TEMA 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica
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- Silvia Palma Agüero
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1 TEMA 7 Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica
2 Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica 1. Seguridad biológica en los laboratorios de Microbiología Clínica 1.1. Riesgos generales 1.2. Bioseguridad 2. Clasificación de los microorganismos según el grupo de riesgo 2.1. Criterios para la clasificación 2.2. Grupos de riesgo Grupo Grupo Grupo Grupo 4 3. Medios de contención 3.1. Barreras primarias 3.2. Barreras secundarias 3.3. Normas y procedimientos estándar Limpieza de superficies Eliminación de residuos Precauciones en casos de derrames Normas para el envío de muestras biológicas
3 Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica 4. Niveles de contención 4.1. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 (microorganismos de grupo de riesgo 1) 4.2. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3) 4.3. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4) 4.4. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 4 (microorganismos de grupo de riesgo 4)
4 1. Seguridad biológica en el laboratorio de Microbiología Clínica 1.1. Riesgos generales Riesgos en el laboratorio de Microbiología Clínica Infecciones contraídas en el laboratorio Seguridad con respecto a: Compuestos químicos Isótopos radiactivos Gases comprimidos Electricidad Incendios
5 1.2. Bioseguridad Responsable de bioseguridad Manual de bioseguridad Capacitación de los transeúntes Capacitación del personal Precauciones estándar Logotipo de riesgo biológico Sitio donde debe colocarse
6 2. Clasificación de los microorganismos según el grupo de riesgo 2.1. Criterios para la clasificación Contagiosidad Patogenicidad y virulencia Dosis infectiva y dosis letal Existencia de tratamiento o profilaxis Vías de transmisión Capacidad de extenderse entre la población Capacidad de supervivencia en el ambiente
7 2.2. Grupos de riesgo Grupo 1 Microorganismos con improbabilidad de causar enfermedad en personas sanas. Ejemplos: Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus lactis, Sacharomyces cerevisiae, Penicillium roqueforti Grupo 2 Microorganismos que causan enfermedad de buen pronóstico, frente a los que existe tratamiento y que en general no se transmiten por vía aérea y no es fácil su difusión en la comunidad. Ejemplos de bacterias: Bordetella pertussis, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus, Micobacterias oportunistas, Haemophilus influenzae, Yersinia enterocolitica, Salmonelas gastroenteríticas, Shigella, Legionella, Borrelia, Neiserias patógenas, Vibrio, Treponema pallidum.
8 Ejemplos de hongos: Aspergillus spp, Candida spp, Cryptococcus neoformans, Dermatofitos, Pneumocystis jiroveci, Sporothrix schenckii. Ejemplos de virus: Adenovirus, Parvovirus B19, Rotavirus, Virus de la hepatitis A, Virus de la gripe, Virus del sarampión, Virus de las paperas, Virus de la rubéola. Ejemplos de parásitos: Ascaris lumbricoides, Criptosporidium spp, Entamoeba histolytica, Giardia intestinalis, Schistosoma, Toxoplasma gondii, Trichinella Grupo 3 Microorganismos que causan infecciones graves, algunas de transmisión aérea, con riesgo variable de transmitirse a la comunidad. Existe tratamiento aunque de eficacia variable.
9 Ejemplos de bacterias: Bacillus anthracis, Brucella, Escherichia coli (verotoxigénica), Francisella tularensis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Rickettsias, Salmonella ser. Typhi, Shigella dysenteriae ser. 1, Yersinia pestis. Ejemplos de hongos: Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis. Ejemplos de virus: Virus de la encefalitis de California, Virus de la encefalitis equina americana, Virus de la estomatitis vesicular, Virus de la hepatitis B, Virus de la hepatitis C, Virus de la hepatitis D, Virus de la fiebre amarilla, VIH. Ejemplos de parásitos: Echinococcus, Leishmania brasiliensis, Leishmania donovani, Plasmodium falciparum, Taenia solium, Trypanosoma cruzi.
10 Grupo 4 Microorganismos que causan infecciones graves o muy graves, muchas de transmisión aérea, que pueden pasar a la comunidad y frente a las que no hay tratamiento eficaz. Ejemplos: Virus de la viruela, Virus de la fiebre hemorrágica de Crimea (Congo), Virus de Marburg, Virus Ébola.
11 3. Medios de contención El término contención se utiliza para describir los métodos que hacen segura la manipulación de los productos en el laboratorio. Su objetivo es reducir al mínimo la exposición del personal y del entorno a agentes potencialmente patógenos. Para la seguridad biológica de los laboratorios de microbiología son importantes tres elementos: Barreras de contención primarias (equipos de protección: bata, guantes, gafas, gorro, mascarillas, CSB, etc.). Barreras de contención secundarias (instalaciones: diseño de ingeniería del laboratorio de microbiología clínica). Normas y procedimientos estándar (técnica del personal: aptitud y actitud del personal para minimizar los riesgos y la exposición a agentes patógenos).
12 3. Medios de contención 3.1. Barreras primarias Vestimenta protectora Bata Guantes Mascarilla Gafas
13 Cabinas de seguridad biológica Cabinas de clase I Cabinas de clase II Cabinas de clase III Clase I
14 Clase II
15 Microorganismos anaerobios Clase III Entrada y salida de aire (filtros hepa, espacio cerrado, trabajo con guantes adaptados)
16 3.2. Barreras secundarias Diseño de ingeniería del laboratorio de microbiología clínica El ambiente de laboratorio Paredes Ventanas Superficies de trabajo Circulación de aire Filtros HEPA Logotipo de riesgo biológico
17 3.3. Normas y procedimientos estándar Prohibido comer, beber, fumar, almacenar alimentos No pipetear con la boca Barreras de protección (vestimenta protectora, CSB) No salir del laboratorio con bata, guantes, etc. Evitar formación aerosoles (utilizar mecheros eléctricos, usar asas desechables, centrífugas de tapa hermética, centrifugaciones en CSB) Trasvase de líquidos Eliminación adecuada de residuos Al final, limpieza de mesa Lavado de manos Comunicar cualquier accidente Técnica del personal (concentración en el trabajo para evitar pinchazos, accidentes, aerosoles, etc.)
18 Limpieza de superficies Limpieza de mesas de trabajo y superficie de las CSB Para trabajo con virus usar lejía 1/10 Para trabajo con bacterias Alcohol etílico o isopropílico al 70% Fenol 1% Glutaraldehído 1-2 % Para trabajo con bacterias esporuladas utilizar Alcide (producto patentado) Para trabajo con priones usar NaOH 1 N
19 Eliminación de residuos Residuos biológicos: Restos de muestras Hisopos, frascos, etc. Medios sembrados Bolsas de autoclave Utilizar doble bolsa Material punzo-cortante: agujas, escalpelos, cabezas de bisturí, etc. Cajas de plástico rígido Líquidos
20 Precauciones en casos de derrames Vestimenta protectora Toallas de papel Colocar las toallas de papel en bolsa de autoclave Desinfectar la zona Lavado de manos (antiséptico, con clorhexidina o povidona yodada) Autoclavar bata Comunicar el accidente
21 Normas para el envío de muestras biológicas Envío de muestras por correo Empaquetamiento Etiquetado como material de riesgo biológico Envases autorizados Empresas autorizadas
22 4. Niveles de contención Existen 4 niveles de contención o niveles de seguridad biológica (BSL, biosafety levels) de complejidad creciente relacionada con el grado de peligrosidad de los microorganismos que se han de manipular Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 (microorganismos de grupo de riesgo 1) Una buena técnica de laboratorio Respetar las precauciones estándar No es necesario trabajar en CSB No es necesario que el aire salga por filtro HEPA
23 4.2. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3) Respetar las precauciones estándar (usar bata, guantes, mascarillas para métodos que formen aerosoles, no comer, beber, etc., lavarse las manos al finalizar el trabajo). Acceso limitado (prohibido a niños, embarazadas, inmunodeprimidos). Logotipo de riesgo biológico en los aparatos. Superficies impermeables y limpieza adecuada. Se puede trabajar con microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3 (dentro de CSB). Trabajar con métodos que minimicen aerosoles (asas desechables) o realizar estas técnicas en CSB. Trabajar en CSB de tipo 2. Presión negativa en la zona de trabajo. No es necesario que el aire del laboratorio salga por filtro HEPA. Eliminación correcta de residuos (restos de muestras, objetos punzantes-cortantes, etc.). Técnica del personal.
24 4.3. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4) Respetar precauciones estándar (no comer, beber, fumar, llevarse nada a la boca, frotarse los ojos, etc., lavarse las manos aunque se utilicen guantes). Barreras de seguridad primarias (bata de microbiología, guantes, mascarillas para formación de aerosoles, gafas). Acceso restringido (sólo personal del laboratorio). Diseño de ingeniería del laboratorio (presión negativa, habitaciones separadas, salida del aire por filtros HEPA). Logotipo de riesgo biológico en las puertas y en los aparatos. Se puede trabajar con microorganismos de nivel de bioseguridad 3 y 4. Trabajar en CSB2 o CSB3. Vacuna hepatitis/prueba tuberculosis para los trabajadores del laboratorio. Se guarda muestra inicial de suero de los trabajadores durante 10 años. Eliminación correcta de residuos. Almacén de seguridad para agentes etiológicos. Técnica del personal: personal entrenado específicamente.
25 4.4. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad 4 (microorganismos de grupo de riesgo 4) Laboratorios de estados Especialistas en casos de bioterrorismo
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