminación en el cabello con algún fluido biológico? 2 FALSOS POSITIVOS (SALIVA Y SEMEN) 2 FALSOS NEGATIVOS (SANGRE ) En caso positivo, podría el contaminante de la muestra de cabello proceder de alguno de los donantes de las muestras M1 a M4? Tan solo un laboratorio dice que puede corresponder a M4 Varios laboratorios reflejan en el comentario la coincidencia del perfil del contaminante con el de M3, con el que tiene del que difiere en una única posición

98 Ejercicio Forense Avanzado M9 Puede el cabello M9 pertenecer a alguno de los donantes de las muestras M1 a M4?

99 Ejercicio Forense Avanzado M9 CONCLUSIÓN 13 laboratorios de los 23 (56%) que analizan ADN mitocondrialidentifican a M1 como posible contribuyente de M9. 21 laboratorios (72%) concluyen que el contaminante no coincidecon ninguna de las muestras M1-M4. 7 laboratorios (19%) indican que el pelo M9 coincide con M1 y la sangre contaminante (varón), no es compatible con M1-M4 Conclusiones incorrectas No ven contaminante No obtiene perfil del pelo, solo del contaminante 4 laboratorios no obtienen resultados para el pelo

100 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Módulo de Parentesco/Kinship Module Planteamiento/Approach Se trata de calcular el índice de maternidad (IM) de la Supuesta Madre respecto del Hijo. Utilice las frecuencias alélicas reflejadas en la tabla del Anexo. Tasa de mutación de un paso=1x10-3 Frecuencia de alelos silentes=5x10-3

101 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Hijo Supuesta Madre D8S1179 8/12 11/12 D21S11 28/29 28/31 D7S820 8/9 8/12 CSF1PO 10/11 10/11 D3S /16 14/16 TH01 7/10 6/10 D13S317 11/13 13 D16S /13 D2S /24 24/25 D19S433 14/15 13/15 vwa 14/16 14/15 TPOX 9 9 D18S51 12/16 16/20 D5S818 11/13 11/13 FGA 21/26 18/21

102 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Marcador/Marker n % IM/MI D8S % 2,0000E+00 D21S % 2,0781E+00 D7S % 1,4376E+00 CSF1PO 89 80% 1,7577E+00 D3S % 3,2693E+00 TH % 5,3191E+01 D13S % 4,4248E+00 D16S % 1,7007E+01 D2S % 2,9727E+00 D19S % 1,5753E+00 VWA 88 79% 2,2957E+00 TPOX 82 74% 9,1075E+00 D18S % 1,4637E+00 D5S % 2,3305E+00 FGA 79 71% 1,5106E+00 TOTAL 73 66% 6,9339E+07

103 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco D8S ,0000E+00 C D8S ,0004E+00 C D8S N D8S E+00 N D8S E+00 N D8S ,3599E+03 D D8S , N D8S ,0110E+00 C D8S ,0103E+00 C D8S ,0013E+00 C D8S ,0000E+0 N D8S ,00000 N D8S ,0000 N D8S ,7655E+00 D D8S E+00 N El criterio de aceptación de resultados para la evaluación seráde ±5% del VR

104 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Marcador/Marker n % IM/MI D8S % 2,0000E+00 D21S % 2,0781E+00 D7S % 1,4376E+00 CSF1PO 89 80% 1,7577E+00 D3S % 3,2693E+00 TH % 5,3191E+01 D13S % 4,4248E+00 D16S % 1,7007E+01 D2S % 2,9727E+00 D19S % 1,5753E+00 VWA 88 79% 2,2957E+00 TPOX 82 74% 9,1075E+00 D18S % 1,4637E+00 D5S % 2,3305E+00 FGA 79 71% 1,5106E+00 TOTAL 73 66% 6,9339E+07 N (10%) % ,20% ,10% ,10% ,30% ,30% ,20% ,20% ,30% ,20% ,20% ,00% ,20% ,10% ,10% ,10% ,09%

105 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco 9,0000E+07 TOTAL (E+07) Frecuencia Total 8,0000E+07 7,0000E+07 6,0000E+07 5,0000E+07 4,0000E+07 3,0000E

106 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Fórmulas a aplicar Marcador Hijo Supuesta Madre D8S1179 8/12 11/12 1/4f(12) D21S11 28/29 28/31 1/4f(28) D7S820 8/9 8/12 1/4f(8) CSF1PO 10/11 10/11 f(10)+f(11)/4f(10)f(11) D3S /16 14/16 f(14)+f(16)/4f(14)f(16) TH01 7/10 6/10 1/4f(10) D13S317 11/ /2f(13) D16S /13 1/2f(10) D2S /24 24/25 1/4f(24) D19S433 14/15 13/15 1/4f(15) vwa 14/16 14/15 1/4f(14) TPOX 9 9 1/f(9) D18S51 12/16 16/20 1/4f(16) D5S818 11/13 11/13 f(11)+f(13)/4f(11)f(13) FGA 21/26 18/21 1/4f(21) IM

107 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Evaluación n % Laboratorios % Discrepancias D 37 2,1% 11 9,9% Formato N 105 5,9% 17 15,3% Punto (coma)? 74 4,2% 5 4,5% Consenso C ,8% 83 74,8% 11 Laboratorios tienen errores (9,9 %) 37 Discrepancias (2,1%) (±10%) 179 Datos incorrectamente expresados (10,1%) Un 19,8% de los laboratorios tienen problemas en expresar los resultados en notación científica

108 Módulo de Parentesco Nivel Básico Estudio Teórico de Parentesco Conclusiones: IM totales: 10 discordancias al valor consenso (± 10%) 3 laboratorios presenta 6 discrepancias?? debidas a la inclusión en el cálculo de alelos silentes para los marcadores en homocigosis en el hijo (3%). 5 laboratorios aplican las fórmulas correctas pero dan valores de IM parciales discordantes (6 discrepancias) 1 laboratorio da valores con ligeras diferencias que pueden deberse a haber aplicado otras frecuencias 2 laboratorios presentan 16 discordancias (43 % de las discordancias).

109 Módulo Forense Nivel Básico Estudio Teórico Planteamiento Tras el análisis de los restos de sangre hallados en las uñas de un sospechoso de un homicidio se detecta el perfil genético reflejado en la tabla. Asumiendo la codominancia de todos los alelos en los marcadores STR analizados y teniendo en cuenta las frecuencias alélicas reflejadas en el Anexo: Calcule las frecuencias genotípicas y la frecuencia esperada de ese perfil en la población en la que fueron estimadas las frecuencias alélicas. Asumiendo coincidencia de este perfil con el perfil genético de la víctima del homicidio, calcule la razón de máxima verosimilitud (LR) especificando las hipótesis formuladas. Elija la conclusión correcta entre las distintas opciones que se ofrecen Approach The genetic profile shown in the table was obtained after having analyzed the traces of blood recovered from the fingernails of a homicide suspect. Assuming autosomal, entirely codominant alleles at STR loci and taking into account the allele frequencies shown in the Appendix: Calculate the genotype frequencies and the expected frequency of that DNA profile, in the population where the allele frequencies were estimated. Assuming that the obtained profile matches the victim s profile, calculate the likelihood ratio (LR) and specify the formulated hypotheses. Choose the correct conclusion among the different options. 2011

110 Módulo Forense Nivel Básico Estudio Teórico Marcador/Locus n % Frecuencia/Frequency CSF1PO ,9433E-01 D13S ,2769E-02 D16S ,6822E-02 D18S ,8946E-02 D19S ,0528E-01 D21S ,6836E-02 D2S ,1984E-03 D3S ,0467E-02 D5S ,8782E-02 D7S ,0590E-02 D8S ,9525E-02 FGA ,6270E-02 TH ,0176E-01 TPOX ,5432E-01 VWA ,3010E-01 Frecuencia del perfil ,7176E-20 Frecuencia del perfil 56 1,7270E-20 C 2 1,71799E-02 N E-20 N 1 1,7176E-02 N 1 3,1480E-20 D 1 2,3720E-20 D Frecuencias parciales N EVALUACIÓN % 972 C N 8 56 D 5 Laboratorios N EVALUACIÓN % 44 C N D 17

111 Módulo Forense Nivel Básico Estudio Teórico LR TOTAL 54 5,8219E+19 C E+19 N 1 5,8219E19 N 1 5,8222E19 N 1,00E+22 1,00E+21 1,00E+20 1,00E+19 1,00E+18 1,00E+17 1,00E+16 1,00E+15 1,00E+14 1,00E+13 1,00E+12 1,00E+11 1,00E+10 1,00E+09 1,00E+08 1,00E+07 1,00E LR 1 5,8234E19 N 1 5, N 1 5, N 1 58,219E+18 N E+06 D 2 7,1338E+21 D 1 5,1147E+14 D 1 7,1338E+21 D 1 3,1863E+16 D 1 3,1766E+19 D? 1 4,2149E+19 D? 1 1,9812E+19 D?

112 Módulo Forense Nivel Básico Estudio Teórico Elija la conclusión correcta entre las distintas opciones que se ofrecen. Es X (= valor de LR) veces más probable que los restos de sangre hallados en las uñas procedan de la víctima a que procedan de un individuo al azar de la población no relacionado genéticamente con la víctima. La obtención del perfil genético detectado a partir de los restos de sangre hallados en las uñas es X (=valor de LR) veces más probable si dichos restos de sangre procedieran del sospechoso que si procedieran de un individuo al azar de la población no relacionado genéticamente con el sospechoso. El sospechoso ha cometido el homicidio. La obtención del perfil genético detectado a partir de los restos de sangre hallados en las uñas es X (=valor de LR) veces más probable si dichos restos de sangre procedieran de la víctima que si procedieran de un individuo al azar de la población no relacionado genéticamente con la víctima. Los restos de sangre hallados en las uñas del sospechoso proceden de la víctima. 2011

113 Módulo de Parentesco Nivel Avanzado Desafío Teórico de Parentesco Planteamiento Se trata de un trío típico de paternidad. El padre alegado y la madre no están emparentados. Se realiza el tipaje del trío, obteniéndose los siguientes perfiles de STR autosómicos. Se trata de calcular los valores de LR (Likelihood Ratio) para la paternidad del padre alegado respecto del hijo. Utilice las frecuencias alélicas reflejadas en la tabla del Anexo. Tasa de mutación de un paso para D3S13538= 1x10-3 Tasa de alelo silente para D3S13538= 5x10-3

114 Módulo de Parentesco Nivel Avanzado Desafío Teórico Padre alegado Hijo Madre CSF1PO 12 12/13 12/13 D13S317 9/12 8/9 8/12 D16S539 9/10 9/14 12/14 D18S /14 12/16 D21S11 32/ / /32.2 D3S D5S818 10/11 9/10 9/11 D7S820 10/11 9/11 9/11 D8S /14 13/14 13 FGA 24 23/24 23/25 Penta E 16/20 11/16 11/14 Penta D 9/13 9/13 11/13 TH01 7 6/7 6/7 TPOX 10/11 8/11 8 VWA 16/ /18 AMEL XY XY X

115 Módulo de Parentesco Nivel Avanzado Desafío Teórico Padre alegado Hijo Madre N CONSENSUAD OS CSF1PO 12 12/13 12/ ,5189E+00 D13S317 9/12 8/9 8/ ,6805E+00 D16S539 9/10 9/14 12/ ,1220E+00 D18S /14 12/ ,1958E+00 D21S11 32/ / / ,1546E+01 D21S ,0638E+02 D3S D5S818 10/11 9/10 9/ ,4738E+00 D7S820 10/11 9/11 9/ ,5596E+00 D8S /14 13/ ,3191E+00 FGA 24 23/24 23/ ,9541E+00 Penta E 16/20 11/16 11/ ,3375E+00 Penta D 9/13 9/13 11/ ,0989E+01 TH01 7 6/7 6/7 42 2,4894E+00 TPOX 10/11 8/ ,8025E+00 VWA 16/ / ,2342E+00 Frec. mínima Alelo silente

116 D3S ,2597E-04 D3S ,3070E-04 D3S ,3069E-04 D3S ,0903E-03 D3S ,7603E-03 D3S ,0491E-03 D3S ,3935E-03 D3S ,4400E-02 D3S ,2257E-03 D3S ,1100E+00 D3S ,2269E-05 D3S ,3121E-08 D3S ,3694E-03 D3S ,6145E-04 D3S ,6688E-04 D3S ,4934E-03 D3S E+00 D3S , D3S ,4870E-03 D3S ,9910E-02 D3S ,9910E-05 D3S ,2080E-03 D3S E-01 D3S ,8574E-03 D3S ,0556E+00 D3S E-02 D3S ,0208E+00 D3S ,0413E-03 D3S ,1956E+00 D3S ,4632E-02 D3S ,0490E-03 D3S ,0000E-03 D3S ,0903E-02 D3S ,2129E-01 D3S ,4948E+0 D3S ,5084E-02 D3S E-03 D3S ,1062E-03 D3S ,2143E-05 D3S ,6666E-03 D3S ,8534E-03 D3S E-03 D3S ,8913E-04 TOTAL 3 1,6525E+06 TOTAL 2 2,7333E+06 TOTAL 2 4,9262E+06 TOTAL 1 3, TOTAL 1 5,4821E+06 TOTAL 1 5,3889E+07 TOTAL 1 4,4766E+07 TOTAL 1 3,7305E+06 TOTAL 1 4,4724E+06 TOTAL E+06 TOTAL 1 3,9493E+08 TOTAL 1 9,7924E+06 TOTAL 1 4,4037E+09 TOTAL 1 5,7364E+04 TOTAL E+07 TOTAL 1 6,9662E+05 TOTAL E+06 TOTAL 1 7,2261E+06 TOTAL 1 7,5436E+04 TOTAL 1 7,5711E+09 TOTAL 1 7,6991E+06 TOTAL 1 7,6991E+07 TOTAL TOTAL 1 3,6254E+06 TOTAL 1 1,9663E+07 TOTAL 1 7,2263+E06 TOTAL 1 1,8584E+06 TOTAL E+10 TOTAL 1 3,5691E+06 TOTAL 1 1,1441E+07 TOTAL 1 1,2864E+07 TOTAL 1 1,4193E+07 TOTAL 1 1,5163E+10 TOTAL 1 1,6610E+06 TOTAL 1 1,7855E+06 TOTAL 1 1,9244E+07 TOTAL 1 1,9249E+05 TOTAL E+08 TOTAL 1 3,3988E+06 TOTAL 1 3,4977E-56 TOTAL 1 3,4263E+06 TOTAL 1 1,7188E+06 TOTAL 1 3,4262E+06 TOTAL 1 2,5585E+05 TOTAL 1 3,1483E+06 TOTAL 1 2,9156E+08 TOTAL 1 2,6652E+06 TOTAL 1 2,5750E+05 TOTAL 1 2,5701E+07 TOTAL 1 2,5700E+07

117 CSF1PO 2,5189E+00 CSF1PO 2,5188E+00 CSF1PO 2,5189E+00 D13S317 D16S539 D18S51 D21S11 7,6805E+00 4,122E+00 6,1958E+00 5,1546E+01 D13S317 D16S539 D18S51 D21S11 7,6804E+00 4,122E+00 6,1957E+00 5,1546E+01 D13S317 D16S539 D18S51 D21S11 7,6805E+00 4,1220E+00 6,1958E+00 1,0638E+02 Desafío Teórico de Parentesco D3S1358 1,44E-02 D3S1358 1,39E-03 D3S1358 2,09E-02 D5S818 7,4738E+00 D5S818 7,4738E+00 D5S818 7,4738E+00 D7S820 D8S1179 FGA Penta_D 1,5596E+00 2,32E+00 6,95E+00 2,34E+00 D7S820 D8S1179 FGA Penta_D 1,7140E+00 2,32E+00 6,95E+00 2,34E+00 D7S820 D8S1179 FGA Penta_D 1,5596E+00 2,32E+00 6,95E+00 2,34E+00 Si analizamos 3 laboratorios (con todos los valores correctos) Penta_E TH01 TPOX VWA 1,10E+01 2,49E+00 1,80E+00 3,23E+00 Penta_E TH01 TPOX VWA 1,10E+01 2,49E+00 1,80E+00 3,23E+00 Penta_E TH01 TPOX VWA 1,10E+01 2,49E+00 1,80E+00 3,23E+00 Las diferencias están en D3S1358 y en D21S11 TOTAL 2,57E+07 TOTAL 2,73E+06 TOTAL 7,70E+07

118 Módulo de Parentesco Nivel Avanzado Desafío Teórico Contestan 45 laboratorios Se obtiene un resultado consensuado en todos los sistemas, excepto en D3 y en el TOTAL Tienen discrepancias con el consenso 21 laboratorios (47%) Se detectan 183 discrepancias (27,6%) 10 Laboratorios emiten resultados discordantes para el total.

119 Módulo Forense Nivel Avanzado Desafío Teórico Forense/Forensic Paper Challenge 1.Planteamiento Una madre denuncia la desaparición de su hijo (Individuo A). Para una posible identificación en el futuro decide donar una muestra indubitada de sí misma y además aporta un objeto personal del hijo desaparecido). Analizaría ambas muestras? En caso de que su respuesta sea NO indique qué muestra analizaría: Muestra 1: Muestra indubitada de la madre del desaparecido Muestra 2: Objeto personal del desaparecido Muestra 3. Al cabo de 2 meses se encuentra un cadáver sin identificar en Madrid, que presuntamente pudiera pertenecer al hijo de la mujer que realizó la denuncia y al cual se le toma una muestra biológica

120 Módulo Forense Nivel Avanzado Desafío Teórico Forense/Forensic Paper Challenge STRs AUTOSÓMICOS Muestra D8S1179 D21S11 D7S820 CSF1PO D3S1358 TH01 D13S317 D16S539 Penta Muestra indubitada de la madre (Muestra 1) 1 8/10 29/30 8/ / /12 11/12 7/13 Objeto personal del desaparecido (Muestra 2) 2 10/12 28/30 SR SR 16/18 6/9.3 11/12 SR SR Muestra del cadáver sin identificar (Muestra 3) 3 10/12 28/ /12 16/18 6/9.3 11/12 11/12 13 SR = Sin resultados STRs AUTOSÓMICOS Muestra D2S1338 D19S433 VWA TPOX D18S51 Amel D5S818 FGA Penta Muestra indubitada de la madre (Muestra 1) 1 17/24 14/16 16/17 8/11 15/17 X 11/13 20/23 12/13 Objeto personal del desaparecido (Muestra 2) 2 SR 15/16 16/17 8/11 SR XY 11/12 SR SR Muestra del cadáver sin identificar (Muestra 3) /16 16/17 8/11 12/15 XY 11/12 23/25 12 SR = Sin resultados ADN MITOCONDRIAL Muestra Edición Haplotipos Muestra indubitada de la madre (Muestra 1) C 16294T 16304C 16519C 73G 152Y 263G 315.1C Objeto personal del desaparecido (Muestra 2) C 16294T 16304C 16519C 73G 263G 315.1C Muestra del EIADN cadáver 20(2012) sin identificar (Muestra 3) C 16294T 16304C 16519C 73G 263G 315.1C

121 Módulo Forense Nivel Avanzado Desafío Teórico Forense/ Forensic Paper Challenge Contestan 43 laboratorios Analizaría ambas muestras? Sí 86% No 14% 5 analizarían la muestra 1 indubitada (madre) 2 analizarían la muestra 3 (objeto personal del desaparecido)

122 Mi agradecimiento a: Al equipo que me ha ayudado durante todo el año Pepa Farfan Julia García Hischfeld Eva Cubillo A los que han colaborado en el diseño y evaluación de resultados Antonio Amorím Carlos Vullo Cinthia Alves Juán Antonio Luque Javier Capilla Leonor Gusmao Lourdes Prieto Manolo Lopez Manuel Crespillo Ulises Toscanini A los que han colaborado en la distribución de los envíos por valija diplomática A mis compañeras del Servicio de Garantía de Calidad

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124 Muchas Gracias Muito obrigada