SERVICIO DE LABORATORIO

Transcripción

1 SERVICIO DE LABORATORIO Dra. Emilia H. Scandizzo

2 CITOGENÉTICA CLÍNICA Es la rama de la genética médica que tiene por objeto el estudio de la estructura y el comportamiento cromosómico y su relación con la patología genética Dra. Verónica Cazayous Bioquímica a cargo del Área de Citogenética del Laboratorio HEC Bioquímica del Centro Nacional de Genética Médica. C.A.B.A

3 ESTUDIO CITOGENÉTICO INDICACIONES: 1. PERÍODO PRENATAL: - Edad mayor de 35 años - Triple screening alterado - Retraso de crecimiento intrauterino (CIR) -Anomalía ecográfica - Antecedentes de cromosomopatía balanceada en un progenitor 2. PERÍODO NEONATAL: - Malformaciones/ Defectos congénitos - Rasgos dismórficos - Genitales ambiguos - Muerte neonatal de causa inexplicada 5. PERÍODO DE ADOLESCENCIA: -Ginecomastia - Falta de desarrollo puberal - Amenorrea primaria o secundaria 6. PERÍODO DEL ADULTO: - Padres de niños con anomalías cromosómicas estructurales - Abortos de repetición - Infertilidad inexplicable 3. PERÍODO LACTANCIA/ESCOLAR: - Dificultades para el aprendizaje - Rasgos dismórficos - Retraso psicomotor 7. EN TODAS LAS EDADES: - Procesos malignos (cariotipo constitucional y tumoral) - Control de trasplantes de medula ósea

4 ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS Estructurales Inversiones Inserciones Duplicaciones Deleciones Cromosomas marcadores Anillos Isocromosomas Translocaciones

5 ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS Numéricas Aneuploidías Poliploidías

6 Se encuentran anomalías cromosómicas en aproximadamente 30 de nacimientos, mientras que los desórdenes del sistema nervioso (como defectos del tubo neural) se expresan en 20 de nacimientos Incidencia de desórdenes cromosómicos Sindrome de Down Sindrome de Klinefelter Monosomía y deleción Sindrome de Patau Sindrome de Turner Otras trisomías Sindrome de Edward

7 ESTUDIO CITOGENÉTICO CARIOTIPO IDENTIFICACION Y ORDENAMIENTO SISTEMÁTICO DE LOS CROMOSOMAS DE UNA CÉLULA DE ACUERDO A CONVENCIONES INTERNACIONALES

8 CARIOTIPO MASCULINO 46,XY

9 CARIOTIPO FEMENINO 46,XX

10 Principio DIAGNÓSTICO PRENATAL CITOGENÉTICO El cariotipo constitucional de un individuo es determinado en la concepción. Las mitosis sucesivas darán lugar a copias del complemento cromosómico en todas las células que posteriormente originarán los distintos tejidos derivados. Se incluye tanto al tejido fetal propiamente dicho como a los tejidos extraembrionarios (córion, amnios, saco vitelino, etc.) Biopsia de Vellosidades Coriales

11 CULTIVO DE LINFOCITOS 1. Toma de muestra 2. Cultivo: medio de cultivo+sfb+pha hs. 37ºC 2. Colchicina Centrifugación 1. Shock hipotónico Centrifugación 1. Fijación: AcH:MeOH 3:1 2. Preparación de extendidos 3. Coloración 4. Técnicas de bandeo 5. Análisis al microscopio óptico

12 TOMA DE MUESTRA DE SANGRE PERIFERICA PARA ESTUDIO CITOGENETICO 1) Datos del paciente Nombre y Apellido Sexo Fecha de Nacimiento Domicilio Teléfono Médico solicitante 2) Motivo del Estudio Observaciones. Transfusiones : hay que esperar al menos treinta días luego de una transfusión para realizar el estudio Medicamentos : (Preferentemente si están tomado antibióticos no realizar el estudio, hay más posibilidades que el cultivo no tenga éxito). Si el medicamento no se puede suspender igual se realizar el estudio. Es fundamental mantener las condiciones de estricta esterilidad de la muestra como también la viabilidad celular. Las condiciones en que llegue la muestra es importantísima para la obtención de buenas preparaciones cromosómicas.

13 3) Extracción : Limpiar bien la mesada de extracción con alcohol 70 (antes de apoyar agujas jeringas) Humedecer el interior de una jeringa de 5ml. ( BD o Terumo ) con heparina sódica ESTÉRIL, dejando unos 0,05 ml dentro de la jeringa ( hasta el émbolo ). Mantener en estricta esterilidad. Extraer entre 2 y 5 ml venosa o estéril, previa desinfección con alcohol el brazo. La mínima cantidad de sangre para un cultivo exitoso es de 0,5 ml. Siempre que se pueda, debe evitarse maniobras que impidan la conservación de la muestra en condiciones de esterilidad. Tapar la jeringa con el capuchón de la aguja, impidiendo el contacto de la muestra con el aire. NO DOBLAR LA AGUJA NI TAPARLA CON OTROS ELEMENTOS (tapones de goma,gasas, algodón) Rotular la jeringa con el nombre del paciente y fecha de extracción.

14 4) Conservación La muestra se conserva en la jeringa ( sin trasvasar) y a temperatura ambiente hasta el momento del cultivo. Si por algún motivo el cultivo se demora mas de 24 horas, la muestra puede conservarse en heladera a 4º C SIN CONGELAR. 5) Envío Debe elegirse una vía que permita la llegada de la muestra en el día. De no ser posible recuerde que la misma debe llegar antes de las 48 horas. La muestra debe enviarse en la misma jeringa en la que se hizo la extracción, sin transvasar y a temperatura ambiente en condiciones de bioseguridad.

15 ESTUDIO CITOGENETICO PRENATAL Datos de la paciente : Nombre y Apellido Dirección Teléfono Edad Cantidad de Hijos Fecha de última menstruación Edad gestacional Antecedentes familiares :(Abortos espontáneos AE- hijos sanos- hijos con malformaciones- AE en familiares familiar con anomalía cromosómica (AC)- anomalías ecográficas- Todos los datos que el médico crea relevante para el estudio citogenético) Médico que deriva (Teléfono-mail de contacto) Hospital

16 Toma de Muestra Muestra : Vellosidades Coriales Se realiza en condiciones de esterilidad bajo seguimiento ecográfico por un profesional médico. Se prepara una jeringa TERUMO de 20 ml ; con 5 ml de medio de transporte ( material provisto por el Laboratorio del Hospital El cruce). Este medio de transporte se prepara con cualquier medio de cultivo ( RPMI- F10) de esterilidad probada y heparina estéril (100 ml medio y 2 ml heparina). La muestra recién tomada se envía inmediatamente al laboratorio a temperatura ambiente en condiciones de bioseguridad.

17 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN