CURSO INTERNACIONAL DE POSGRADO

Transcripción

1 CURSO INTERNACIONAL DE POSGRADO Córdoba, Argentina de octubre de 2011

2 Prof. Dra. MARCELA LONGHI DEPARTAMENTO DE FARMACIA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE CORDOBA ARGENTINA

3 DATOS ANALITICOS GENERADOS POR ANALISIS QUIMICOS CONFIABILIDAD VALIDEZ METODO ANALITICO CONFIABILIDAD DEL INSTRUMENTAL ADECUADO ENTRENAMIENTO DE ANALISTAS

4 MAYOR FUENTE DE ERROR EN ANALISIS INSTRUMENTOS NO CONFIABLES NO CALIFICADOS O CALIBRADOS ADECUADAMENTE CON ESTÁNDARES TRAZEABLES REGISTROS DE CALIFICACION Y CALIBRACION DOCUMENTOS REQUERIDOS POR AUTORIDADES DE CONTROL

5 SISTEMA DE CALIDAD GLOBAL IDONEIDAD DEL PRODUCTO DETERMINADA POR DATOS OBTENIDOS DESDE UN EQUIPO ANALITICO DEMOSTRAR QUE ESE EQUIPO ES ADECUADO PARA EL USO PROPUESTO Y CALIBRADO Y MANTENIDO EN ESTADO APROPIADO LA VERIFICACION DEL RENDIMIENTO O CALIFICACION DEL INSTRUMENTAL ANALITICO SE REALIZA DE DIFERENTES MANERAS o TIPO DE EQUIPO, APLICACIÓN CALIFICACION ESPECTROFOTOMETRO UV EXACTITUD DE λ UTILIZANDO ESTANDARES TRAZEABLES phmetro SOLUCIONES REGULADORAS DE ph CERTIFICADAS

6 CALIFICACION ACORDE A SUS FINES EQUIPO PARA CLAE (HPLC) IDENTIFICACION DE PRODUCTO COINCIDENCIA DE TIEMPO DE RETENCION CON ESTANDAR MENOR CALIFICACION EQUIPO PARA MEDIR CANTIDAD EXACTA DE IMPUREZA TOXICA DE UN IFA

7 CALIFICACION DEL EQUIPO ESTABLECER CAPACIDAD Y CONFIABILIDAD PARA EL USO PROPUESTO EN UN ENTORNO ADECUADO PROTOCOLO DE CALIFICACION DETALLES DEL SISTEMA ALCANCES Y LIMITACIONES DE LA CALIFICACION ENSAYOS Y PROCEDIMIENTOS DE CALIFICACION CRITERIOS DE ACEPTACION TRES ETAPAS CALIFICACION DE INSTALACION CALIFICACION OPERACIONAL CALIFICACION DE DESEMPEÑO

8 CALIFICACION DE INSTALACION [INSTALLATION QUALIFICATION (IQ)] ESTABLECE QUE EL EQUIPO FUE RECIBIDO DE ACUERDO A LO ESPECIFICADO E INSTALADO APROPIADAMENTE DE ACUERDO A LOS REQUISITOS DE DISEÑO Y EN UN AMBIENTE ADECUADO PARA SU FUNCIONAMIENTO. INSTALACION ADECUADA PRIMERA ETAPA PARA ASEGURAR UN FUNCIONAMIENTO APROPIADO DEL EQUIPO ACTIVIDADES: INSPECCIONAR POR POSIBLES DAÑOS VERIFICAR EL MODELO, LA CONFIGURACION Y EL NUMERO DE SERIE DE TODOS LOS COMPONENTES ASEGURAR LA CORRECTA PUESTA EN MARCHA Y EL INICIO DE TODOS LOS COMPONENTES DEL SISTEMA

9 CALIFICACION OPERACIONAL [OPERATION QUALIFICATION (OQ)] PROCESO DE DEMOSTRAR QUE EL EQUIPO FUNCIONA DE ACUERDO A LOS REQUERIMIENTOS OPERACIONALES EN UN AMBIENTE ADECUADO EQUIPO DE CLAE: BOMBA: EXACTITUD DE CAUDAL Y GRADIENTE DETECTOR: LINEARIDAD DE RESPUESTA, RUIDO, EXACTITUD DE λ INYECTOR: PRECISION, LINEARIDAD, HORNO: EXACTITUD DE TEMPERATURA ESPECTROFOTOMETRO UV-VISIBLE: EXACTITUD Y REPRODUCIBILIDAD DE λ, PERDIDA DE LUZ, RESOLUCION, RUIDO, ESTABILIDAD DE LINEA DE BASE RESPUESTAS DEL SISTEMA COMPARADAS CON LOS RESULTADOS ESPECIFICADOS EN LOS INSTRUCTIVOS

10 CALIFICACION DE FUNCIONAMIENTO [PERFORMANCE QUALIFICATION (PQ)] PROCESO PARA DEMOSTRAR QUE UN EQUIPO CUMPLE CON LAS ESPECIFICACIONES ESTABLECIDAS POR EL USUARIO PARA SU USO DE RUTINA PQ SE PUEDE DEMOSTRAR REALIZANDO UNA APLICACIÓN TIPICA DEL USUARIO QUE REQUIERA QUE LOS COMPONENTES DEL EQUIPO FUNCIONEN JUNTOS DE MANERA ADECUADA PARA BRINDAR LOS RESULTADOS ESPERADOS SE OBTIENE INFORMACION CON EL USO DE RUTINA DEL EQUIPO.

11 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR (SOP) EQUIPO CALIFICADO GENERAR DATOS ANALITICOS REDACTAR UN SOP PARA EL NUEVO EQUIPO INSTRUCCIONES DE OPERACIÓN, MANTENIMIENTO Y CALIBRACION ESCRIBIR INSTRUCCIONES SIMPLES INCLUIR: ENSAYOS REQUERIDOS PARA MANTENER, CRITERIOS DE ACEPTACION Y FRECUENCIA PARA CADA TEST DEFINIR QUE REPARACIONES (MAYORES O MENORES) NECESITAN RECALIFICACION TOTAL O PARCIAL REEMPLAZO DE: o o LAMPARA UV DEL DETECTOR RECALIFICACION PARCIAL TARJETA DE CIRCUITOS RECALIFICACION TOTAL

12 CALIFICACION Y MANTENIMIENTO CALIFICACION O CALIBRACION A INTERVALOS ADECUADOS DE ACUERDO CON EL PROGRAMA ESTABLECIDO NO DEBEN UTILIZARSE EQUIPOS QUE NO REUNAN LAS ESPECIFICACIONES ESTABLECIDAS CADA INSTRUMENTO DEBE TENER UN STICKER DE CALIBRACION CON LA INFORMACIÓN DEL ESTADO DEL SISTEMA: CUANDO SE REALIZO, QUIEN LA EFECTUO, FECHA DE LA PROXIMA CALIBRACION SE REQUIERE UN PROGRAMA SISTEMATICO PARA MANTENER EL EQUIPO EN ESTADO DE CALIFICACION

13 VALIDACION ANALITICA REQUISITO BASICO PARA ASEGURAR LA CALIDAD Y CONFIABILIDAD DE LOS RESULTADOS DE UNA APLICACIÓN ANALITICA OBJETO DEMOSTRAR QUE EL PROCEDIMIENTO ES ADECUADO PARA EL USO PROPUESTO SE DETERMINA POR ESTUDIOS EXPERIMENTALES BIEN DOCUMENTADOS EXACTITUD Y CONFIABILIDAD DE RESULTADOS ANALITICOS ES CRUCIAL PARA ASEGURAR LA CALIDAD, SEGURIDAD Y EFICACIA DE LOS MEDICAMENTOS POR ESTA RAZON SE PUBLICARON NUMEROSOS REQUERIMIENTOS REGULATORIOS o REQUISITOS DE ICH DESDE 1990 o FARMACOPEA ARGENTINA 7ma EDICION

14 TIPOS DE CUANTIFICACION POR ESTANDAR EXTERNO METODO MAS SENCILLO PREPARACION DE UNA SERIE DE SOLUCIONES ESTANDAR CON UNA CONCENTRACION CERCANA A LA DEL ANALITO SE OBTIENEN LOS CROMATOGRAMAS DE LAS SOLUCIONES Y SE GRAFICA AREA O ALTURA DEL PICO EN FUNCION DE LA CONCENTRACION DEL ANALITO EL GRAFICO DE LOS DATOS DEBERA DAR UNA LINEA RECTA PARA EVITAR ERRORES ES CRUCIAL DISMINUIR LA VARIABILIDAD ENTRE LAS INYECCIONES INDEPENDIENTES. LOS AUTOMUESTREADORES DISMINUYEN ESTE ERROR A MENOS DEL 0,5 % RSD

15 POR ESTANDAR INTERNO PROVEE MAYOR PRECISION SE ELIMINAN LOS ERRORES POR INYECCION DE LA MUESTRA UNA CANTIDAD CONOCIDA DEL ESTANDAR INTERNO SE AGREGA A LA SOLUCION DE LA MUESTRA Y SOLUCIONES ESTANDAR SE DETERMINA LA RELACION ALTURA O AREA DE PICO ESTANDAR ANALITO SE GRAFICA ESTA RELACION EN FUNCION DE LA CONCENTRACION DE ANALITO BUENA RESOLUCION ENTRE ESTANDAR INTERNO Y ANALITO SEPARACION DE LA LINEA DE BASE 1,5

16 ESTRATEGIAS Y PARAMETROS DE VALIDACION SE DEBE REDACTAR UN PROTOCOLO PARA FACILITAR LA TAREA Y MINIMIZAR EL NUMERO DE EXPERIMENTOS LINEALIDAD DE UN PROCEDIMIENTO ANALITICO HABILIDAD PARA OBTENER RESULTADOS (ABSORBANCIA O AREA) EN LOS ENSAYOS DIRECTAMENTE PROPORCIONALES (DENTRO DE UN RANGO DETERMINADO) A LA CONCENTRACION DE ANALITO EN LA MUESTRA LA CUANTIFIACION DEL ANALITO DEPENDE DE LA OBEDIENCIA A LA LEY DE BEER

17 LA LINEALIDAD SE DEMUESTRA POR DILUCION DE UNA SOLUCION ESTANDAR STOCK PREPARANDO NUMEROSAS SOLUCIONES POR PESADAS INDEPENDIENTES SE INTRODUCE MUCHO ERROR UTILIZAR UN MINIMO DE 5 SOLUCIONES EVALUACION DE LINEALIDAD POR INSPECCION VISUALDEL GRAFICO SE ALCANZA LINEALIDAD SI r 2 0,997 PENDIENTE SUMA RESIDUAL DE CUADRADOS INTERCEPTO y ACORDES A LO ESTABLECIDO POR ICH

18 RANGO DE UN PROCEDIMIENTO ANALITO INTERVALO ENTRE LOS LIMITES SUPERIOR E INFERIOR DE CONCENTRACION DE ANALITO EN LA MUESTRA PARA LAS CUALES SE HA DEMOSTRADO QUE EL PROCEDIMINETO ANALITICO TIENE UN NIVEL ADECUADO DE PRECISION, EXACTITUD Y LINEALIDAD. LA CONCENTRACION DE ESTANDAR Y MUESTRA ANALITICA DEBEN ESTAR COMPRENDIDOS EN EL RANGO LINEAR LA PENDIENTE DEL GRAFICO DA UNA IDEA DE LA SENSIBILIDAD DEL METODO EL INTERCEPTO y BRINDA INFORMACION SOBRE LA VARIABILIDAD DEL METODO

19 EXACTITUD CERCANIA ENTRE EL VALOR DE REFERENCIA O VERDADERO Y EL VALOR HALLADO SE REPORTA COMO PORCENTAJE DE RECUPERACION DEL ENSAYO ICH RECOMIENDA REALIZAR UN MINIMO DE 9 DETEMINACIONES A 3 NIVELES DE CONCENTRACION CUBRIENDO EL RANGO (3 CONCENTRACIONES POR TRIPLICADO) PARA FARMACOS APLICACIÓN DEL METODO ANALITICO AL IFA Y CUANTIFICARLO CONTRA UN ESTADAR DE REFERENCIA DE CONCENTRACION CONOCIDA PARA FORMULACION FARMACEUTICA APLICACIÓN DEL PROCEDIMIENTO ANALITICO A MEZCLAS SINTETICAS DE LOS COMPONENTES DE LA FORMULA O FORMULA PLACEBO CON EL AGREGADO DE CANTIDADES CONOCIDAS DEL FARMACO DE PUREZA ESTABLECIDA RANGO DE EXACTITUD ACEPTABLE ENTRE 98 % Y 102 % DE RECUPERACION ESPERADA

20 PRECISION PROCEDIMIENTO ANALITICO QUE EXPRESA EL GRADO DE COINCIDENCIA (GRADO DE DISPERSION) ENTRE UNA SERIE DE MEDICIONES OBTENIDAS A PARTIR DE MUESTRAS MULTIPLES DE LA MISMA MUESTRA HOMOGENEA BAJO CONDICIONES PRE-ESTABLECIDAS LA PRECISION DEBE SER CONSIDERADA A TRES NIVELES: REPETIBILIDAD, PRECISION INTERMEDIA Y REPRODUCIBILIDAD LA PRECISION OBTENIDA USANDO MUESTRAS AUTENTICAS PARAMETROS A CALCULAR PARA CADA NIVEL DE PRECISION: DESVIACION ESTANDAR, DESVIACION ESTANDAR RELATIVA (COEFICIENTE DE VARIACION), INTERVALO DE CONFIDENCIA REPETIBILIDAD EXPRESA VARIABILIDAD ANALITICA BAJO LAS MISMAS CONDICIONES OPERATIVAS SOBRE UN CORTO INTERVALO DE TIEMPO. REALIZAR MINIMO DE 9 DETERMINACIONES CUBRIENDO EL RANGO ESPECIFICADO DE CONCENTRACIONES DEL ENSAYO (3 CONCENTRACIONES POR TRIPLICADO) MINIMO DE 6 DETERMINACIONES AL 100 % DE LA CONCENTRACION ENSAYADA

21 PRECISION INTERMEDIA INFLUENCIA DE EFECTOS ADICIONALES AL AZAR DENTRO DEL LABORATORIO, DE ACUERDO AL USO PROPUESTO PARA EL PROCEDIMIENTO (DIFERENTES DIAS, ANALISTAS Y EQUIPOS). REPRODUCIBILIDAD PRECISION ENTRE LABORATORIOS PARA ESTUDIOS COLABORATIVOS PARA VALIDAR ESTE PARAMETRO SE DEBEN REALIZAR ESTUDIOS EN OTROS LABORATORIOS UTILIZANDO LA MISMA MUESTRA HOMOGENEA Y EL MISMO PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ROBUSTEZ MEDIDA DE LA CAPACIDAD DEL PROCEDIMIENTO ANALITICO PARA NO VERSE AFECTADO POR PEQUEÑAS PERO DELIVERADAS VARIACIONES EN LOS PARAMETROS DEL MISMO

22 ESPECIFICIDAD HABILIDAD PARA DETERMINAR INEQUIVOCAMENTE UN ANALITO EN PRESENCIA DE COMPONENTES SE ESPERA ESTEN PRESENTES EN LA MUESTRA ESPECIFICIDAD SELECTIVIDAD SE DETERMINA POR COMPARACION DE RESULTADOS ANALITICOS DE MUESTRAS CONTENIENDO IMPUREZAS, PRODUCTOS DE DEGRADACION O INGREDIENTES PLACEBO CON MUESTRAS ANALIZADAS SIN ESTOS HPLC RESOLUCION DE 2 PICOS QUE ELUYEN CERCANOS, UNO DE LOS CUALES ES EL ANALITO EL ANALISTA DEBE DEFINIR QUE IMPUREZAS SON PARES CRITICOS

23 VALIDACION DE METODOS BIOANALITICOS PROCEDIMIENTO EMPLEADO PARA DEMOSTRAR QUE UNA METODOLOGIA ANALITICA, USADA PARA LA CUANTIFICACION DE ANALITOS EN UNA MATRIZ BIOLOGICA, ES CONFIABLE Y REPRODUCIBLE PARA ALCANZAR SU OBJETIVO CUANTIFICAR EL ANALITO CON UN GRADO DE EXACTITUD Y PRECISION ACORDES A LA TAREA ENFOQUE ANALITICO UTILIZADO EN LOS METODOS BIOANALITICOS USO DE UNA METODOLOGIA DE CURVA ESTANDAR CON ESTANDAR INTERNO FDA GUIA PARA LA INDUSTRIA SOBRE EL DESARROLLO DE METODOLOGIAS BIOANALITICAS BASADAS EN INFORMES FINALES DE LAS CONFERENCIAS DE WASHINGTON 1990 Y 2000.

24 PARA ESTUDIOS DE BIODISPONIBILIDAD, BIOEQUIVALENCIA Y FARMACOCINETICA METODOLOGIAS BIEN CARACTERIZADAS Y COMPLETAMENTE VALIDADAS RESULTADOS CONFIABLES INTERPRETADOS SATISFACTORIAMENTE EL CONJUNTO BIOANALITICO INCLUYE LOS ESTANDARES DE CALIBRACION Y MUESTRAS QUE NO CONTIENEN ANALITOS, DENOMINADAS BLANCOS, PARA ASEGURAR QUE NO HAY INTERFERENCIAS DE LA MATRIZ. EXACTITUD Y PRECISION CALCULADAS UTILIZANDO MUESTRAS DE CONCENTRACION CONOCIDA DENOMINADAS MUESTRAS DE CONTROL DE CALIDAD (QCs) LOS ESTANDARES DE CALIBRACION Y LAS MUESTRAS CONTROL DE CALIDAD DEBEN PREPARARSE EN LA MISMA MATRIZ QUE LAS MUESTRAS REALES

25 ANALISIS DE FARMACOS Y SUS METABOLITOS EN MATRICES BIOLOGICAS UTILIZANDO MUESTRAS ADICIONADAS CON ESTANDARES DE CALIBRACION Y MUESTRAS CONTROL DE CALIDAD (QC). LA PUREZA DE LOS ESTANDARES DE REFERENCIA USADOS PARA PREPARAR LAS MUESTRAS PUEDE AFECTAR LOS DATOS DEL ESTUDIO. SE DEBEN USAR ESTANDARES ANALITICOS DE REFERENCIA DE IDENTIDAD Y PUREZA ESTABLECIDAS. CLASES DE ESTANDARES: 1.- ESTANDARES DE REFERENCIA CERTIFICADOS. 2.- ESTANDARES OBTENIDOS DE UNA FUENTE COMERCIAL CONFIABLE. 3.- OTRO MATERIAL DE PUREZA DOCUMENTADA, SINTETIZADO POR UN LABORATORIO ANALITICO O ESTABLECIMIENTO NO COMERCIAL. FUENTE Y NUMERO DE LOTE, FECHA DE CADUCIDAD, CERTIFICADO DE ANALISIS Y/O EVIDENCIA DE IDENTIDAD Y PUREZA.

26 SELECTIVIDAD HABILIDAD DE LA METODOLOGIA ANALITICA PARA DIFERENCIAR Y CUANTIFICAR AL ANALITO EN PRESENCIA DE OTROS COMPONENTES DE LA MUESTRA. ANALISIS DE MUESTRAS BLANCO DE LA MATRIZ BIOLOGICA APROPIADA (PLASMA, ORINA, ETC.) OBTENIDAS DE AL MENOS 6 FUENTES. CADA MUESTRA BLANCO DEBE SER ANALIZADA PARA INTERFERENCIAS. SE DEBE ASEGURAR SELECTIVIDAD AL MENOR LIMITE DE CUANTIFICACION (LLOQ). SUSTANCIAS INTERFERENTES POTENCIALES: COMPONENTES ENDOGENOS DE LA MATRIZ, METABOLITOS, PRODUCTOS DE DEGRADACION, OTRA MEDICACION ASOCIADA. METODOLOGIA PARA CUANTIFICAR MAS DE UN ANALITO, SE DEBE ANALIZAR CADA UNO DE ELLOS PARA ASEGURAR NO INTERFERENCIA.

27 EXACTITUD UTILIZAR UN MINIMO DE 5 DETERMINACIONES POR CONCENTRACION A 3 CONCENTRACIONES EN EL RANGO ESPERADO. EL VALOR MEDIO DEBE ESTAR DENTRO DEL 15 % DEL VALOR ESPERADO, PARA LLOQ NO MAS DEL 20 %. LA DESVIACION DE LA MEDIA DEL VALOR VERDADERO SIRVE COMO MEDIDA DE LA EXACTITUD. PRECISION DESCRIBE LA CERCANIA DE MEDICIONES INDIVIDUALES DE UN ANALITO CUANDO EL PROCEDIMIENTO ES APLICADO REPETIDAMENTE A MULTIPLES ALICUOTAS DE UN VOLUMEN HOMOGENEO SIMPLE DE MATRIZ BIOLOGICA. SE MIDE UTILIZANDO UN MINIMO DE 5 DETERMINACIONES POR CONCENTRACION A 3 CONCENTRACIONES DENTRO DEL RANGO ESPERADO. LA PRECISION DETERMINADA A CADA NIVEL DE CONCENTRACION, EL CV NO DEBE EXCEDER EL 15 %, EXCEPTO PARA LLOQ, EL CV NO DEBE SER MAYOR AL 20 %

28 RECUPERACION DE UN ANALITO EFICIENCIA DE EXTRACCION DE UNA METODOLOGIA ANALITICA DENTRO DE LOS LIMITES DE VARIABILIDAD. NO DEBE SER DEL 100 %, PERO EL GRADO DE RECUPERACION DE UN ANALITO Y DEL ESTANDAR INTERNO DEBE SER CONSISTENTE, PRECISO Y REPRODUCIBLE. EXPERIMENTOS REALIZADOS POR COMPARACION DE LOS RESULTADOS ANALITICOS PARA MUESTRAS EXTRAIDAS A 3 CONCENTRACIONES (BAJA, MEDIA Y ALTA) CON ESTANDARES SIN EXTRAER QUE REPRESENTEN EL 100 % DE RECUPERACION.

29 CALIBRACION/CURVA ESTANDAR GENERAR UNA CURVA PARA CADA ANALITO EN LA MUESTRA. MUESTRAS EN LA MISMA MATRIZ BIOLOGICA QUE LA DE LAS MUESTRAS EN EL ESTUDIO PROPUESTO AGREGADO DE CANTIDADES CONOCIDAS DE ANALITO A LA MATRIZ. LIMITE DE CUANTIFICACION (LLOQ) ESTANDAR DE MENOR CONCENTRACION EN LA CURVA DE CALIBRACION SERÁ ACEPTADO COMO LIMITE DE CUANTIFICACION SI: LA RESPUESTA DEL ANALITO ES AL MENOS 5 VECES LA RESPUESTA DEL BLANCO EL PICO DEL ANALITO (RESPUESTA) ES IDENTIFICABLE, DISCRETO Y REPRODUCIBLE CON UNA PRECISION DEL 20 % Y EXACTITUD DE %

30 CURVA DE CALIBRACION/CURVA ESTANDAR/CONCENTRACION-RESPUESTA SE DEBE UTILIZAR EL MODELO MAS SIMPLE QUE DESCRIBA ADECUADAMENTE LA RELACION CONCENTRACION-RESPUESTA SE DEBEN CUMPLIR LAS SIGUIENTES CONDICIONES: DESVIACION DEL 20 % DE LA CONCENTRACION NOMINAL PARA LLOQ DESVIACION DEL 15 % DE LA CONCENTRACION NOMINAL PARA ESTANDARES DIFERENTES DEL LLOQ DESVIACION MAYOR SE ELIMINA EL ESTANDAR SE ELIMINAN MAS DE 2 ESTANDARES PERMANECEN MENOS DE 5 ESTANDARES CALIBRACION NO ACEPTABLE

31 ESTABILIDAD DEL FARMACO EN UN FLUIDO BIOLOGICO ES FUNCION DE: LAS CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO, LAS PROPIEDADES QUIMICAS DEL FARMACO, LA MATRIZ Y EL ENVASE. LA ESTABILIDAD DE UN ANALITO EN UNA MATRIZ PARTICULAR Y EN UN ENVASE ES RELEVANTE SOLO PARA ESE SISTEMA Y NO PUEDE EXTRAPOLARSE A OTRO PROCEDIMIENTOS DE ESTABILIDAD DEBEN EVALUAR: LA ESTABILIDAD DE LOS ANALITOS DURANTE LA TOMA DE MUESTRA Y MANIPULACION, LUEGO DE ALMACENARSE LARGO TIEMPO A TEMPERATURAS DE FREEZER Y CORTO TIEMPO A TEMPERATURA AMBIENTE Y LUEGO DE CICLOS DE CONGELADO Y DESCONGELADO LAS CONDICIONES DE LOS ESTUDIOS DE ESTABILIDAD DEBEN REFLEJAR SITUACIONES SIMILARES A LAS ENCONTRADAS DURANTE EL MANEJO DE LA MUESTRA.

32 1.- ESTABILIDAD DURANTE LOS PROCESOS DE CONGELADO Y DESCONGELADO SE DEBE DETERMINAR LUEGO DE 3 CICLOS DE CONGELADO Y DESCONGELADO. AL MENOS 3 ALICUOTAS A CADA UNA DE LAS CONCENTRACIONES ALTA Y BAJA SE DEBEN ALMACENAR A LA TEMPERATURA ESPECIFICADA POR 24 H Y DESCONGELARSE A TEMPERATURA AMBIENTE. LUEGO DEL DESCONGELADO, LAS MUESTRAS DEBEN SER CONGELADAS POR H. REPETIR EL PROCESO 3 VECES Y LUEGO ANALIZAR 2.- ESTABILIDAD DE CORTO TIEMPO 3 ALICUOTAS A CADA UNA DE LAS CONCENTRACIONES ALTA Y BAJA DEBEN DESCONGELARSE A TEMPERATURA AMBIENTE POR 4 24 H (DEPENDIENDO DEL TIEMPO ESTIMADO EN QUE LAS MUESTRAS ESTARAN A TEMPERATURA AMBIENTE DURANTE EL ESTUDIO) Y ANALIZADAS.

33 3.- ESTABILIDAD DE LARGA DURACION EL TIEMPO DE ALMACENAMIENTO DEBE EXCEDER EL TIEMPO ENTRE LA FECHA DE LA PRIMERA TOMA DE MUESTRA Y LA DE LA ULTIMA MUESTRA ANALIZADA. SE DETERMINA POR ALMACENAMIENTO DE AL MENOS 3 ALICUOTAS, A CADA UNA DE LAS CONCENTRACIONES ALTA Y BAJA, BAJO LAS MISMAS CONDICIONES DE LAS MUESTRAS EN ESTUDIO. EL VOLUMEN DE LAS MUESTRAS DEBE SER SUFICIENTE COMO PARA ANALIZALAS EN 3 OCASIONES DIFERENTES. LA CONCENTRACION DE TODAS LAS MUESTRAS DE ESTABILIDAD DEBE SER COMPARADA CON LA MEDIA DE LOS VALORES CALCULADOS PARA LOS ESTANDARES A CONCENTRACIONES APROPIADAS DESDE EL PRIMER DIA DEL ESTUDIO DE ESTABILIDAD DE LARGA DURACION.

34 4.- ESTABILIDAD DE LA SOLUCION STOCK PARA EL FARMACO Y EL ESTANDAR INTERNO DEBE EVALUARSE A TEMPERATURA AMBIENTE POR AL MENOS 6 HORAS. SI LAS SOLUCIONES STOCK SON REFRIGERADAS O CONGELADAS DURANTE EL PERIODO RELACIONADO, LA ESTABILIDAD DEBE SER DOCUMENTADA. LUEGO DE CONCLUIDO EL TIEMPO DE ALMACENAMIENTO DESEADO, LA ESTABILIDAD DEBE EVALUARSE POR COMPARACION DE LA RESPUESTA DEL INSTRUMENTO CON LA DE SOLUCIONES FRESCAS. 5.- ESTABILIDAD POS-PREPARACION DEBE DETERMINARSE LA ESTABILIDAD DE LAS MUESTRAS PROCESADAS, INCLUYENDO EL TIEMPO DE RESIDENCIA EN EL AUTO-MUESTREADOR. LA ESTABILIDAD DEL FARMACO Y EL ESTANDAR INTERNO DEBEN EVALUARSE SOBRE EL TIEMPO DE EJECUCION PREVISTO PARA EL TAMAÑO DEL LOTE POR DETERMINACION DE LAS CONCENTRACIONES SOBRE LA BASE DE LA CALIBRACION ORIGINAL CON LOS ESTANDARES.

35 IDONEIDAD DEL SISTEMA VALIDACION DE LA METODOLOGIA ANALITICA UNA VEZ, AL FINALIZAR EL DESARROLLO ENSAYOS DE IDONEIDAD DEL SISTEMA PERIODICAMENTE ANTES DEL COMIENZO DEL ANALISIS DE MUESTRAS REPRODUCIBILIDAD DE TIEMPO DE RETENCION SENSIBILIDAD ADECUADA PARA CUANTIFICAR EL LLOQ SEPARACION CROMATOGRAFICA

36 INFORME DE LA METODOLOGIA ANALITICA 1. LISTA COMPLETA DE EQUIPOS, REACTIVOS Y PREPARACIONES 2. PROCEDIMIENTO PARA PREPARACION DE CURVA ESTANDAR, VALIDACION Y MUESTRAS CONTROL 3. PROCEDIMIENTO PARA EXTRACCION O TRAMIENTO DE MUESTRAS PREVIO A LOS ANALISIS. INCLUYE CRITERIOS PARA ACEPTACION/RECHAZO 4. METODOLOGIA PARA IDONEIDAD DEL SISTEMA 5. LIMITES DEL RANGO DE CUANTIFICACION 6. CRITERIOS DE ACEPTACION/RECHAZO PARA ESTANDARES DE LA CURVA Y QCS 7. RESUMEN DE LOS DATOS DE VALIDACION 8. CROMATOGRAMAS REPRESENTATIVOS DEL PLASMA BLANCO, PLASMA + ESTANDAR INTERNO, LLOQ 9. GRAFICO DE LA CURVA DE CALIBRACION ESTANDAR 10.INFORMACION SOPORTE PARA ESTABILIDAD

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