UNIDAD DE LABORATORIO DE CIENCIAS AMBIENTALES MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES ELABORÓ

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1 UNIDAD DE LABORATORIO DE CIENCIAS AMBIENTALES MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES ELABORÓ M EN C IRMA GUADALUPE SALAZAR CERDA 1

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4 ÍNDICE Manejo y Uso del Microscopio Óptico Objetivo Introducción Seguridad Reactivos Material Equipo Muestreo y Almacenamiento Control de Calidad Calibración y/o Verificación Interferencias Procedimiento Reporte Cálculos y Resultados Manejo de Residuos Referencias bibliográficas Histórico de Cambios Anexos Estructura Celular Objetivo Introducción Seguridad Reactivos Material

5 5.2 Equipo Muestreo y Almacenamiento Control de Calidad Calibración y/o Verificación Interferencias Procedimiento Reporte Cálculos y Resultados Manejo de Residuos Referencias bibliográficas Histórico de Cambios Anexos Diversidad Biológica, Organismos microscópicos Objetivo Introducción Seguridad Reactivos Material Equipo Muestreo y Almacenamiento Control de Calidad Calibración y/o Verificación Interferencias Procedimiento Reporte Cálculos y Resultados Manejo de Residuos

6 14. Referencias bibliográficas Histórico de Cambios Anexos

7 Unidad de Aprendizaje: Biología Título de la práctica: Manejo y Uso del Microscopio No. Práctica: 1 Óptico Fecha de Emisión: Febrero 2010 Páginas: 7 Fecha de Revisión: Febrero 2010 No. de Revisión: 00 Elaboró: M en C Irma Guadalupe Salazar Cerda 1. Objetivo Conocer y manejar las partes y funciones del microscopio óptico 2. Introducción El microscopio es un instrumento que nos permite visualizar objetos muy pequeños que el ojo no podría distinguir. Existen diferentes tipos de microscopios: 1) Fotónico u óptico, permite observar preparaciones fijas o vivas con una menor imagen. 2) Estereoscópico, utilizado para hacer disecciones de organismos vivos y muertos, permite mejor manipulación de especímenes, presenta una imagen tridimensional. 3) Contraste de fases, se pueden hacer observaciones en vivo sin necesidad de matar a las células al someterlas a la acción de fijadores y colorantes. 4) Electrónico, utilizado para observar preparaciones fijas de organismos o tejidos con una mejor imagen. 5) De barrido, utilizado para observar preparaciones por congelación a una mejor imagen y aumento. 6) Fluorescencia, utilizado para descubrir la localización de moléculas específicas en las células, a través de colorantes fluorescentes. 7

8 Las partes del microscopio óptico son: 1) PARTE MECÁNICO. Partes para apoyo y sostén de las lentes. - Soporte, base o pie, sirve para dar firmeza y estabilidad al aparato. - Columna, une a la platina con la base y sostiene al condensador y al diafragma - Brazo de potencia, es una estructura vertical, curva situada entre la parte posterior del soporte y el tubo. - Tubo, proporciona sostén a los oculares y objetivos. - Revolver, es un tambor giratorio situado en la parte inferior del tubo que contiene un sistema de lentes rotatorios llamado objetivos. - Cremallera, sirve para subir o bajar el tubo. - Tornillo macrométrico, mueve el tubo hacia arriba o hacia abajo y sirve para enfocar con rapidez la muestra observada. - Tornillo micrométrico o de ajuste fino. Permite mover muy lentamente el tubo para realizar un enfoque más preciso. - Platina, sostiene a las preparaciones. 2) PARTE ÓPTICA - Oculares, son las lentes por donde se va a observar. - Objetivos, son las lentes que quedan cerca del objeto a observar. Los microscopios ÓPTICOS utilizan luz visible, generalmente tienen un ocular que aumenta diez veces el objeto y tres objetivos que son: 1.- Objetivo de menor aumento o seco débil, el cual aumenta 10 veces (Objetivo 10X). 2.- Objetivo de mayor aumento o seco fuerte, el cual aumenta 40 veces (Objetivo 40X). 3.- Objetivo de inmersión, aumenta 100 veces, aquí se debe usar una gota de aceite de inmersión (Objetivo 100X). 8

9 RECOMENDACIONES A) Si algunos de los objetivos o lentes de los oculares se encuentran sucios, limpiarlos con papel de seda o kleenex, realizando un movimiento circular evitando un movimiento de lado a lado para no rayar el lente. B) 10X, 40X, 100X, indican los aumentos que dan los objetivos, pero para calcular el aumento real al que estamos observando, se realiza una multiplicación del aumento del objetivo que se está usando por el aumento de la lente del ocular del microscopio, por ejemplo, si estamos observando una preparación con un objetivo de 10X éste se multiplica por el aumento del ocular el cual es de 10X, la operación nos da 100 veces más grande, y así sucesivamente. Ocular 10X por objetivo 10X = 100 veces más grande Ocular 10X por objetivo 40X = 400 veces más grande Ocular 10X por objetivo 100X = 1000 veces más grande 3) ILUMINACIÓN Se encuentra bajo la platina - Lámpara, es una fuente iluminosa separada o integrada al microscopio. - Espejo, el cual dirige la luz hacia el condensador. - Condensador, es el que reúne los rayos de luz y los dirige hacia el objetivo. - Diafragma, es el que regula la cantidad de rayos luminosos que llegan a la preparación. 9

10 3. Seguridad Bata Lentes Zapatos de piso Cubre bocas 4. Reactivos Reactivo Aceite de inmersión 5.1 Material Material Preparaciones fijas Porta objetos Cubre objetos Navaja Kleenex 10

11 5.2 Equipo Mencionar los aparatos necesarios para llevar a cabo la práctica. Equipo Microscopio óptico 6. Muestreo y Almacenamiento No aplica 7. Control de Calidad Aplicación de cuestionario como reporte de la práctica 8. Calibración y/o Verificación El equipo antes de ser usado deberá ser verificado previamente para que su uso sea correcto y este no sufra ninguna averiación si es necesario. 9. Interferencias Calidad de las muestras que se usaran. 10. Procedimiento 1.- Leer y entender las funciones de cada parte del microscopio óptico antes de entrar a práctica. 2.- Con la explicación del docente ir analizando cada parte y funciones, guiándose con el microscopio (tocar y manejar las partes, con mucho cuidado). 3.- Una vez aprendido y entendido las partes y funciones realizar los siguientes pasos: 4.- Para trasladar el microscopio de un lugar a otro, agarrar el brazo del microscopio con la mano derecha y el pie con la mano izquierda, de está manera se evitará que se desequilibre el microscopio. 11

12 5.- Colocar el microscopio en una de las esquinas de la mesa de trabajo y de frente, cerca del contacto. 6.-Primero revisar que la platina esté totalmente abajo, si no es así bajarlo con el tornillo macrométrico. 7.- El docente o laboratorista, colocará una preparación sobre la platina. 8.- Girar el revólver y colocar en forma vertical el objetivo de 10X (siempre se usa primero el objetivo de menor aumento para enfocar). 9.- Prender el microscopio óptico 10.- Por medio del tornillo macrométrico, subir la preparación hasta que choque con el objetivo (el objetivo presenta un amortiguador el cual evitará romper la preparación o aplastarla) Posteriormente con el tornillo micrométrico girarlo hasta darle visualidad, una vez enfocada la preparación cada integrante observará (si la imagen no es clara sólo se moverá el tornillo micrométrico evitando mover el portaobjetos). EVITAR MOVER EL MICROSCOPIO CON LA PREPARACIÓN COLOCADA, PARA ESTO SE GIRARA EL TUBO OCULAR DONDE OTRO INTEGRANTE PUEDA OBSERVAR EN OTRA POSICIÓN. - Las personas que usan lentes quitárselos para evitar rayar el lente del ocular. - Las mujeres que tienen cabello largo amarrárselo para evitar tirar la preparación Una vez que todos los integrantes del equipo han observado la preparación, girar el revólver y ubicar el objetivo de 400 veces, de nuevo si la imagen no es clara solo mover el tornillo micrométrico Una vez observado con los dos objetivos, primero bajar la platina, girando el tornillo macrométrico, una vez abajo retirar la preparación y colocar otra preparación. EVITAR RETIRAR LA PREPARACIÓN SIN HABER BAJADO LA PLATINA, O DE LO CONTRARIO SE RALLARA EL OBJETIVO Cada integrante enfocará una preparación diferente manejando solo el microscopio, de está manera obtendrá su calificación Una vez obtenido una calificación, volver a bajar la platina y retirar la preparación, colocar otra preparación para otro integrante y realizar la misma indicación Cuando hallan terminado de observar ENTREGAR EL MICROSCOPIO CON LA PLATINA ABAJO Y CUBIERTO. 11. Reporte No aplica prereporte y como reporte los alumnos presentaran las imágenes de microscopio revisadas 12

13 12. Cálculos y Resultados No aplica. 13. Manejo de Residuos No aplica. 14. Referencias bibliográficas 1. Jiménez, G.L.F. Y Merchant, L.H. BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR. Person Educación. México Muñiz y col. BIOLOGÍA. 15. Histórico de Cambios Revisión Razón de Cambio Decía Dice Anexos No Aplica. 13

14 Unidad de Aprendizaje: Biología Título de la práctica: Estructura Celular No. Práctica: 2 Fecha de Emisión: Febrero 2010 Páginas: 7 Fecha de Revisión: Febrero 2010 No. de Revisión: 00 Elaboró: M en C Irma Guadalupe Salazar Cerda 1. Objetivo Conocer y manejar las partes y funciones del microscopio óptico 2. Introducción El microscopio es un instrumento que nos permite visualizar objetos muy pequeños que el ojo no podría distinguir. Existen diferentes tipos de microscopios: 1) Fotónico u óptico, permite observar preparaciones fijas o vivas con una menor imagen. 2) Estereoscópico, utilizado para hacer disecciones de organismos vivos y muertos, permite mejor manipulación de especímenes, presenta una imagen tridimensional. 3) Contraste de fases, se pueden hacer observaciones en vivo sin necesidad de matar a las células al someterlas a la acción de fijadores y colorantes. 4) Electrónico, utilizado para observar preparaciones fijas de organismos o tejidos con una mejor imagen. 5) De barrido, utilizado para observar preparaciones por congelación a una mejor imagen y aumento. 6) Fluorescencia, utilizado para descubrir la localización de moléculas específicas en las células, a través de colorantes fluorescentes. Las partes del microscopio óptico son: 14

15 1) PARTE MECÁNICO. Partes para apoyo y sostén de las lentes. - Soporte, base o pie, sirve para dar firmeza y estabilidad al aparato. - Columna, une a la platina con la base y sostiene al condensador y al diafragma - Brazo de potencia, es una estructura vertical, curva situada entre la parte posterior del soporte y el tubo. - Tubo, proporciona sostén a los oculares y objetivos. - Revolver, es un tambor giratorio situado en la parte inferior del tubo que contiene un sistema de lentes rotatorios llamado objetivos. - Cremallera, sirve para subir o bajar el tubo. - Tornillo macrométrico, mueve el tubo hacia arriba o hacia abajo y sirve para enfocar con rapidez la muestra observada. - Tornillo micrométrico o de ajuste fino. Permite mover muy lentamente el tubo para realizar un enfoque más preciso. - Platina, sostiene a las preparaciones. 2) PARTE ÓPTICA - Oculares, son las lentes por donde se va a observar. - Objetivos, son las lentes que quedan cerca del objeto a observar. Los microscopios ÓPTICOS utilizan luz visible, generalmente tienen un ocular que aumenta diez veces el objeto y tres objetivos que son: 1.- Objetivo de menor aumento o seco débil, el cual aumenta 10 veces (Objetivo 10X). 2.- Objetivo de mayor aumento o seco fuerte, el cual aumenta 40 veces (Objetivo 40X). 3.- Objetivo de inmersión, aumenta 100 veces, aquí se debe usar una gota de aceite de inmersión (Objetivo 100X). 15

16 RECOMENDACIONES A) Si algunos de los objetivos o lentes de los oculares se encuentran sucios, limpiarlos con papel de seda o kleenex, realizando un movimiento circular evitando un movimiento de lado a lado para no rayar el lente. B) 10X, 40X, 100X, indican los aumentos que dan los objetivos, pero para calcular el aumento real al que estamos observando, se realiza una multiplicación del aumento del objetivo que se está usando por el aumento de la lente del ocular del microscopio, por ejemplo, si estamos observando una preparación con un objetivo de 10X éste se multiplica por el aumento del ocular el cual es de 10X, la operación nos da 100 veces más grande, y así sucesivamente. Ocular 10X por objetivo 10X = 100 veces más grande Ocular 10X por objetivo 40X = 400 veces más grande Ocular 10X por objetivo 100X = 1000 veces más grande 3) ILUMINACIÓN Se encuentra bajo la platina - Lámpara, es una fuente iluminosa separada o integrada al microscopio. - Espejo, el cual dirige la luz hacia el condensador. - Condensador, es el que reúne los rayos de luz y los dirige hacia el objetivo. - Diafragma, es el que regula la cantidad de rayos luminosos que llegan a la preparación. 16

17 3. Seguridad Bata Lentes Zapatos de piso Cubre bocas 4. Reactivos Reactivo Aceite de inmersión 5.1 Material Material Preparaciones fijas Porta objetos Cubre objetos Navaja Kleenex 5.2 Equipo Equipo Microscopio óptico 6. Muestreo y Almacenamiento No aplica 7. Control de Calidad Aplicación de cuestionario como reporte de la práctica 17

18 8. Calibración y/o Verificación El equipo antes de ser usado deberá ser verificado previamente para que su uso sea correcto y este no sufra ninguna averiación si es necesario. 9. Interferencias Calidad de las muestras que se usaran. 10. Procedimiento 1.- Leer y entender las funciones de cada parte del microscopio óptico antes de entrar a práctica. 2.- Con la explicación del docente ir analizando cada parte y funciones, guiándose con el microscopio (tocar y manejar las partes, con mucho cuidado). 3.- Una vez aprendido y entendido las partes y funciones realizar los siguientes pasos: 4.- Para trasladar el microscopio de un lugar a otro, agarrar el brazo del microscopio con la mano derecha y el pie con la mano izquierda, de está manera se evitará que se desequilibre el microscopio. 5.- Colocar el microscopio en una de las esquinas de la mesa de trabajo y de frente, cerca del contacto. 6.-Primero revisar que la platina esté totalmente abajo, si no es así bajarlo con el tornillo macrométrico. 7.- El docente o laboratorista, colocará una preparación sobre la platina. 8.- Girar el revólver y colocar en forma vertical el objetivo de 10X (siempre se usa primero el objetivo de menor aumento para enfocar). 9.- Prender el microscopio óptico 10.- Por medio del tornillo macrométrico, subir la preparación hasta que choque con el objetivo (el objetivo presenta un amortiguador el cual evitará romper la preparación o aplastarla) Posteriormente con el tornillo micrométrico girarlo hasta darle visualidad, una vez enfocada la preparación cada integrante observará (si la imagen no es clara sólo se moverá el tornillo micrométrico evitando mover el portaobjetos). EVITAR MOVER EL MICROSCOPIO CON LA PREPARACIÓN COLOCADA, PARA ESTO SE GIRARA EL TUBO OCULAR DONDE OTRO INTEGRANTE PUEDA OBSEVAR EN OTRA POSICIÓN. - Las personas que usan lentes quitárselos para evitar rayar el lente del ocular. - Las mujeres que tienen cabello largo amarrárselo para evitar tirar la preparación Una vez que todos los integrantes del equipo han observado la preparación, girar el revólver y ubicar el objetivo de 400 veces, de nuevo si la imagen no es clara solo mover el tornillo micrométrico. 18

19 13.- Una vez observado con los dos objetivos, primero bajar la platina, girando el tornillo macrométrico, una vez abajo retirar la preparación y colocar otra preparación. EVITAR RETIRAR LA PREPARACIÓN SIN HABER BAJADO LA PLATINA, O DE LO CONTRARIO SE RALLARA EL OBJETIVO Cada integrante enfocará una preparación diferente manejando solo el microscopio, de está manera obtendrá su calificación Una vez obtenido una calificación, volver a bajar la platina y retirar la preparación, colocar otra preparación para otro integrante y realizar la misma indicación Cuando hallan terminado de observar ENTREGAR EL MICROSCOPIO CON LA PLATINA ABAJO Y CUBIERTO. 11. Reporte No aplica prereporte y como reporte los alumnos presentaran las imágenes de microscopio revisadas 12. Cálculos y Resultados No aplica. 13. Manejo de Residuos No aplica. 14. Referencias bibliográficas Lanfranconi, M. Historia de la Microscopía. Introducción a la Biología. Fac. de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad Nacional de Mar de Plata. Recuperado en Noviembre 30, 2007, de la World Wide Web: s/049_055_lectura_microscopia.pdf 19

20 15. Histórico de Cambios Colocar el siguiente cuadro para cuando sea necesario realizar alguna modificación de la práctica. Revisión Razón de Cambio Decía Dice Anexos No Aplica. 20

21 Unidad de Aprendizaje: Guía para Elaboración de Prácticas Biología Título de la práctica: Diversidad Biológica, Organismos No. Práctica: 3 microscópicos Fecha de Emisión: Febrero 2010 Páginas: 5 Fecha de Revisión: Febrero 2010 No. de Revisión: 00 Elaboró: M. en C. Irma Guadalupe Salazar Cerda 1. Objetivo Identificar los niveles de diversidad biológica y algunos tejidos básicos. 2. Introducción La célula es la unidad anatómico-funcional sobre la cual se edifica el cuerpo humano. El cuerpo humano se compone de billones de células dispuestas de diversas maneras para formar tejidos, órganos, aparatos y sistemas. Cuando las células se enlazan forman tejidos, éstos, al unirse, dan lugar a órganos, como riñón o hígado. Los órganos al asociarse forman aparatos como el respiratorio o integran sistemas como el nervioso. Un tejido es un conjunto de células semejantes que desempeñan una función especial. En el organismo hay cuatro tejidos fundamentales que son: Epitelial, conectivo, muscular y nervioso. La diferencia entre los tejidos se da por la función que desempeñan: 1.- El tejido Epitelial sirve para proteger, además absorbe sustancias y las elimina, un ejemplo claro es la superficie de la piel, que protege de la desecación, de cambios de temperatura, absorbe casi cualquier sustancias aplicada sobre ella, elimina sudor y otros materiales. Otros tejidos epiteliales son los revestimientos interiores del intestino, aparato respiratorio y de las vías urinarias. 2.- El tejido Conectivo sirve para unir, dar soporte y firmeza a los tejidos, en forma normal se encuentra entre dos tejidos diferentes y los une, como ocurre al tejido graso. En otros casos da soporte como el tejido óseo; el tejido vascular penetra al interior penetra al interior de los órganos. La sangre forma parte del tejido conectivo ya que destruyen bacterias cuando invaden el organismo. 3.- El tejido Muscular se especializa en contraerse, debido a la característica de las células musculares de ser alargadas y capaces de disminuir la longitud. 4.- El tejido Nervioso trasmite ondas de excitación a distancia, por ejemplo, del cerebro a músculos de la pierna, también recibe estímulos luminosos, sonido y tacto, produce la función más elevada de la creación: el pensamiento. 21

22 Un órgano, ésta formado por tejidos agrupados para contribuir a la realización de una actividad en particular. Por ejemplo, el corazón está formado por tejido muscular (miocardio), por dentro (endocardio) y por fuera (pericardio) está forrado por tejido epitelial. Hay tejido de sostén entre las fibras musculares y en las válvulas, también existe tejido nervioso para la conducción de estímulos. Un aparato es un conjunto de órganos diferentes, que actúan conjuntamente para realizar una función. Por ejemplo, el aparato digestivo, formado por boca, faringe, esófago, estómago, intestino delgado y grueso, colon y dos glándulas: hígado y páncreas. Todos colaboran para efectuar la digestión y absorción de nutrientes y eliminación de restos no utilizables. Primero los dientes trituran la comida, después se mezcla con la saliva, para hacerla homogénea, para al estómago donde se homogeiniza, hasta desintegrarla en partículas muy pequeñas, se segrega ácido y enzimas para transformalas en partículas absorbibles llamada quimo, éste pasa al intestino delgado, donde se combina con secresiones provenientes del hígado y del páncreas, donde se reducen los nutrientes a compuestos simples llamado quilo, para ser absorbido por el tejido epitelial del intestino, lo no aprovechable se elimina. Un Sistema es un conjunto de órganos semejantes, compuestos de un mismo tejido y dotados de funciones del mismo orden. Por ejemplo, el sistema nervioso, el cual está formado por varios órganos como: cerebro, cerebelo, bulbo raquídeo, a través de los nervios periféricos, se forman plexos nerviosos que se localizan en el interior de otros aparatos, como intestino o corazón, los sistemas tienen sus propios órganos y además forman parte de las demás estructuras del cuerpo. 3. Seguridad Bata Lentes Zapato de piso Cubre bocas 4. Reactivos Reactivo No Aplica 22

23 5.1 Material Guía para Elaboración de Prácticas I Material Caja petri Lupa Gotero Pipeta Pasteur Pinzas 5.2 Equipo Equipo Microscopio óptico 6. Muestreo y Almacenamiento No aplica 7. Control de Calidad Aplicación de Cuestionario. 8. Calibración y/o Verificación El equipo antes de ser usado deberá ser verificado previamente para que su uso sea correcto. 9. Interferencias Lo relacionado a la calidad de las muestras. 10. Procedimiento 1. - Raspa el revestimiento interno de la mejilla de un compañero de equipo con un abate lenguas Coloca la muestra sobre un portaobjetos, añadiéndole una gota de agua, colócale un cubreobjetos y observa la preparación en el microscopio a un aumento de 100 veces y después a 400 veces, realiza un dibujo en cada aumento e indica el tipo de células observadas A otro compañero límpiale la yema del dedo índice con algodón humedecido con alcohol, pínchale el dedo con una lanceta, coloca en la esquina de un portaobjetos, perfectamente limpia dos gotas de sangre, con otro portaobjeto estira las gotas una sola vez, esparciendo la muestra en todo el 23

24 portaobjetos. Posteriormente agrégale dos gotas de azul de metileno, observa en el microscopio y realiza esquemas a un aumento de 100 y 400 veces. 11. Reporte No se requiere el pre-reporte y el reporte consistirá en la entrega del cuestionario e imágenes de lo observado en el microscopio. 12. Cálculos y Resultados No aplica 13. Manejo de Residuos No aplica. 14. Referencias bibliográficas Lanfranconi, M. Historia de la Microscopía. Introducción a la Biología. Fac. de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad Nacional de Mar de Plata. Recuperado en Noviembre 30, 2007, de la World Wide Web: opia.pdf 15. Histórico de Cambios Revisión Razón de Cambio Decía Dice Anexos No Aplica. 24