ENSAYO DE APTITUD ANÁLISIS DE MIEL PRA-02/2013 INFORME FINAL VERSION WEB

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1 ENSAYO DE APTITUD ANÁLISIS DE MIEL PRA-02/2013 INFORME FINAL VERSION WEB Fecha de emisión: 28 de Abril de 2014 El presente informe es una modificación del informe final para ser publicado en la página web, para esto se quito la lista de participantes y la tabla de resultados enviada por los mismos. No obstante se decidió no omitir los comentarios de los datos que se presentan tanto en el punto 7 (tratamiento estadístico), en el 8 (Evaluación del desempeño de los laboratorios), como en el punto 9(comentarios). Instituto Nacional de Tecnología Industrial :: Parque Tecnológico Miguelete Avenida Gral. Paz 5445 :: Casilla de Correo 157 :: B1650WAB San Martín, Buenos Aires Teléfono (54.11) / 300 / 400 :: interno: 6323 :: :: interlab@inti.gob.ar

2 VERSION WEB ÍNDICE 1. OBJETIVO 3 2. ALCANCE 3 3. DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD 4 4. REFERENCIAS 4 5. RESPONSABILIDADES 4 6. MUESTRAS ENVIADAS Preparación de las muestras Homogeneidad y estabilidad 5 7. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS 5 8. EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO DE LOS LABORATORIOS 8 9. COMENTARIOS 8 ANEXO 1 - Tablas 14 ANEXO 2 - Gráficos 20 Página 2 de 26

3 VERSION WEB 1. OBJETIVO Los ensayos de aptitud son una herramienta útil para identificar problemas que pudieran estar relacionados con el uso de procedimientos inadecuados, la eficacia de la formación o supervisión del personal, las calibraciones o verificaciones de los equipos e instrumentos y la validación de técnicas. Los ensayos de aptitud brindan al laboratorio la posibilidad de iniciar acciones de mejora y fomentar la eficacia de sus procesos. El objetivo de este ensayo de aptitud es mostrar el desempeño individual de los participantes en el análisis de parámetros de calidad de miel. El presente informe detalla el desarrollo del proceso de organización, aplicación de metodologías estadísticas, evaluación de los datos y conclusiones obtenidas. 2. ALCANCE El alcance del presente ensayo de aptitud es la determinación de los siguientes parámetros de calidad de miel: Acidez libre (meq/kg) Azúcares reductores (g/100g) Cenizas (g/100g) Cenizas conductimétricas (ms/cm) Color Pfund (mm Pfund) Fructosa por HPLC (g/100g) Glucosa por HPLC (g/100g) Hidroximetilfurfural (HMF, mg/kg) Humedad Refractométrica (g/100g) Índice de diastasa ph Sacarosa aparente (g/100g) Sólidos insolubles (g/100g) Página 3 de 26

4 VERSION WEB 3. DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD El INTI preserva la confidencialidad de los participantes mediante la asignación de un código único elegido en forma aleatoria, el cual es sólo conocido por el propio participante. El tratamiento de los resultados y el informe de los mismos se realizan utilizando ese mismo número. Se informa a cada participante el número que le fue asignado para el presente ensayo de aptitud. El personal de INTI firma un compromiso de confidencialidad. 4. REFERENCIAS ISO 13528:2005, Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons The international harmonized protocol for the proficiency testing of analytical chemistry laboratories. Pure & Appl. Chem, Vol. 78, 1, (2006) Norma IRAM Miel - Determinación del contenido de hidroximetilfurfural Parte 2 - Método de White (correspondiente a la DIN 10751) Norma DIN Bestimmung des Wassergehalts in Honig (1992) ISO 5725:1994, Parts 1-6. Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results Instructivo Evaluación de la Homogeneidad y Estabilidad IT PS INTI SAI 5. RESPONSABILIDADES El grupo técnico está integrado de la siguiente manera: Coordinadoras: Experta técnica: Expertos estadísticos: Lic. Jennifer Kawior, Bioq. Gladys Mastromónaco (INTI SAI) Lic. Alicia Gutiérrez (INTI - Agroalimentos) Prof. Silvina Forastieri, Prof. Ángel Castro (INTI SAI) Página 4 de 26

5 VERSION WEB 6. MUESTRAS ENVIADAS 6.1 Preparación de las muestras La miel homogeneizada y decantada se fraccionó en frascos de vidrio de aproximadamente 250 g en la planta fraccionadora de miel de V. M. Tittarelli S.A. (ubicada en Luján de Cuyo, Mendoza), con personal de la planta y con la supervisión de personal de INTI de acuerdo a los procedimientos habituales de operación de la misma. Para la operación se utilizó una envasadora neumática y semiautomática Marca Farli. Se envasaron con miel 60 frascos, conformando un lote de sesenta muestras de miel envasada que se identificaron con una numeración correlativa de acuerdo a la salida por la cinta transportadora. Para garantizar la inviolabilidad de las muestras, los frascos fueron precintados en su cuello y tapa con cinta termocontraíble como sistema de evidencia de apertura. La planta de fraccionamiento de miel, está habilitada por SENASA Nº MMI-059-PFD, Nº de Registro Nacional de Establecimiento y Nº de Registro Nacional de Producto Alimenticio Homogeneidad y estabilidad Se evaluaron la homogeneidad y la estabilidad de las muestras en los parámetros humedad refractométrica, cenizas conductimétricas y actividad de invertasa, según la Instrucción Evaluación de la homogeneidad y estabilidad de las muestras - IT PS Se concluyó que las muestras son suficientemente homogéneas y estables en relación a los criterios de los puntos 6.3 y 6.4 de dicha Instrucción. 7. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS Como valor asignado a las muestras se utilizó un valor de consenso, calculado como el promedio robusto de los resultados informados por los participantes del ensayo, utilizando el Algoritmo A que se describe en la norma ISO 5725:1994 Parte 5 (ref. 4.5). La incertidumbre del valor asignado es: Página 5 de 26

6 VERSION WEB s L : desviación estándar interlaboratorio robusta (estimada a partir del Algoritmo A descripto en la mencionada norma) p: número de participantes. Página 6 de 26

7 VERSION WEB Los resultados del análisis estadístico pueden observarse en la siguiente tabla: Parámetro Humedad Refractométrica (g/100g) Cenizas (g/100g) Cenizas conductimétricas (ms/cm) Azúcares reductores (g/100g) Fructosa por HPLC (g/100g) Glucosa por HPLC (g/100g) Acidez libre (meq/kg) Valor medio interlab. Desviación estándar interlab. (s L ) Desviación estándar interlab. relativa porcentual (s L relativa %) CV Incertidumbre del valor medio interlab. 17,03 0,30 1,8% 0,10 0,16 0,03 17,9% 0,01 0,461 0,02 4,5% 0,01 75,7 3,0 4,0% 1,7 38,1 1,59 4,2% 0,89 32,4 0,85 2,6% 0,47 23,9 3,2 13,3% 1,1 Índice de diastasa 16,9 1,79 10,6% 0,79 Hidroximetilfurfural HMF (mg/kg) Color Pfund (mm Pfund) 30,7 4,84 15,8% 1,68 66,0 5,5 8,4% 1,78 ph 4,11 0,14 3,3% 0,06 Sacarosa aparente (g/100g) Sólidos insolubles (g/100g) 2,9 1,55 54,0% 0,87 0,02 0,01 89,3% 0,01 Página 7 de 26

8 VERSION WEB En las Tablas 3A a 3D del ANEXO 1 se resumen los valores numéricos correspondientes a los desvíos de los resultados enviados por cada uno de los participantes con respecto al valor medio interlaboratorio. 8. EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO DE LOS LABORATORIOS Para evaluar el desempeño de cada laboratorio participante se utilizó el parámetro z, definido de la siguiente manera: Donde: x : promedio de los resultados del laboratorio, x as : valor de consenso asignado al parámetro, según el procedimiento descripto en el ítem 8. Los valores del parámetro z así obtenidos pueden verse en los Gráficos 12 al 22 del ANEXO 2 y en la Tabla 4 del ANEXO 1. Es posible clasificar el resultado obtenido por cada laboratorio de la siguiente forma: z 2 satisfactorio, 2 < z < 3 cuestionable, z 3 no satisfactorio 9. COMENTARIOS Para los parámetros sacarosa aparente, sólidos insolubles, L(-)Prolina y sacarosa por HPLC no pudo realizarse el análisis estadístico de los resultados. Esto se debió a que muy pocos participantes realizaron estas determinaciones. En el caso de sacarosa aparente, además de contar con pocos datos, la dispersión encontrada fue elevada. En la tabla siguiente se resume el número de determinaciones satisfactorias, cuestionables y no satisfactorias, evaluadas mediante el parámetro z. Página 8 de 26

9 VERSION WEB Parámetro (unidad) q z 2 2 < z < 3 z 3 Humedad Refractométrica (g/100g) Cenizas (g/100g) Cenizas conductimétricas (ms/cm) Azúcares reductores (g/100g) Fructosa por HPLC (g/100g) Glucosa por HPLC (g/100g) Acidez libre (meq/kg) Índice de diastasa Hidroximetilfurfural HMF (mg/kg) Color Pfund (mm Pfund) ph Sacarosa aparente (g/100g) Sólidos insolubles (g/100g) ,6% de mediciones satisfactorias Donde q es la cantidad de participantes para cada parámetro. Aquellos participantes que hayan obtenido valores de z mayores que 2 deberían revisar la metodología empleada. En el siguiente gráfico, a modo comparativo, se muestran el número total de participantes, el número total de determinaciones realizadas y el número total de determinaciones satisfactorias en los distintos ensayos interlaboratorio realizados hasta la fecha: Página 9 de 26

10 VERSION WEB 250 N participantes N total de determinaciones N de determinaciones satisfactorias Año A continuación se presenta un análisis individual para cada parámetro analizado. Humedad refractométrica Este parámetro tiene importancia comercial porque contribuye a fijar el precio comercial de la miel. Para el nivel de concentración de la muestra enviada, aplicando los criterios de la norma DIN (ref. 4.4), dos valores de humedad refractométrica en condiciones de repetibilidad no pueden diferir entre sí en más de 0,2 g/100g. Dado el requerimiento de la Norma, no se considerarán aceptables los replicados enviados por un mismo participante si no cumplen con este requerimiento de repetibilidad. Todos los participantes han cumplido con dicho criterio de aceptabilidad. Por otro lado, sólo el participante N 11 obtuvo z entre 2 y 3. Dicho participante debería revisar la metodología empleada. Cenizas La dispersión entre los resultados de este parámetro es significativamente mayor que el de cenizas conductimétricas. Esto se debe a las características propias del ensayo, en particular al hecho de que la porción de material utilizada es menor, y a que durante la calcinación se forman burbujas que generan posibles pérdidas de material. Además Página 10 de 26

11 VERSION WEB contribuye a la dispersión la baja relación entre la masa de cenizas pesadas frente a la masa inicial de miel y a la masa de la cápsula donde se calcina la muestra. Cenizas conductimétricas Los participantes N 1 y 2 informan el parámetro en µs/cm; los valores fueron convertidos a ms/cm para su integración al cálculo. El participante N 13 informó valores de conductividad (en µs), en lugar de cenizas conductimétricas. En consecuencia, debería atenerse a los requisitos establecidos en el protocolo de medición. Los resultados obtenidos para el resto de los participantes son aceptables. Azúcares reductores Los resultados obtenidos son aceptables. Sacarosa aparente Para este parámetro no han podido realizarse análisis estadísticos debido a la poca cantidad de resultados informados y a que éstos no son compatibles entre sí. Fructosa por HPLC Sólo participaron 5 laboratorios en la medición de este parámetro, entre los cuales uno (el N 6) obtuvo un z > 3. Dicho participante debería revisar su metodología. Glucosa por HPLC Sólo participaron 5 laboratorios en la medición de este parámetro. Los resultados obtenidos son aceptables. Acidez libre La dispersión interlaboratorio para este parámetro presentó una mejora respecto de las obtenidas en los años anteriores (ver tabla en apartado Comparación con otros ejercicios de este ítem). Las fuentes de incertidumbre que contribuyen más fuertemente en esta medición son: el uso de material volumétrico no calibrado, la valoración de las soluciones, la velocidad de titulación y la determinación del punto final. El participante N 13 informó resultados discordantes respecto del valor medio interlaboratorio, obteniendo z > 3. Dicho participante debería revisar la metodología empleada. Página 11 de 26

12 VERSION WEB Índice de diastasa El participante N 2 informó resultados discordantes respecto del valor medio interlaboratorio, obteniendo z > 3. Dicho participante debería revisar la metodología empleada. Las fuentes de incertidumbre que contribuyen más fuertemente en esta medición son: la regulación de la temperatura del baño termostático, la fuente de almidón utilizada y la calibración del espectrofotómetro, entre otras. Se observa una mejora en los valores de reproducibilidad respecto de los obtenidos en los últimos años. Hidroximetilfurfural La norma IRAM (correspondiente a la DIN 10751, ref. 4.3), establece que dos valores de hidroximetilfurfural en condiciones de repetibilidad, no deben diferir entre sí en más de 1,63 mg/kg según el nivel de concentración promedio interlaboratorio de la muestra enviada,. Por ello, se puede concluir que los resultados de los participantes N 1 y 13 son no satisfactorios, a pesar de haber obtenido z < 2. Por otro lado, los participantes N 5a y 10 obtuvieron z > 3, por lo que deberían revisar su metodología. Color Pfund No se observaron diferencias significativas entre valores obtenidos en función de las diferentes metodologías utilizadas descriptas en la Tabla 2F, por lo que, para el cálculo del valor medio y la desviación estándar interlaboratorio fueron utilizados todos los datos informados independientemente de dichas metodologías. Los resultados informados por el participante N 11 no son satisfactorios ya que obtuvo un z > 3, por lo que debería revisar su metodología de medición. Comparación con otros ejercicios En la siguiente tabla pueden compararse la desviación estándar interlaboratorio relativa porcentual de los resultados obtenidos en las rondas interlaboratorios hasta el momento. Página 12 de 26

13 VERSION WEB Ejercicio interlaboratorio Análisis de miel PARÁMETRO Desviación estándar relativa porcentual (%) Acidez libre 17,10 13,60 16,30 22,10 19,30 19,80 23,00 15,60 13,33 Azucares reductores 4,00 4,60 2,80 5,70 5,00 4,40 4,20 4,10 4,00 Cenizas 22,60 20,50 19,10 24,00 14,10 10,80 20,20 21,30 17,87 Cenizas conductimétricas ,00 9,60 7,50 8,50 13,70 7,40 10,10 4,50 Color Pfund ,10 9,30 6,00 15,70 14,20 27,00 13,90 8,37 Fructosa por HPLC ,00 5,70 2,70 4,50 1,60 4,17 Glucosa por HPLC ,80 5,70 9,40 3, ,61 Hidroximetilfurfural 18,30 19,30 20,90 20,20 23,20 24,50 12,70 14,20 15,76 Humedad refractométrica 1,70 2,10 3,70 2,20 3,30 3,00 1,60 2,40 1,76 Índice de Diastasa 9,00 13,10 10,10 15,00 24,40 28,40 28,50 33,40 10,55 ph ,10 3,33 Se observa una mejora a lo largo del tiempo en las desviaciones estándar relativas porcentuales para la mayoría de los parámetros, lo cual indicaría que los laboratorios están aplicando los métodos de medición de manera más homogénea. Página 13 de 26

14 VERSION WEB ANEXO 1 - Tablas Página 14 de 26

15 Tabla 3 A Desvíos respecto del valor medio interlaboratorio (VMIL) Humedad Refractométrica (g/100 g) Cenizas (g/100 g) Cenizas conductimétricas (ms/cm) Azúcares reductores (g/100 g) VMIL 17,03 0,16 0,461 75,7 Part. N V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL 1 16,97-0,3 0,126-23,5 0,449-2, ,44 2,4 0,19 15,3 0,472 2, ,3 1, ,443-3, ,1 0,4 0,13-21, ,2-0,7 5a 17,3 1,6 0,199 20,7 0,45-2,4 75,68-0,1 5b ,2 1,0 0,17 3, ,2 1,0 0,177 7,4 0,492 6,7 71,65-5,4 9 16,8-1, ,46-0,2 78,7 3, ,06 0,2 0,16-2, ,3-4,3 0,1665 1, ,42 2, , ,7-1, ,73-1, Página 15 de 26

16 Tabla 3 B Desvíos respecto del valor medio interlaboratorio (VMIL) Fructosa por HPLC (g/100g) Glucosa por HPLC (g/100g) Acidez libre (meq/kg) VMIL 38,13 32,36 23,88 Part. N V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL ,5 2, ,88 16,8 3 39,2 2,8 32,5 0,4 22,7-4,9 4 38,2 0,2 32,3-0,2 24,6 3,0 5a 39,12 2,6 31,48-2,7 21,75-8,9 5b ,9-13,7 32-1,1 21,9-8, ,4 0,7 33,5 3,5 22,77-4, ,7 11, ,66-9, ,24 22, ,3 1, ,28-48, Página 16 de 26

17 Tabla 3 C Desvíos respecto del valor medio interlaboratorio (VMIL) Índice de diastasa HMF (mg/kg) ph VMIL 16,94 30,71 4,11 Part. N V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL V. medio % desv. VMIL 1 13,8-18,5 31,4 2, ,6 39,3 31,9 3,9 4,08-0,8 3 17,7 4,5 31,3 1, ,9 5,7 27,2-11,4 4,3 4,6 5a ,3-53,5 4,15 0,9 5b 16,43-3, ,3 5,2 3,96-3, ,7-6, ,39-3,2 29,6-3,6 4,17 1,4 9 17,2 1,6 28,4-7,5 3,46-15,9 10* - - 0,27 g/kg * 779,1 4,18 1, ,5 25,7-16, ,4 8,7 4,08-0, ,9 26,5 4,18 1, * Participante 10 informa HMF en g/kg en lugar de en mg/kg Página 17 de 26

18 Tabla 3 D Desvíos respecto del valor medio interlaboratorio (VMIL) Color Pfund (mm Pfund) VMIL 65,97 Part. N V. medio % desv. VMIL ,6 2 75,72 14, ,0 4 58,7-11,0 5a - - 5b 66 0,0 5b2 69 4, , ,33 9, , ,33-1, , ,7-0,4 13a 60,3-8,6 13a2 60-9, ,7-6,5 Página 18 de 26

19 Tabla 4 - Parámetro z N Part Humedad refractométrica Cenizas Cenizas conductimé tricas Azúcares reductores Fructosa por HPLC Glucosa por HPLC Acidez libre Índice de diastasa 1** -0,20-1,32-0, ,20-1,76 0,14** - 0,19 2 1,37 0,86 0, ,26 3,73 0,25-0,23 1,76 3 0, ,87-0,67 0,17-0,37 0,43 0, ,36 4 0,24-1, ,17 0,04-0,07 0,23 0,54-0,73 1,37-1,32 5a 0,90 1,16-0,53-0,02 0,62-1,04-0, ,40 0,28-5b , ,01 5b ,55 6 0,57 0, ,29-0,42-0,62-0,33-1,11 0, , ,57 0,41 1,49-1,35 0,17 1,35-0,35-0,31-0,23 0,42 1,15 9-0, ,05 0, ,89 0,15-0,48-4,75-0, ,10-0, , ,50-0,12 10* ,45* ,44 0,06-0, ,69-0,52-1,04-3, , ,13-0,56-0,23-0,05 13** -1, ,64-1,68** 0,50-13a ,03 13a , , ,77 * Participante 10 informa HMF en g/kg en lugar de en mg/kg. ** A pesar de que el valor del parámetro z para hidroximetilfurfural es menor a 2, los resultados informados por los participantes N 1 y N 13 resultaron no satisfactorios ya que la dispersión entre resultados es mayor que la aceptada por la IRAM correspondiente a la DIN (ref 4.3). HMF ph Color Pfund Página 19 de 26

20 ANEXO 2 - Gráficos Página 20 de 26

21 3 GRÁFICO 12 Humedad refractométrica - Parámetro z 2 1 Parámetro z N participante 3 GRÁFICO 13 Cenizas - Parámetro z 2 1 Parámetro z a N participante Página 21 de 26

22 3,0 GRÁFICO 14 Cenizas conductimétricas - Parámetro z 2,0 1,0 Parámetro z 0,0-1,0-2,0-3, a 1 3 N participante 3 GRÁFICO 15 Azúcares reductores - Parámetro z 2 1 Parámetro z a 4 8 N participante Página 22 de 26

23 GRÁFICO 16 Fructosa por HPLC - Parámetro z Parámetro z a N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 6-3,29 3,0 GRÁFICO 17 Acidez libre - Parámetro z Parámetro z 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0-0,5-1,0-1,5-2,0-2,5-3, a N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 13-3,64 Página 23 de 26

24 3,0 GRÁFICO 18 Índice de diastasa - Parámetro z 2,0 1,0 Parámetro z 0,0-1,0-2,0-3, b N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 2 3,73 3,0 GRÁFICO 19 Hidroximetilfurfural (HMF) - Parámetro z 2,0 1,0 Parámetro z 0,0-1,0-2,0-3, a N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 5a -3, ,45 A pesar de que el valor del parámetro z para hidroximetilfurfural es menor a 2, los resultados informados por los participantes N 1 y N 13 resultaron no satisfactorios ya que la dispersión entre resultados es mayor que la aceptada por la IRAM correspondiente a la DIN (ref 4.3) Página 24 de 26

25 3,0 GRÁFICO 20 ph - Parámetro z 2,0 1,0 Parámetro z 0,0-1,0-2,0-3, a N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 9-4,75 GRÁFICO 21 Color Pfund - Parámetro z 3,0 2,0 1,0 Parámetro z 0,0-1,0-2,0-3, b2 1 5b a 13a2 4 N participante Dato/s que excede/n los límites del gráfico: Part. z 11 3,44 Página 25 de 26

26 3 GRÁFICO 22 Glucosa por HPLC - Parámetro z 2 1 Parámetro z a N participante Página 26 de 26