Dra. Mónica Fernández Cancio Dra. Laura Audí Parera

Transcripción

1 Dra. Mónica Fernández Cancio Dra. Laura Audí Parera Unidad Investigación Endocrinología y Nutrición Pediátricas Hospital Vall d Hebron Barcelona CIBERER VII ENCUENTRO DE AFECTADOS POR SIA 6 OCTUBRE DE 2007

2 DMRT1 / DMRT2 SF-1 / WT-1?? Wnt-4 1 locus Xp21 (DAX-1??) XX SEXO GENÉTICO XY DMRT1 / DMRT2 SF-1 / WT-1 SRY Wnt-4 2 locus Xp21 (DAX-1) SOX-9,... OVARIOS SEXO GONADAL TESTÍCULOS hcg/lh FSH Célula de Leydig Célula de Sertoli T T MIF Conductos de Wolff Conductos de Müller SEXO GENITAL Conductos de Wolff + Receptor andrógenos Conductos de Müller + Receptor MIF HOXA13 Trompas Utero 2/3 vagina INTERNO Epidídimo Deferente Vesículas seminales Seno urogenital y genitales externos EXTERNO Seno urogenital y genitales externos DHT + 5α-reductasa + Receptor andrógenos 1/3 vagina Labios mayores y menores Clítoris Próstata Bolsas escrotales Pene

3 Cromosoma 11 (WT-1) Cromosoma 9 (SF-1) Cromosoma 17 (SOX-9) Cromosoma Y (SRY) Cromosoma X (DAX-1) Cromosoma 1 (Wnt-4) TESTICULO Células de Sertoli Células de Leydig Cromosoma 2 (Rc LH) Cromosoma 19 (MIF) Factor inhibidor conductos Müller Colesterol Pregnenolona Cromosoma 8 (StAR) Cromosoma 15 (CYP11A) Cromosoma 12 (Rc MIF) Receptor Progesterona Cromosoma 11 (3BHSDII) 17OH-Progesterona Cromosoma 10 (CYP17) Androstendiona Cromosoma 9 (17BHSDIII) T Testosterona mrna Núcleo DHT Receptor Cromosoma 2 (SRD5A2) Cromosoma X (AR) Célula diana

4 Esquema diagnóstico Diagnóstico clínico fenotipo / antecedentes personales y familiares Diagnóstico genético cariotipo Diagnóstico por la imagen ecografía / laparoscopia / biopsia Diagnóstico bioquímico hormonas, cultivos celulares, estudios in vitro Diagnóstico molecular análisis del gen candidato

5 Cariotipo 46 XY Gónadas palpables Gónadas no palpables DIAGNÓSTICO BIOQUÍMICO: Infancia y pubertad: Gonadotropinas LH y FSH Test hcg: Testosterona total (T) Androstendiona (cociente T / androstendiona) Dihidrotestosterona (DHT) (cociente T / DHT) Otros precursores si se sospecha un déficit enzimático previo a la 17-ceto-reductasa (17OHP, DHEA, 17OHPreg) Estudio de función suprarrenal si existe un déficit enzimático que afecte la suprarrenal Adulto: Determinaciones basales de esteroides y gonadotropinas ECOGRAFÍA LAPAROSCOPIA ANATOMÍA PATOLÓGICA (gónadas / conductos genitales) DIAGNÓSTICO MOLECULAR (búsqueda de mutaciones en gen/genes candidato/s)

6 NOMENCLATURA PREVIA NOMENCLATURA PROPUESTA Estados intersexuales Pseudohermafroditismo femenino Pseudohermafroditismo masculino Hermafroditismo verdadero Disorders of Sex Development (DSD) Anomalías de la diferenciación sexual (ADS) 46,XX DSD 46,XX ADS 46,XY DSD 46,XY ADS Ovotesticular DSD ADS Ovotesticular Consensus statement on management of intersex. 1. IA Hughes, C Houk, SF Ahmed, PA Lee. Arch Dis Childh 2006, doi: /adc PA Lee, CP Houk, SF Ahmed, IA Hughes. Pediatrics 2006; 118:

7 Cromosoma Núcleo 46 Cromosomas: 44 autosomas 2 cromosomas sexuales CÉLULA A DNA C T G

8 DNA Transcripción NÚCLEO premrna Procesamiento mrna Traducción Proteína CITOPLASMA CÉLULA

9 proteína aminoácidos

10 2ª LETRA 1ª LETRA 3ª LETRA

11 PACIENTE 46,XY ADS CARIOTIPO 46, XY GONADAS = Testes CULTIVO DE FIBROBLASTOS A PARTIR DE BIOPSIA DE PIEL GENITAL SUERO PARA ESTUDIO HORMONAL Actividad 5α reductasa Estudio del receptor de andrógenos GEN AR Déficit 17β HSD3 Receptor de andrógenos Déficit de 5α reductasa GEN HSD17B3 GEN SRD5A2

12 Nº pacientes índice con cariotipo 46,XY ADS = Genitales femeninos 67 Genitales ambiguos En 40 (89%) mutaciones en gen AR En 1 En 4 (2,2%) (8,8%)?? mutación en gen CYP17A1 En 10 (15%) mutación en gen AR Gen AR = 44,6 % Gen SRD5A2 = 7,1 % Gen HSD17B3 = 3,6 % Gen CYP17A1 = 0,9 % Gen LHCGR = 0,9 % Disgenesias testiculares = 3,6 % Etiología desconocida = 39,3 %?? En 8 (12%) mutaciones en gen SRD5A2 En 4 (6%) mutaciones en gen HSD17B3 En 1 (1%) mutación en gen LHCGR 40 (60%)?? 4 DT (6%) - del 9 (p23-pter) (DMRT1) -del parcial 18p -2 con S. Denys-Drash (WT1)

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14 ESTUDIOS FAMILIARES EN MUTACIONES DEL GEN AR Se ha realizado el estudio en 28 familias de 46 casos índice con mutación en el gen AR 2 familias presentan 2 mutaciones en el mismo alelo de AR. 3 mutaciones puntuales se repiten cada una en 2 familias no relacionadas.

15 ESTUDIOS FAMILIARES EN MUTACIONES DEL GEN AR En total se ha estudiado el gen AR en 74 familiares PORTADORA NO PORTADORA AFECTA 20 MADRES 20 (100%) HERMANAS 8 (32%) 9 (36%) 8 (32%) 15 TÍAS MATERNAS 5 (33%) 6(40%) 4 (27%) 6 PRIMAS HERMANAS 1 (17%) 2 (33%) 3 (50%) 3 ABUELAS 1 (33.3%) 2 (66.6%) - 4 TÍAS ABUELAS BISABUELA 1 - -

16 Pacientes con sospecha de CAIS / PAIS (sin disgenesia testicular) y sin mutaciones en AR, SRD5A2 ni HSD17B3 1) Estudios en fibroblastos de piel genital (controles normales y pacientes, con y sin mutaciones): - Caracterización bioquímica de AR y 5α-reductasa tipo 2 - Regulación diferencial de la expresión génica por andrógenos - (microarrays de RNAs de alta y de baja densidad) - (microarrays de proteínas) 2) Búsqueda de mutaciones en regiones no codificantes del gen AR - (promotor, intrones) 3) Búsqueda de otros genes candidatos - (coactivadores, corepresores)

17 Servicio de Pediatría y Cátedra de Pediatría de la UAB Unidad de Endocrinología y Adolescencia. Coord: A. Carrascosa Laboratorio Investigación Endocrinología Pediátrica Coordinadora: L. Audí

18 Hospital Vall d Hebron - Barcelona Laboratorio de la Unidad de Investigación Endocrinología y Nutrición Pediátricas Laura Audí Mónica Fernández-Cancio Cristina Esteban Annalisa Pérez Arroyo Pilar Andaluz Rosa Arjona Servicio de Pediatría Antonio Carrascosa Marian Albisu María Clemente Miquel Gussinyé Àngels Ulied Enric Vicens-Calvet Diego Yeste Servicio de Ginecología y Obstetricia Isi Hernández de la Calle Servicio de Bioquímica Clínica Neus Potau Servicio de Genética Clínica Enric Sarret Servicio de Cirugía Pediátrica Carmen Piró Servicio de Anatomía Patológica Nuria Torán Servicio de Radiología Pediátrica Celestino Aso Servicio de Psiquiatría Xavier Gastaminza

19 Hospital Infantil La Paz- Madrid Hospital Germans Trias i Pujol- Badalona Hospital Virgen del Rocío- Sevilla Hospital Militar Gómez Ulla- Madrid Hospital Santa Creu i Sant Pau- Barcelona Hospital Sant Joan de Deu- Barcelona Hospital Gregorio Marañón- Madrid Hospital Son Dureta- Palma Mallorca Hospital Carlos Haya- Málaga Hospital Clínico- Valladolid Hospital Clínico de Cáceres Hospital Virgen de la Macarena- Sevilla Hospital Txagorritxu- Vitoria Hospital San Millán-San Pedro- Logroño Hospital Virgen de las Nieves- Granada Hospital Virgen de la Arrixaca- Murcia Hospital Universitario- Albacete Hospital Xeral-CIES- Vigo Hospital 12 Octubre- Madrid Hospital Infantil La Fé- Valencia Hospital General - Castellón Hospital Virgen del Camino- Pamplona Asociación GRAPSIA