Palabras clave: Cria masiva, Huanglongbing, psilido asiatica de los citricos.

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1 OVPOSCON DE Diaphorina citri KUWAYANA (HEMPTERA: PSYLLDAE) SOBRE PLANTAS DE Murraya paniculata (L.) JACK (RUTACEAE) COMO FACTOR EN LA PRODUCCON DE NNFAS Gonzalez-Cabrera. Jaime, Jorge A. Sanchez-Gonzalez y Hugo C. Arredondo-Bernal. Centro Nacional de Referenda de Control Biol6gico, CNRF-DGSV, SENASCA. Km 1.5 Carr. Tecoman-Estaci6n FFCC, Tecoman, Colima, Mexico, jgonz017@ucr.edu Palabras clave: Cria masiva, Huanglongbing, psilido asiatica de los citricos. lntroducci6n El psilido asiatico de los citricos, Diaphorina citri Kuwayama, es considerado una de las amenazas mas importantes a a citricultura nacional porque potencialmente trasmite a bacteria del floema Candidatus liberibacter spp., a cual causa a enfermedad conocida como Huanglongbing (HLB). Como una alternativa de control biol6gico en contra del psilido vector del HLB, desde finales de 2009 el Centro Nacional de Referencia de Control Biol6gico (CNRCB) cria y ibera masivamente al parasitoide Tamarixia radiata (Waterston) (Hymenoptera: Eulophidae). A nivel mundial, T. radiata esta considerada como el parasitoide con mas promesa para controlar a D. citri (Shivankar eta/., 2000). En el CNRCB T. radiata se reproduce sobre ninfas de D. citri, utilizando para a cria de a plaga plantas de Murraya panicu/ata (L.) Jack (Rutacea). La productividad de a cria de T. radiata esta determinada por el numero de ninfas que se reproducen sobre brotes tiernos de las plantas de M. panicu/ata; y a su vez a producci6n de ninfas por planta de M. panicu/ata, depende de a densidad de huevos que los adultos de D. citri depositan por planta y del porcentaje de sobrevivencia desde huevo hasta ninfa. En a cria de T. radiata se trabaja bajo a premisa de que mientras mas alto sea el numero de huevos depositados por brote tierno y por planta, mas alta sera a producci6n de ninfas. Las hembras de D. citri solo ovipositan sobre los brotes tiernos de las plantas hospederas (Chavan y Summanwar, 1993), sin embargo, si el numero de huevos depositados por brote de M. panicu/ata es muy alto habra una gran emergencia de ninfas, y estas a traves de su alimentaci6n pueden ocasionar el colapso de los brotes tiernos (Skelley y Hoy, 2004), de estructuras florales y hasta de ramas tiernas (Michaud, 2004; Shivankar eta/., 2000). Ademas, las ninfas secretan abundantes cantidades de mielecilla, a cual cae sabre las hojas inferiores de a planta ocasionando el desarrollo de fumagina sabre las hojas (Tsai y Liu, 2000). La fumagina forma una capa obscura sabre las hojas, reduciendo el area fotosintetica de a planta y por ende a calidad nutricional de a misma. Una reducci6n en el valor nutricional de a planta reduce directamente el porcentaje de sobrevivencia de los estados inmaduros y a fecundidad de los insectos adultos (Awmack y Leather, 2002). En este trabajo se estudi6 si un alto numero de huevos depositados por D. citri sabre brotes tiernos de M. paniculata hace colapsar el brote; el parametro que se midi6 fue a relaci6n entre huevos depositados y producci6n de ninfas. Asimismo se analiz6 si existe una relaci6n directa entre a intensidad de oviposici6n con el numero 'i:le adultos de D. citri obtenidos por planta de M. paniculata, para ella se utiliz6 un gradiente de dias-psilidos en oviposici6n. Un dia-psilidos significa que una pareja de D. citri estuvo ovipositando por 24 h. El objetivo de ambos estudios es mostrar 'si altos niveles de oviposici6n pueden ser contraproducentes en a producci6n de ninfas y adultos sobre M. paniculata. En subsecuentes estudios se determinara a oviposici6n que produce mas ninfas por planta de M. panicu/ata, con el prop6sito de 142

2 Puebla, Pue. 7-9 de Noviembre de\2012. optimizar el uso de estas plantas, y por ende hacer mas eficiente a cria de T. r:adiata. Materiales y metodos El posible colapso de brotes tiernos se estudi6 en 50 plantas de M. panicu/ata. Las plantas se podaron y cuando hubo abundancia de brotes tiernos, estos se clasificaron en tres tipos: 1, 2 y 3 (Fig. 1 ). En mediciones previas (trabajo no reportado), se encontr6 que a longitud de brote tipo 1, 2 y 3 fue de 0.76±0.09, 1.27±0.06 y 2.95 ±0.03 em, respectivamente (ANOVA, Tukey, F= , P= <.0001 ). De las 50 plantas se escogieron 20 brotes tiernos de cad a tipo; en algunas plantas se seleccionaron hasta dos o tres brotes, mientras que en otras s61o uno. Gada brote fue cubierto con tela de organza y se le introdujo una pareja de D. citri durante 48 h, al termino de este tiempo, se quito a cubierta de organza y los huevos fueron contados; a los 12 dias despues del conteo de huevos, se contabiliz6 el numero de ninfas del tercer al quinto instar presentes en cada brote, debido a que son los estados de desarrollo que las hembras de T. radiata prefieren para ovipositar. Para estudiar si existe una relaci6n entre huevos depositados y emergencia de adultos, se usaron 35 plantas de M. panicu/ata. Estas plantas se extrajeron del area de invernaderos y todas fueron aproximadamente del mismo tamafio (50 em) y con a misma cantidad de follaje. Gada una de las plantas fue podada, y cuando presentaron abundancia de brotes tiernos, se les cubri6 con tela de organza. Estas 35 plantas fueron distribuidas en cinco tratamientos: (a) 6 parejas en oviposici6n durante 3 dias; (b) 12 parejas en oviposici6n por 3 dias; (c) 6 parejas en oviposici6n par 7 dias; (d) 18 parejas en oviposici6n durante tres dias; y (e) 12 parejas por 7 dias, lo que da un total de 18, 36, 42, 54 y 84 dias-psilidos en oviposici6n respectivamente (Tabla 1 ). 23 dias despues de que se pusieron las parejas de psilidos en cada tratamiento, se contabilizo el numero de adultos por planta. Los psilidos usados fueron de a misma ectad y en actividad de oviposici6n. Nava et a/. (2007) encontr6 que a oviposici6n de 0. citri en plantas de M. panicu/ata no varia mucho de un dia para otro, mientras que en un lapso de 7 dias ellos encontraron una declinaci6n de 30% en los huevos depositados. Figura 1. Tipo de brotes tiernos de las plantas de Murraya paniculata: (a) tipo 1 se distingueporque las hojas tiernas aun estan enrolladas, formando una punta de anza; (b) tipo 2 las hojas tiernas estan a medio desenrollar; y (c) tipo 3 las hojas estan totalmente extendidas, perc continuan siendo hojas tiernas. Tabla 1. Gradiente de dias-psilidos en oviposici6n. Un dia-psilidos significa que una pareja de D. citri estuvo ovipositando por 24 h. Parejas Dias Dias-psflidos de psflidos ovipositando en oviposici6n Tratamiento (numero) (numero) (nomero) a b c

3 Puebla, Pue. 7-9 de Noviembre del r La relaci6n entre huevos depositados y sobrevivencia de ninfas fue sometida a pruebas de regresi6n lineal multiple. Las diferencias estadisticas entre grupos del gradiente de dia-psilidos en oviposici6n fueron analizadas con ANOVA y con ajuste a traves de Tukey. El analisis estadistico de los datos se hizo a traves del paquete estadistico SAS 9.2 y una a de Ambos estudios se llevaron a cabo en los invernaderos del CNRCB. Resultados y discusion En ninguno de los tres tipos de brotes, hay una relaci6n lineal entre numero de huevos depositados y porcentaje de sobrevivencia. El numero de huevos depositados tiene muy poco poder predictive en cuanto al porcentaje de sobrevivencia de huevo a ninfas; por tipo de brote a R 2 fue de 0.33, 0.25 y 0.04 para tipo 1, 2 y 3 (Fig. 2) (Regresi6n lineal multiple, F= 3.84, P= ). Presumiblemente hay otros factores involucrados en a sobrevivencia de las ninfas, por ejemplo, personal del CNRCB ha observado que las ninfas se distribuyen a brotes adyacentes cuando hay condiciones de hacinamiento. Dentro del rango de huevos depositados por tipo de brote, no hay un numero especifico que ocasione el colapso de un brote de M. panicu/ata. Sin embargo, cuando hay mas de 90 huevos depositados el porcentaje de sobrevivencia de huevo hasta ninfas se reduce a menos del 50%. Altas densidades de huevos depositados por brote tierno pueden reducir el porcentaje de sobrevivencia de las ninfas por dos razones: (a) el recurso brote podria ser suficiente para las ninfas recien emergidas, pero una ninfa del quinto instar es aproximadamente 32 veces mas grande que una ninfa del primer instar (Tsai y Liu, 2000); por lo que s61o en terminos de espacio, un brote tierno no puede albergar a tanta ninfas del quinto instar; y {b) las ninfas a traves de su alimentaci6n secretan abundante mielecilla, a cual forma una capa que obscurece parte de las hojas inferiores; con ella se reduce el area fotosintetica de a planta y se obstaculiza a distribuci6n de las ninfas sobre brotes adyacentes. La no distribuci6n de las ninfas ocasiona mortalidad, debido a condiciones de hacinamiento y a reducci6n en el area fotosintetica significa una menor calidad nutricional de a planta, y por lo tanto una menor sobrevivencia de insectos herbivores en sus estados inmaduros (Awmack y Leather, 2002). Se encontr6 que el nivel mas alto de oviposici6n (84 dias-psilidos) noes el tratamiento mas productive. El tratamiento que produjo mas adultos por planta fue el tratamiento 54 dias-psilidos (ANOVA, Tukey, F = 3.35, P= ) (Fig. 3). En este experimento se midi6 el numero de adultos producidos por planta y no se midi6 el numero de ninfas, pero presumiblemente las plantas mas productivas en cuanto al numero de adultos, tambien deberian ser mas productivas en cuanto al numero de ninfas. En los ultimos instares de D. citri existe una sobrevivencia mayor a 90% entre el numero de ninfas y de adultos (Liu y Tsai, 2000; Tsai y Liu, 2000). l 144

4 Puebla, Pue. 7-9 de Noviembre del2012. Figura 2. Porcentaje de sobr~vivencia de huevo a nin!as de 0: citri, en ~el~ci6n a a cantidad.de huevos depositados par res ltpos de brotes de M. pamculata; Ttpo 1 se dtslingue porque las hojas tiernas aun estan enrolladas, formando una punta de anza; tipo 2 las hojas tiernas estan a media desenrollar; y tipo 3 las hojas estan totalmente extendidas, pero continuan siendo hojas tiernas. Los analisis estadisticos se hicieron a!raves de pruebas de regresi6n lineal multiple. * UA' om~ w w1oo1m14mw om~ w w1oo1m1~1w om~ w w10012m4mw tipo 1 lipo2 tipo 3 Ntimero de huevos depositados. par brote de M. paniculata Psllidos. adultos 200 -~ ! que 100.j emerglcron j poo plonta 50 l A 0 - ~ , , r , Ofas- psflidos en ovlposlci6n por planta de M. panicufato Figura 3. Psilidos adultos de 0. citri que emergieron par planta de M. paniculata en cinco diferentes intensidades de oviposici6n: 18, 36, 42, 54 y 84 dias-psilidos en oviposici6n significa que 6, 12, 6, 18 y 12 parejas de psilidos de 0. citri estuvieron ovipositando durante 3, 3, 7, 3 y 7 dias, respectivamente. Un dia-psilidos significa que una pareja de D. citri estuvo ovipositando par 24 h. Medias y barras del error estandar seguidas par a misma letra no son estadisticamente diferentes. Pruebas de ANOVA, con una de 0.05, ajustada con Tukey. Los resultados de ambos experimentos indican que un nivel alto de oviposici6n por brote tierno y por planta es contraproducente en a producci6n de ninfas y adultos sobre plantas de M. panicu/ata. En subsecuentes experimentos se determinara a oviposici6n que produce mas ninfas por planta de M. paniculata. Las plantas de M. paniculata tienen muchas ventajas como sustrato para a cria de D. citri (Arredondo Bernal et a/., 201 0), sin embargo, a traves de estos estudios se pretende hacer mas eficiente el uso de estas plantas. Agradecimientos A personal del CNRCB y del convenio SENASCA-CESAVECOL para a generaci6n tecnol6gica y reproducci6n masiva de Tamarixia radiata, especial agradecimiento al tecnico Manuel Bravo Nunez, el cual contribuy6 en a colecta de datos. Literatura citada Arredondo-Bernal, H.C., J.A. Sanchez-Gonzalez & M.A. Mellin-Rosas Avances en el control biol6gico del psilido asiatico de los citricos en Mexico, pp V Simposio lnternacional Citricola. 1er Simposio lnternacional Sobre Mejoramiento Genetico de Citricos. Campo Experimental Tecoman-NFAP. Tecoman Colima. Awmack, C.S. & S.R. Leather Host plant quality and fecundity in herbivorous insects. Annual Review of Entomology 47:

5 XXXV Congr eso Nacional de Control Biol6gico Puebla, Pue. 7-9 de Noviembre del2012. "" ' ~ UA' Chavan, V.M. & A.S. Summanwar Population dynamics and aspects of the biology of citrus psylla, Diaphorina citri Kuw., in Maharashtra, pp En : Moreno, P. & J. V. da Grac;:a, & L. W. Timmer [eds.], Proc. 12th Conference of the nternational Organization of Citrus Virologists. University of California, Riverside. Liu, Y.H. & J.H. Tsai Effects of temperature on biology and life table parameters of the Asian citrus psyllid, Diaphorina citri Kuwayama, (Homoptera: Psyllidae). Annals of Applied Biology 137: Michaud, J. P., Natural mortality of Asian citrus psyllid (Homoptera: Psyllidae) in central Florida. Biological Control 29: Nava, D.E., M.L.G. Torres, M.D.L. Rodrigues, J.M.S. Bento & J.R. Parra Biology of Diaphorina citri (Hem., Psyllidae) on different hosts and at different temperatures. Journal of Applied Entomology 131 : Shivankar, V.J., C.N. Rao & S. Shyam Studies on citrus psylla, Diaphorina citri Kuwayama: a review. Agricultural Reviews. 21(3): Skelley, L.H. & M.A. Hoy A synchronous rearing method for the Asian citrus psyllid and its parasitoids in quarantine. Biological Control. 29: Tsai, J. H. & Y.H. Liu Biology of Diaphorina citri (Homoptera: Psyllidae) on four host plants. Journal of Economic Entomology 93: PARASTSMO DE Colpoclypeus michoacanensis Sanchez y Figueroa (HYMENOPTERA: EULOPHDAE) EN DOS LOCALDADES DEL ESTADO DE MCHOACAN., ' OrnellaBarreto-Barriga \ Samuel Pineda 1, Ana Mabel Martinez\ Jose Antonio Sanchez Garcia2, Angel Rebollar-Aiviter 3, Juan Manuel Chavarrieta, Juana Maria Coronado Blanco 4 y Jose saac Figueroa h. 1 1nstituto de nvestigaciones Agropecuarias y Forestales, Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo, Km. 9.5 carretera Morelia-Zinapecuaro, Tarimbaro, Michoacan, 58880, Mexico. *figueroaji@yahoo.com.mx. 2 CDR Oaxaca, lnstituto Politecnico Nacional, Area de Control biol6gico, Hornos #1003, Santa Cruz Xoxocotlan, Oaxaca, C.P , Mexico. 3 Universidad Aut6noma Chapingo/Centro Regional Morelia, Michoacan, 58170, Mexico. 4 U,\M Agronomia y Ciencias, Universidad Aut6noma de Tamaulipas, Cd. Victoria, Tamaulipas, Mexico. Palabras clave: Argyrotaenia, avispas, Eulophidae, biologia, control biol6gico. lntroducci6n La zarzamora es uno de los productos agricolas de alto valor nutritivo y con amplia demanda en paises desarrollados, lo que lo convierte en un producto con gran potencial de exportaci6n. En Mexico, su cultivo representa una derrama econ6mica muy importante debido a que!~enera miles de empleos directos en su producci6n Y comercializaci6n. En los ultimos 10 aiios, a producci6n de zarzamora, asi como el area dedicada a su cultivo, se ha incrementado exponencialmente. A respecto, en los aiios 2000, 2004, 2006 y 2007, a producci6n de este cultivo fue de 13534, 26696, y toneladas (ton), respectivamente, siendo los estados de Michoacan, Guanajuato, Hidalgo y Estado de Mexico los principales productores (Sanchez, 2008). Particularmente en el estado de Michoacan, en el aiio 2009 se sembraron hectareas (ha) de zarzamora, de las cuales se obtuvo una producci6nde ton y una captaci6n de divisas de $ 2, 703,420 (SlAP, 2009).Michoacan se reconoce como el primer productor y exportador de zarzamora 146