Problema 1: Southern Blot. Problema 2: Paternidad.
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- Purificación Soto Quintana
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1 Problema 1: Southern Blot. En el análisis de DNA Fingerprint mediante la técnica de "Southern" Blot: A- El RNA celular es separado electroforéticamente y transferido a una membrana. Luego la membrana se hibridiza con una sonda radiactiva específica de RNA o DNA. B- Fragmentos de DNA radiactivos obtenidos mediante el uso de enzimas de restricción son separados electroforéticamentey tranferidos a una membrana. La membrana se hibridiza con una sonda específica de RNA o DNA. C- El RNA celular marcado radiactivamente es separado electroforéticamente y transferido a una membrana. Luego la membrana se hibridiza con una sonda radiactiva específica de RNA o DNA. D- El análisis se realiza al sur del Ecuador. E- Fragmentos de DNA obtenidos mediante el uso de enzimas de restricción son separados electroforéticamentey tranferidos a una membrana. La membrana se hibridiza luego con una sonda radiactiva específica de RNA o DNA. Problema 2: Paternidad. En la figura se muestra de análisis de un único locus para un hombre, una mujer y sus cuatro hijos. Cuál de los cuatro hijos tiene menos posiblilidades de ser hijo de esta pareja?
2 Problema 3: Perfil paterno. En la figura se muestra el análisis de un único locus para un hombre y sus cuatro diferentes hijos. Que calle contiene el ADN del padre? Problema 4: Caso de violación. La figura muestra la autoradiografía de un único locus analizado para varias muestras de ADN provenientes de un caso de violación. Las muestras de ADN fueron sembradas en las siguientes calles: 1.Muestra sanguínea de la víctima. 2.Muestra sanguínea del sospechoso. 3.DNA markers. 4.Isopado vaginal de la víctima (fracción femenina). 5.Isopado vaginal de la víctima (fracción masculina). Qué se puede concluir de esta autoradiografía? A.El sopechoso es culpable. B.El isopado vaginal corresponde a otra víctima. C.El sospechoso podría ser culpable, pero es necesario el análisis de otros marcadores. D.El sospechoso es excluído como fuente del ADN. C. Ninguna es correcta.
3 Problema 5: VNTR. Los VNTR son regiones hipervariables del genoma humano que se caracterizan por: A- Poseer sitios que son reconocidos por enzimas de restricción. B- Estan localización en cromosomas distintos C- Su habilidad para hibridizar con sondas específicas para un único locus. D- Poseer un número de copias de una sequencia interna repetida de ADN. E- Mutaciones puntuales. Problema 6: Probabilidades. El cálculo de probabilidades se utilizan en aplicaciones forenses para determinar si: A- El ADN proveniente de dos fuentes distintas posse alelos en común. B- ADN fue degradado antes del análisis. C- ADN proviene de un hombre o una mujer. D- Existe una coincidencia al azar entre alelos de muestras distintas. E- Alelos presentes en la muestra del sospechoso son distintos a los de la víctima. Problema 7: HLA-DQ alpha. El locus HLA-DQ alpha se utiliza en diversos casos forenses y de parternidad. Existen cuatro alelos posibles para este locus llamados: 1, 2, 3 y 4. Cuántos genotipos diferentes existen para estos alelos? A- 8 B- 10 C- 12 D- 16 E- 24 Problem 8: Fuentes de DNA. Cual de los siguientes elementos no es potencialmente utilizable en un análisis forense de DNA? A- Cabellos. B- Saliva. C- Glóbulos rojos. D- tejido muscular. E- Células epiteliales presentes es la orina. Problema 9: Violación con dos sospechosos.
4 La figura muestra la autoradiografía de un único locus analizado para varias muestras de ADN provenientes de un caso de violación. Las muestras de ADN fueron sembradas en las siguientes calles: (1) Muestra de sangre de la víctima. (2) Muestra de sangre del sospechoso A. (3) Muestra de sangre del sospechoso B (4) DNA markers. (5) Isopado vaginal de la víctima (fracción femenina). (6) Isopado vaginal de la víctima (fracción masculina). Qué se puede concluir de esta autoradiografía? A. Ambos sospechos son excluidos como fuentes de la evidencia. B. El sospechoso A es excluido, mientras que el sospechoso B no puede serlo. C. El sospechoso B es excluido, mientras que el sospechoso A no puede serlo. D. Ninguno de los sospechosos puede ser excluido como fuete de la evidencia. E. El sospechoso B no puede ser excluido como fuente de la evidencia. Los resultados del sospechoso A son inconclusos. Problema 10: Paternidad. Los siguientes resultados corresponden al análisis de único locus para una pareja y sus cuatro hijos. Puede alguno de los niños no ser el hijo bilógico del padre?
5 Problema 11: Otra violación con dos sospechosos. La figura muestra la autoradiografía de un único locus analizado para varias muestras de ADN provenientes de un caso de violación. Las muestras de ADN fueron sembradas en las siguientes calles: (1) Muestra de sangre de la víctima. (2) Muestra de sangre del sospechoso A. (3) Muestra de sangre del sospechoso B (4) DNA markers. (5) Isopado vaginal de la víctima (fracción femenina). (6) Isopado vaginal de la víctima (fracción masculina). Qué se puede concluir de esta autoradiografía? A. Ambos sospechos son excluidos como fuentes de la evidencia. B. El sospechoso A es excluido, mientras que el sospechoso B no puede serlo. C. El sospechoso B es excluido, mientras que el sospechoso A no puede serlo. D. Ninguno de los sospechosos puede ser excluido como fuete de la evidencia. E. El sospechoso B no puede ser excluido como fuente de la evidencia. Los resultados del sospechoso A son inconclusos. Problema 12: Reconstitución del perfil genético de una madre desaparecida. En ocasiones es necesario reconstituir el perfil genético de una persona desaparecida mediante el análisis del perfil genético de sus familiares. En este caso se ha extraviado la madre de cuatro niños. Todos ellos tienen el mismo padre biológico. Los resultados obtenidos para un único locus se muestran el la correspondiente autorradiografía. Determine quien es el padre y que alelos corresponden a la madre.
6 Problema 13: frecuencias 1) El 70 % de las personas pueden reconocer el sabor de la feniltiocarbamida, el 30% restante no. La capasidad de reconocimiento de esta sustancia está determinada por un alelo dominante y la incapasidad por uno resecivo. Suponiendo que la población está en euilibrio de HW. Cuáles son las frecuencias genotípicas y alélicas en esta población? 2) Consideremos las poblaciones con los genotipos que se muestran en la siguiente tabla. Población AA Aa aa ,5 0,25 0,25 5 0,25 0,25 0,5 6 0,25 0,5 0,25 7 0,33 0,33 0,33 8 0,04 0,32 0,64 9 0,64 0,32 0, , , , Cuánto valen p y q en cada población? Qué poblaciones estan en equilibrio de HW? Problema 14: Paternidad Antes que aparecieran los VNTR (micro y minisatélites), los RFLP se utilizaron, en el pasado, como marcadores genéticos para la identificación de parentesco. En ciertos casos, p.ej. verificación del vínculo abuelo-nieto en ausencia de los padres, este tipo de pruebas constituyen la única evidencia válida de que se dispone. El siguiente problema representa una simplificación de su aplicación a este tipo de cuestiones, que tomaron importancia en la restitución de hijos de personas desaparecidas por la última dictadura ( ) a sus legítimas familias. Existen seis niños de los cuales se sabe con seguridad que sólo tres pertenecen a dos familias que no guardan ninguna relación entre sí (son de distintas ciudades). De ambas familias sólo viven los abuelos probables. Utilizando una sonda para un gen con un alto polimorfismo para una enzima de restricción (existen 4 alelos en la población) se revelan los Sout hern blots de ADN genómico de los seis niños y de los posibles abuelos, que se muestran en el gráfico: a) Definir los haplotipos para cada individuo analizado. b) Cuáles niños pertenecen, con alta probabilidad, a cada familia? c) Para cuáles esta experiencia no es suficiente para decidir a qué familia pertenecen? d) Cuáles, con seguridad, no pertenecen a ninguna de las dos?
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