GUÍA PARA LA SOLICITUD, PREPARACIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS AL SERVICIO DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR DEL CENTRO DE QUÍMICA ORGÁNICA LORA TAMAYO

Transcripción

1 GUÍA PARA LA SOLICITUD, PREPARACIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS AL SERVICIO DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR DEL CENTRO DE QUÍMICA ORGÁNICA LORA TAMAYO Con el fin de garantizar el funcionamiento óptimo del Servicio de RMN, os pedimos que leáis atentamente las siguientes instrucciones: 1. Solicitud de ensayo Para poder realizar un ensayo se debe rellenar la Solicitud de Análisis; ésta se puede descargar de la página web del CENQUIOR, en el apartado de Servicios, Servicio de RMN, Servicios Ofertados, Solicitud de Análisis. Es obligatorio cumplimentar todos los datos del solicitante, entendiéndose por firma autorizada la firma de cualquier usuario al que le esté permitido solicitar el análisis con el conocimiento del investigador responsable. Además de indicar el tipo de experimento deseado, se recomienda rellenar todos los datos posibles sobre la muestra enviada, con el objeto de facilitar la óptima realización del análisis, siendo indispensable indicar la concentración aproximada y el disolvente utilizado. Así mismo, sería conveniente indicar la estructura del compuesto a analizar con el fin de poder optimizar las condiciones del experimento y obtener un mejor resultado; en el caso de que esto no sea posible habría que incluir la fórmula molecular del compuesto. Una vez completada, el usuario entregará la Solicitud al Servicio de RMN: Si se trata de un usuario externo, la solicitud se entregará o en mano o vía , enviándola a la dirección de correo electrónico: rmn@cenquior.csic.es Si se trata de un usuario interno (usuarios pertenecientes a los Institutos que comparten sede con el CENQUIOR), la entrega se hará según el siguiente procedimiento: El experimento a realizar es un 1H, se depositarán tanto la ficha como la muestra en los lugares habilitados para ello, excepto que el número de muestras sea superior a 5, que la muestra no sea estable (en ambos casos que consultará previamente con los técnicos del servicio) o que la muestra contenga cualquier tipo de compuestos altamente peligrosos, tóxicos, explosivos, etc (consultar el procedimiento detallado en el apartado 2, condiciones de la muestra). 1

2 Bruker-300, en la gradilla rotulada como Espectros solo de 1H situada en el laboratorio donde se encuentra dicho equipo (laboratorio 038). Bruker-400 y Varian Mercury- 400, en la gradilla que hay sobre la mesa del laboratorio del equipo Bruker-400 (laboratorio 040), al lado de la cajonera rotulada como Fichas para hacer 400. Varian System-500, en la gradilla a la entrada del laboratorio donde se encuentra dicho equipo y rotulada como Fichas y muestras para hacer 500. Los ensayos se realizarán el mismo día de su recepción (dentro de lo posible), siempre que se reciban antes de las 13:30 de lunes a jueves y de las 12:30 los viernes. Todas las muestras recibidas fuera de este horario quedarán para el día siguiente. 2

3 El experimento a realizar es cualquier otro excepto 1H, según el siguiente procedimiento: Bruker-300, se dejará tanto la ficha como la muestra en la gradilla rotulada como Espectros de 13C o Espectros bidimensionales, según corresponda, situada en el laboratorio donde se encuentra dicho equipo (laboratorio 038). Bruker-400 y Varian Mercury-400, se dejará solo la ficha totalmente cumplimentada en el módulo-cajonera rotulada como Fichas para hacer 400 que hay sobre la mesa del laboratorio del equipo Bruker-400 (laboratorio 040). Varian System-500, igual que el caso anterior se dejará solo la ficha en la bandeja situada a la entrada del laboratorio donde se encuentra dicho equipo y rotulada como Fichas y muestras para hacer 500. Los técnicos del servicio serán los encargados de solicitar las muestras a los usuarios en el momento en que se vaya a realizar el análisis. Todas las muestras deberán venir correctamente identificadas, adjuntando la Etiqueta de identificación de la muestra, que se puede descargar de la página web del CENQUIOR, en el apartado de Servicios, Servicio de RMN, Servicios Ofertados, Solicitud de Análisis. 3

4 Se comunica a los usuarios que NO SE REALIZARÁN ENSAYOS A MUESTRAS QUE NO CUMPLAN ESTRICTAMENTE ESTE PROCEDIMIENTO. Así como, que el servicio de RMN no se hace responsable de las muestras que se depositen sin haber sido solicitadas. En caso de situaciones extraordinarias se debe contactar con los técnicos del servicio. 2. Condiciones de la muestra Las disoluciones deben ser claras, sin residuos sólidos, con una concentración homogénea. Una vez disuelta la muestra en el disolvente deuterado es necesario filtrarla antes de introducirla en el tubo de RMN para eliminar cualquier partícula sólida que pudiera quedar en suspensión. La presencia de partículas sólidas en suspensión distorsiona considerablemente la homogeneidad del campo porque la susceptibilidad magnética de la partícula es diferente a la de la disolución de la muestra, por ello, su ausencia es una condición indispensable para la obtención de espectros de alta calidad. La cantidad de muestra necesaria depende del equipo requerido, del experimento a realizar y del tipo de molécula a estudiar. Otro aspecto importante es el volumen de la muestra que se introduce en el tubo. La altura ideal de muestra en el tubo es de unas tres veces el espacio activo de la bobina de radiofrecuencias de la sonda. Esto hace que el volumen ideal sea de unos ml, equivalentes a cm de altura de disolvente (para los tubos de 5 mm de diámetro externo que se emplean en nuestros equipos). No obstante se puede llegar a usar hasta un mínimo de 0.5 ml en espectros de rutina. Si se prepara una muestra muy concentrada para la obtención de un espectro de 13 C, se debe tener presente que el espectro de 1 H puede presentar señales mucho más anchas que las que se obtendrían para una muestra más diluida (aumento de la viscosidad, posibilidad de asociaciones, etc.), por lo que si se requiere una mayor resolución, deberían prepararse dos tubos diferentes. Uno, con cantidad <10mg para el 1 H y otro >30mg para los demás experimentos. SI LA MUESTRA CONTIENE MATERIALES ALTAMENTE TÓXICOS Y PELIGROSOS TALES COMO Hg, Tl, Se, As etc se debe contactar previamente con los técnicos del servicio para advertirles de dicho peligro y que puedan tomar las medidas de prevención adecuadas para manipular dichas muestras. Las muestras nunca podrán permanecer en los lugares de entrega o recogida habituales, sino que se entregarán directamente al técnico cuando éste lo solicite y se recogerán en el mismo momento que el ensayo finalice. Las muestras se transportarán en contenedores adecuados que permitan confinar el material tóxico si se rompe el tubo de RMN, en ningún caso se llevarán en la mano. No cumplir estas normas puede poner en peligro la seguridad tanto del personal de RMN como del resto de usuarios. 4

5 3. Disolvente Se debe elegir un disolvente en el que la muestra sea suficientemente soluble y que se ajuste a las condiciones de temperatura a las que se va a llevar a cabo el experimento (ver tabla). Conviene conocer las señales propias del disolvente elegido, así como las de las impurezas comunes asociadas (agua, residuos de disolvente no deuterado) y tenerlas en cuenta a la hora de posibles solapamientos con las señales del producto a estudiar. Todos los disolventes deuterados, incluido el D 2 0, deben almacenarse en un desecador ya que son muy higroscópicos. Disolventes deuterados Desplazamien Desplazamiento Desplazamiento mp bp más comunes to 1 H C H 2 O (HOD) (ºC) (ºC) Ácido Acético-d , , Acetona-d , Acetonitrilo-d , Benceno-d Cloroformo-d Dimetil Sulfóxido-d Metanol-d4 4.87, Diclorometano-d Piridina-d5 8.74, 7.58, , 135.9, Agua deuterada (D 2 O) Ácido Trifluoroacético-d , , 7.0, 137.5, 128.9, Tolueno-d8 6.98, , 125.2, Tetracloroetano-d Tubos Utilizar tubos para experimentos de alta resolución y adecuados al campo/equipo en que se va a trabajar. La longitud mínima del tubo debe ser de 14 cm (sin etiquetas ni pegatinas) Limpiar los tubos nuevos antes de usarlos por primera vez, ya que pueden tener restos de grasa o impurezas. Al limpiar los tubos hay que tener la precaución de no rayarlos y de no utilizar reactivos que puedan atacar al vidrio o que lleven impurezas paramagnéticas difíciles de eliminar (p. ej. mezcla crómica). Los tubos no se deben exponer a altas temperaturas (p. ej. durante el secado) ya que pueden perder sus propiedades de homogeneidad y/o concentricidad. Nunca secar en estufa. Utilizar tubos que estén en óptimas condiciones de uso. o Cuando el estado del tubo implique algún tipo de riesgo en su manipulación debido a la presencia de bordes cortantes, tapones que no ajustan debidamente o restos de muestra en su exterior o en la etiqueta. 5

6 o Cuando la longitud del tubo o el volumen de disolvente sean insuficientes. Serán devueltos a los usuarios para que preparen la muestra de manera más apropiada. 5. Realización de los análisis Se intentará que el tiempo transcurrido entre la recepción de las Solicitudes de Análisis y el envío de resultados sea el menor posible. Sin embargo, han de tenerse en cuenta todas las variables que influyen en la realización de los ensayos, como las necesarias operaciones de mantenimiento y puesta a punto de los equipos, o el número y tipo de muestras. Con el objetivo de asegurar el buen funcionamiento del Servicio hay que considerar que si fuera necesario poner a punto nuevas condiciones, el tiempo necesario para llevar a cabo el análisis aumentará, y que se priorizarán los ensayos de rutina establecidos en el Servicio de RMN. 6. Envío de resultados Una vez terminados los ensayos, los resultados aparecerán en el Servidor ( ) al que podéis conectaros con el usuario guest y contraseña guest si pertenecéis a ICTP o IQM y con vuestro usuario y contraseña de campus si pertenecéis al IQOG; siguiendo la ruta /Pool1/cenquior/rmn/datosrmn. Donde encontraréis las carpetas correspondientes a los equipos donde se han realizado los experimentos (Bruker-300, Bruker- 400, Varian Mercury 400 y Varian System 500) Puesto que hay dos equipos diferentes de 400Mz, debéis consultar ambas carpetas para localizar vuestro espectro. En este servidor también se almacenan (Back-ups) espectros de todos los equipos. Estando disponibles durante dos años. Una vez pasado este plazo todos los espectros quedan almacenados en el servicio de resonancia en formato DVD. También se puede acceder a los resultados en formato electrónico: dispositivos pendrive, , para aquellos usuarios que no puedan tener acceso al Servidor, por no estar en el mismo edificio. Existe la posibilidad de entregarlos en formato papel. En este último caso el tiempo empleado en el procesado e impresión de los resultados se contabilizará a la hora de la facturación. 6

7 7. Almacenamiento y eliminación de muestras Las muestras, una vez terminado su análisis, serán depositadas por los técnicos de resonancia en los siguientes lugares, en función del equipo que se haya utilizado: Bruker-300, en la gradilla rotulada como Espectros y muestras hechas Bruker, situada en el laboratorio donde se encuentra dicho equipo (laboratorio 038). Bruker-400 y Varian Mercury- 400, en las gradillas organizadas por institutos situadas en el laboratorio donde se encuentra el Varian-300 (laboratorio 041). 7

8 Varian System-500, en la gradilla situada a la entrada del laboratorio donde se encuentra dicho equipo y rotulada como Espectros y muestras hechas 500. Una vez que los resultados estén en el servidor y las muestras en sus lugares de recogida correspondientes, el servicio de RMN no se hará responsable de dichas muestras, teniendo la obligación el usuario de pasar a recogerlas en el menor tiempo posible. Una vez transcurrido un mes, las muestras que no se hayan recogido serán eliminadas En beneficio de todos y para un mejor funcionamiento del servicio se ruega a todos los usuarios el estricto cumplimiento de estas normas. GRACIAS SERVICIO DE RMN 8