Validación de métodos analíticos:
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- María José Duarte Moya
- hace 6 años
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1 Métodos analíticos adecuados a su propósito Validación de métodos analíticos: Conceptos y elementos Prof. Dr. Bertram Nagel Consultor PTB Leipzig, Alemania 1
2 Los buenos resultados analíticos se basan en Personal Gestión Método Equipo Ambiente Material 2
3 Desarrollo de un método de prueba en el laboratorio analítico Selección de un método analítico Elaboración y validación del método Implantación del método Monitoreo/seguimiento del método 3
4 Selección de un método analítico Características de aplicación Características de metodología Características de desempeño 4
5 Características de aplicación Costos/prueba Tipo, número y volumen de muestras Equipo de preparación de muestras y equipo de medición Personal Espacio y ambiente Seguridad ocupacional 5
6 Selección de un método analítico Características de aplicación Características de metodología Características de desempeño 6
7 Características de metodología Sensitividad y especificidad analítica Selección de la reacción química Optimización de las condiciones de reacciones químicas Principios de calibración y estandarización Robustez del procedimiento analítico 7
8 Selección de un método analítico Características de aplicación Características de metodología Características de desempeño 8
9 Características de desempeño Rango de trabajo Precisión Tasa de recuperación Interferencias Exactitud Límites de detección y cuantificación 9
10 Definiciones (I) Verificación Confirmación del cumplimiento de los requisitos especificados por medio del examen y aporte de evidencia objetiva. 10
11 Definiciones (II) Validación La validación es la confirmación por examen y suministro de evidencia objetiva del cumplimiento de los requisitos particulares para un uso propuesto específico. 11
12 Validación de problemas o de métodos? (I) Validación de problemas Qué método de prueba es necesario y suficiente para elaborar la tarea? Estoy aplicando el método de prueba correcto? 12
13 Validación de problemas o de métodos? (II) Validación del método El método es suficiente y confiable, y adecuado a los propósitos? Estoy aplicando correctamente el método de prueba? 13
14 DIS ISO 17025: Validación de métodos (I) El laboratorio debe validar: Métodos no estandarizados Métodos elaborados/desarrollados en el laboratorio Métodos estandarizados si se los usa fuera de su rango de concentración intentado y validado Extensiones de métodos a otros análitos. 14
15 DIS ISO 17025: Validación de métodos (II) El laboratorio debe registrar: Los resultados obtenidos El procedimiento usado para la validación, y Si el método validado cumple con los requerimientos de la aplicación intencionada. 15
16 Validación: procedimiento La validación incluye: 1. La especificación de los requisitos 2. La determinación de los datos (valores) característicos del método 3. La comparación de los requerimientos/requisitos con los datos/valores característicos del método 4. La confirmación de la validez (statement on the validity). 16
17 Diagrama de flujo de la validación Requerimientos del cliente Qué desea el cliente, qué problemas tiene? Cuál método es el adecuado para resolver el problema del cliente? Requerimientos conocidos? Sí Selección del método Valores c. necesarios conocidos? No No Averiguar los requerimientos Averiguar los valores caracteristicos necesarios Ejemplo: exactitud, especificidad, límites de cuantificación Sí Validación Averiguar los valores característicos necesarios Método adecuado? Sí No Seleccionar algún otro método Termina la validación 17
18 Prueba de aptitud del sistema sistema de calidad Validación del método Método, equipo, sistema Muestra Preparación de la muestra Prueba del equipo calificación del equipo Sistema de análisis Calibración Methodenvalidierung Equipo Método analítico incluye hardware software Resultado Validación del software 18
19 Validación: parámetros a determinar Incertidumbre de los resultados Precisión y exactitud Repetibilidad y reproducibilidad Linearidad (rango de trabajo) Límite de detección Límite de cuantificación Selectividad y/o especificidad del método Sensitividad (sensibilidad) cruzada Robustez 19
20 Técnicas de validación (I) El laboratorio debe usar las técnicas siguientes o una combinación de ellas: Calibración usando materiales estándares o de referencia Comparación de resultados logrados usando otros métodos Pruebas interlaboratorios 20
21 Técnicas de validación (II) Evaluación sistemática de los factores que podrían afectar los resultados de pruebas y/o calibraciones Evaluación de la incertidumbre de los resultados obtenidos con base en la comprensión científica, los principios teóricos del método y la experiencia práctica. 21
22 Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (I) Métodos no validados (ejemplos) Medición de masa Medición de densidad Análisis elemental orgánico Espectroscopía cualitativa Medición de la turbiedad Determinación del punto de fusión 22
23 Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (II) Métodos con poca demanda de validación (ejemplos) Indice de refracción Determinación de la humedad Gravimetría Viscosimetría Termogravimetría 23
24 Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (III) Métodos a validar (ejemplos) Cromatografía Análisis elemental inorgánico Electroforesis Polarografía/ Voltametría Titulaciones 24
25 La pirámide de validación Elementos de validación específicos para cada análisis: especificidad, precisión (método de adición) Matriz de la muestra Control de métodos Aptitud del método Desarrollo y aplicación del método Verificación de características del método Interna: Control de calidad Externa:Prueba interlab. Averiguación excepcional de características del método Ejemplos: A Método interno (In-house) HPLC para control de la producción en Química/Farmacia: (+3) B Adaptación de un método de análisis elemental descrito en la literatura: (+4) C Cuantificación de PAK en muestras de suelos por DIN o por EPA:
26 Recomendaciones (I) Método por prioridad: 1. Métodos de prueba internos y modificados 2. Métodos de prueba con alto potencial de riesgo 3. Métodos de prueba o productos con alto nivel de utilización 4. Validar primero los puntos críticos en los procedimientos. 26
27 Recomendaciones (II) Controlar diariamente el sistema analítico general (por ejemplo, con la carta de control) proporciona mayor seguridad que una prueba semestral de todos los componentes individuales. En caso de dudas, se aplica la evaluación costobeneficio por parte del cliente como un criterio de decisión. 27
28 Calificación del equipo (I) 1. Calificación del diseño (C.D., D.Q.) Define las especificaciones funcionales y operacionales del instrumento, y detalla las condiciones y decisiones en la selección y desempeño del proveedor. 28
29 Calificación del equipo (II) 2. Calificación de la construcción (C.C., C.Q.) Asegurar por parte del fabricante que el producto ha sido diseñado y fabricado según un sistema de calidad reconocido mundialmente, y que cumple con las condiciones de conformidad y seguridad. 29
30 Calificación del equipo (III) 2. Calificación de instalación (C.I., I.Q.) Establece que el instrumento es recibido de acuerdo a como se diseñó y especificó, que está adecuadamente instalado en el ambiente que se seleccionó, y que es apropiado para la operación del instrumento. 30
31 Calificación del equipo (IV) 4. Calificación de la aplicación (C.A., A.Q.) El proceso en donde se demuestra que un instrumento funcionará de acuerdo a la especificación operacional en el ambiente seleccionado. 31
32 Calificación del equipo (V) 5. Calificación del funcionamiento (C.F., P.Q.) El proceso en donde se demuestra que un instrumento funciona de acuerdo a la especificación adecuada para su uso rutinario. 32
33 Calificación del equipo (VI) 6. Calificación del mantenimiento (C.M., M.Q.) El proceso de revisión periódica. Cualquier reparación, ajuste, y otro servicio debe ser debidamente registrado en la documentación correspondiente. 33
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