RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

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1 RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi N.º de referencia: N1903 R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D Darmstadt, Alemania Teléfono: +49 (0) /Fax: +49 (0) C

2 1. Uso previsto Para el diagnóstico in vitro. El RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi es un ensayo inmunocromatográfico de flujo lateral de un solo paso para la detección cualitativa diferencial de rotavirus, adenovirus y norovirus de los genogrupos I y II en muestras de heces humanas. 2. Resumen y descripción del ensayo El rotavirus es un virus de ARN bicatenario que pertenece a la familia de Reoviridae. Se trata de un virus con una dosis infecciosa baja y su mecanismo de transmisión es por contacto directo de una persona a otra por vía fecal-oral y, con menos frecuencia, a través de agua y alimentos contaminados. El rotavirus es uno de los principales agentes etiológicos de la gastroenteritis aguda en todo el mundo y el mayor agente causal de deshidratación grave en niños de entre 6 meses y 2 años, tanto en países en vías de desarrollo, donde muestra una elevada mortalidad, como en países desarrollados. A la edad de 5 años, la mayoría de los niños (>95 %) han padecido al menos un episodio de gastroenteritis causado por rotavirus. Si bien el desarrollo de las vacunas contribuye a reducir la incidencia, solo algunos países han conseguido introducirlas en sus programas nacionales de inmunización. El rotavirus se clasifica en siete serogrupos antigénicos (A a G). Solo los grupos A, B y C infectan al ser humano, siendo el grupo A el factor causante de la mayoría de todos casos, tanto en los países desarrollados como en los países en vías de desarrollo. El adenovirus es la tercera causa principal de gastroenteritis vírica en niños (10-15%). Puede causar también enfermedades respiratorias y, en función del serotipo, diarrea, conjuntivitis y cistitis, entre otras. Se han identificado al menos 51 serotipos de adenovirus y en todos ellos está presente el antígeno hexón. Los serotipos más frecuentemente asociados a gastroenteritis son el 40 y el 41. El principal síntoma clínico de la gastroenteritis causada por adenovirus es la diarrea, que se prolonga de 9 a 12 días y va acompañada de fiebre y vómitos. El norovirus es un virus de ARN monocatenario de polaridad positiva que pertenece a la familia Caliciviridae. Es sumamente contagioso y sus principales vías de transmisión son por contacto de persona a persona y a través de agua y alimentos contaminados. El virus causa epidemias a gran escala en comunidades cerradas (hospitales, residencias de ancianos, escuelas, guarderías, restaurantes, cruceros, etc.) donde, una vez introducido, se propaga a gran velocidad. Numerosos estudios demuestran que el norovirus es la causa principal de gastroenteritis vírica a cualquier edad en todo el mundo y es responsable de casi un 50% de los brotes de gastroenteritis. El norovirus se agrupa en cinco genogrupos (GGI a GGV). La mayoría de los casos clínicos se deben a las cepas de los genogrupos I y II. En general, las infecciones por GI son menos frecuentes que las infecciones por GII. El virus se clasifica en genotipos dentro de cada genogrupo. Se han descrito hasta 19 genotipos diferentes dentro del genogrupo II. De ellos, el más frecuente es el GII.4, ya que representa cerca del 60 al 80% de los casos en todo el mundo. Le siguen el GII.6, GII.1 y GII.3. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

3 3. Principio del ensayo El RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi es un procedimiento inmunocromatográfico de un solo paso para la detección cualitativa por separado de los antígenos de rotavirus, adenovirus y norovirus del genogrupo I (GGI) y genogrupo II (GGII) en heces humanas. Una señal positiva en cualquiera de las bandas de prueba proporciona una buena indicación para el médico de la posible presencia de infección por rotavirus, adenovirus y/o norovirus, y contribuye al diagnóstico del paciente. El ensayo se basa en la captura inmunológica de micropartículas coloreadas cuando pasan a través de una membrana sobre la que se han inmovilizado los anticuerpos monoclonales específicos frente a rotavirus, adenovirus y norovirus GI y GII en cuatro bandas separadas sobre dos tiras ubicadas en un casete doble. La tira Rota-Adeno utiliza una combinación de: A. Partículas de látex azules conjugadas con un anticuerpo específico frente al antígeno hexón de adenovirus que cooperan con el anticuerpo específico de adenovirus ubicado en la membrana (banda T1). b. Partículas de látex rojas conjugadas con un anticuerpo específico frente al antígeno VP6 del rotavirus de grupo A que cooperan con un anticuerpo específico de rotavirus ubicado en la membrana (banda T2). c. Partículas de látex verdes conjugadas con un hapteno reconocido por un anticuerpo específico para dicho hapteno que se unen a la membrana formando la denominada banda de control (banda C). La tira Norovirus utiliza una combinación de: a. Partículas de látex rojas conjugadas con anticuerpos específicos frente a GGII que cooperan con anticuerpos específicos para GGII ubicados en la membrana (banda GGII). b. Partículas de látex rojas conjugadas con anticuerpos específicos frente a GGI que cooperan con anticuerpos específicos para GGI ubicados en la membrana (banda GGI). c. Partículas de látex verdes conjugadas con un hapteno reconocido por un anticuerpo específico para dicho hapteno que se unen a la membrana formando la denominada banda de control de prueba (banda C). La muestra se trata en primer lugar con un búfer de dilución de muestras (incluido en el kit) para extraer los virus de la matriz fecal. Tras la extracción, es suficiente añadir un volumen específico de sobrenadante a ambas tiras reactivas y esperar 15 minutos. Cuando la muestra extraída fluye a través de la membrana de prueba de ambas tiras, las partículas coloreadas se desplazan. En el caso de una muestra positiva, los anticuerpos específicos presentes en la membrana correspondiente capturan las partículas coloreadas. Aparecerán líneas de diferentes colores en función del tipo de virus que contenga la muestra. Estas líneas se utilizan para interpretar el resultado tras 15 minutos de incubación a temperatura ambiente. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

4 4. Reactivos suministrados El envase contiene reactivos suficientes para 20 determinaciones. Cassette 20 det. 20 casetes de ensayo envasados individualmente. Tube 20 x 1,5 ml Tubos con búfer de dilución de muestras, listos para su uso; contiene 0,1 % de azida de sodio. Pipet 20 unidades Bolsa con 20 pipetas desechables. 5. Instrucciones de almacenamiento El envase debe almacenarse a temperaturas entre 2-30 C y puede utilizarse hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. Una vez alcanzada la fecha de caducidad, la garantía de calidad ya no es válida. Tampoco puede garantizarse la validez de los casetes cuando el envase externo individual de los casetes esté dañado. 6. Material necesario no incluido - Agitador vórtex (opcional) - Cronómetro/temporizador - Recipiente para residuos de laboratorio con solución de hipoclorito de sodio al 0,5% 7. Precauciones para los usuarios Para diagnóstico in vitro exclusivamente. Este ensayo solo debe llevarla a cabo personal de laboratorio capacitado. Deben seguirse estrictamente las directrices para el trabajo en laboratorios médicos y las instrucciones para la realización del ensayo. Los búferes de dilución de muestras contienen azida de sodio como conservante. Se debe impedir que esta sustancia entre en contacto con la piel o las membranas mucosas. No utilizar el búfer si hay indicios de contaminación o precipitado. No pipetear las muestras ni los reactivos con la boca y evitar el contacto con lesiones de la piel y mucosas. Utilizar guantes desechables para manipular las muestras y lavarse las manos al terminar el ensayo. No fumar, comer ni beber en las áreas en las que se usan las muestras o los reactivos del ensayo. Todos los reactivos y materiales que entren en contacto con muestras potencialmente infecciosas deben tratarse exactamente de la misma manera que se tratan las propias muestras con desinfectantes adecuados (por ejemplo, hipoclorito de sodio) o esterilizarse a 121 C en autoclave durante por lo menos una hora. Para más información, consultar la hoja de datos de seguridad (MSDS) en Las muestras del paciente deben tratarse como potencialmente infecciosas de acuerdo con lo establecido en las normativas de seguridad nacionales. Los RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

5 reactivos y el material usados deben desecharse de forma correcta y responsable. Se debe cumplir la normativa nacional aplicable a la hora de desecharlos. No intercambiar componentes de kits con distintos números de lote. No usar los componentes del kit una vez transcurridas las fechas de caducidad. Si el envase está roto, es posible utilizar el producto siempre y cuando ninguno de los componentes esté dañado. No usar este producto si aparece una línea de color en la zona de resultados de cualquiera de las tiras antes de comenzar el ensayo. Es sumamente importante extraer la cantidad de muestra apropiada: aproximadamente 110 mg para las muestras sólidas (una pequeña porción de aproximadamente 5 mm de diámetro). Si la muestra es semilíquida (no se puede extraer con una pipeta), extraer la cantidad suficiente para cubrir las ranuras de la varilla acoplada al tapón del vial. Por último, añadir 110 μl si la muestra es líquida (4 gotas con las pipetas no graduadas desechables que se incluyen en el kit). Estas cantidades se transfieren al búfer de dilución de muestras que se suministra en los viales incluidos en el kit. Un exceso de muestra en relación con la cantidad del búfer puede impedir que la cromatografía se realice correctamente; esto es especialmente importante en el caso de muestras sólidas, dado que no es fácil extraer la cantidad de muestra adecuada. 8. Obtención y almacenamiento de muestras La muestra fecal debe obtenerse tan pronto aparezcan los síntomas (en especial diarrea y vómitos), ya que el pico de excreción del virus en las heces tiene lugar durante los tres primeros días después de la infección. No usar muestras que se hayan recogido en medios de transporte o a las que se hayan añadido agentes conservantes (como formalina, ácido acético y formol [SAF] o alcohol polivinílico [PVA], entre otros) o medios de enriquecimiento, ya que su presencia podría interferir en el rendimiento correcto del ensayo. Para obtener los mejores resultados, analizar muestras recientes no tratadas. Si es necesario conservarlas durante un cierto tiempo, pueden refrigerarse (+2 ºC a +8 ºC) durante 1 o 2 días. Para periodos de mayor duración, deben congelarse a -20 ºC (téngase en cuenta que algunas muestras pueden perder su inmunorreactividad tras la congelación). Prestar especial atención cuando se analicen muestras hemorrágicas, puesto que suelen causar problemas de no especificidad cuando el contenido en sangre es elevado. Una indicación de la inestabilidad del ensayo suele ser un cambio en el color azul de la banda de control (tiende a mostrar un color morado o azul muy oscuro). Si están congeladas, las muestras deben descongelarse por completo a temperatura ambiente antes de ser analizadas. Es necesario evitar los ciclos de congelación/descongelación de las muestras fecales, ya que podrían alterar el reconocimiento inmunológico del virus. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

6 9. Ejecución del ensayo 9.1. Información general Antes de utilizar las muestras, el vial del búfer de extracción y los casetes de ensayo deben alcanzar la temperatura ambiente (20-25 C). El envase externo de los casetes del ensayo solo debe retirarse justo antes de su utilización. Una vez utilizados, los casetes no deben usarse nuevamente. No realizar el ensayo bajo la luz solar directa. Es muy importante extraer la cantidad de muestra adecuada: aproximadamente 110 mg para muestras sólidas (una bolita de 5 mm de diámetro), 110 µl para muestras líquidas (4 gotas mediante las pipetas no graduadas desechables) o, en el caso de muestras semilíquidas (no se pueden extraer con una pipeta), la cantidad suficiente para cubrir las ranuras de la varilla acoplada al tapón del vial. Estas cantidades se transfieren cuidadosamente al vial suministrado que contiene 1 ml de búfer de dilución de muestras. Es primordial añadir el volumen correcto de la muestra extraída a las dos zonas de aplicación de la muestra en el dispositivo. Si se utiliza una cantidad inferior a la indicada, es posible que la cromatografía no pueda llevarse a cabo al no llegar muestra suficiente a las áreas de reacción. Por el contrario, un exceso de muestra en relación con la cantidad del búfer añadida puede impedir que la cromatografía se realice correctamente; esto es especialmente importante en el caso de muestras sólidas, dado que no es fácil extraer la cantidad de muestra adecuada. No usar muestras que se hayan recogido en medios de transporte o a las que se hayan añadido agentes conservantes (tales como formalina, alcohol polivinílico [PVA] o ácido acético y formol [SAF], entre otros) o medios de enriquecimiento, ya que su presencia podría interferir en el rendimiento correcto del ensayo. Prestar especial atención cuando se analicen muestras hemorrágicas, dado que suelen causar reacciones no específicas cuando el contenido en sangre es elevado. Una indicación de la inestabilidad del ensayo suele ser un cambio en el color azul de la banda de control (tiende a mostrar un color morado o azul muy oscuro). Es necesario evitar los ciclos de congelación/descongelación de las muestras fecales, ya que podrían alterar el reconocimiento inmunológico del virus Preparación de las muestras Desenroscar el tapón del vial del búfer de extracción con precaución a fin de no derramar el búfer. En el caso de heces sólidas o semisólidas, extraer una porción de aproximadamente 110 mg (una bolita de unos 5 mm de diámetro) de la muestra con el aplicador de al menos tres sitios diferentes, de modo que la muestra extraída sea lo más representativa posible. Introducir el aplicador con la muestra en el vial. Enroscar bien el tapón y agitar vigorosamente para conseguir una mezcla homogénea. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

7 En el caso de heces líquidas o semilíquidas, extraer 110 µl de la muestra como mínimo con las pipetas no graduadas desechables y dispensar 4 gotas en el vial del búfer de extracción. Enroscar bien el tapón y agitar vigorosamente para conseguir una mezcla homogénea Ensayo de la muestra Retirar el casete de ensayo de la bolsa de aluminio y colocarlo sobre una base plana. Eliminar la bolsa vacía y la bolsita antihumedad, ya que su único objetivo es proteger el ensayo contra la humedad. Romper la boquilla del tapón del vial del búfer de extracción. Añadir 4 gotas en cada una de las dos zonas de aplicación de la muestra del casete (ventanas marcadas con una flecha). Asegurarse de que el líquido fluya a través de la membrana sin dificultad. Cualquier partícula que haya caído al mismo tiempo puede causar una obstrucción y debe retirarse previamente. Esperar 15 minutos antes de leer e interpretar los resultados. 10. Control de calidad, información sobre caducidad de reactivos El ensayo debe evaluarse únicamente si el casete de ensayo está intacto antes de añadir la suspensión de la muestra y si no se aprecia ningún cambio de color o bandas en las membranas. Además, como mínimo, la banda de control verde (tira Rota/Adeno) y la banda de control verde (tira Noro) deben resultar visibles una vez transcurrido el tiempo de incubación del ensayo. Si no es así, deben comprobarse los siguientes puntos antes de repetir el ensayo: - La fecha de caducidad de los casetes de ensayo y los viales del búfer de extracción utilizados - La realización correcta del ensayo - La contaminación del búfer de extracción Si, tras efectuar esta comprobación, la banda de control sigue sin aparecer después de repetir el ensayo con un nuevo casete de ensayo, ponerse en contacto con el fabricante o el distribuidor local de R-Biopharm. 11. Evaluación e interpretación Las seis imágenes que aparecen en la Fig. 1 ilustran algunos de los diferentes resultados que pueden obtenerse con este producto. En cada tira pueden aparecer diferentes bandas de color, delimitadas por líneas horizontales negras que se imprimen en ambos lados del casete. Las bandas de control verde deben aparecer siempre en ambas tiras. La presencia adicional de otra banda o bandas indica la existencia de adenovirus y/o rotavirus y/o norovirus. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

8 Resultados negativos (casete 1) Solo hay una línea VERDE horizontal en ambas tiras junto a la letra "C" que se marca en ambos lados del dispositivo. Se trata de las bandas de control, que deberían aparecer siempre como indicación de que la cromatografía se ha realizado sin problemas en ambas tiras. Fig. 1: Patrones de posibles resultados R/A Adeno + Rota + R/A R/A No válido Noro Noro Noro Noro GG2 + Noro GG1 + Resultados positivos (casetes 2-5) Tira Rota-Adeno: - Banda azul inferior (T1): indica la presencia de adenovirus en la muestra. - Banda roja superior (T2): indica la presencia de rotavirus en la muestra. - Banda verde (C): esta es la banda de control e indica que el ensayo se ha realizado correctamente. Tira Norovirus: - Banda roja inferior (GG2): indica la presencia de norovirus del genogrupo II en la muestra. - Banda roja superior (GG1): indica la presencia de norovirus del genogrupo I en la muestra. - Banda verde (C): esta es la banda de control e indica que el ensayo se ha realizado correctamente. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

9 Resultados no válidos (casete 6) Los resultados del ensayo deben evaluarse como resultados no válidos en los siguientes casos: 1. La banda de control no aparece o el color de la banda no es verde y es completamente diferente al de la banda verde prevista. 2. Las bandas de prueba no aparecen con el color esperado de una banda roja o azul (adenovirus), sino una coloración completamente diferente a la de la banda roja prevista. 3. Asimismo, no se debe conceder ningún valor diagnóstico a los cambios producidos en el color de la banda que aparecen únicamente tras el tiempo de lectura de 15 minutos y no deben utilizarse para evaluación. Posibles motivos para los resultados no válidos: - uno o más de los reactivos se ha deteriorado o su vida útil ha caducado - la muestra no se preparó según las instrucciones de uso - la muestra tiene un elevado contenido en sangre Si se obtiene un resultado no válido, se recomienda repetir el ensayo utilizando un nuevo casete y cumpliendo estrictamente las instrucciones de uso descritas. En caso de muestras con un contenido en sangre elevado, es aconsejable utilizar una técnica alternativa, ya que la inestabilidad probablemente provocada no depende esencialmente de la tira reactiva, sino más bien de la complejidad de la matriz de la muestra en sí. 12. Limitación del método El ensayo RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi se utiliza para la identificación diferencial de rotavirus, adenovirus y norovirus GI y GII mediante la detección de su presencia en la muestra fecal facilitada, siempre que la carga vírica sea equivalente o superior al límite de detección del producto para cada analito. Este producto se utiliza para detección cualitativa y no cuantitativa, si bien la intensidad de las bandas positivas está relacionada con la cantidad de virus detectable en la muestra fecal. Este ensayo no puede utilizarse para establecer relación entre la intensidad de las bandas específicas visibles y la aparición o la gravedad de los síntomas clínicos. Los resultados obtenidos deben interpretarse siempre en combinación con el cuadro clínico. Un resultado positivo no permite descartar la presencia de otro patógeno infeccioso. En cualquier caso, las coinfecciones solo pueden determinarse mediante un diagnóstico diferencial. Un resultado negativo no descarta necesariamente la existencia de infección por rotavirus, adenovirus o norovirus. Esto se puede deber a una excreción intermitente de patógenos, a que la cantidad de antígenos presentes en la muestra es demasiado pequeña (obtención de la muestra durante un estadio de la enfermedad inadecuado, cuando la cantidad de virus que se RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

10 elimina en las heces es muy pequeña) o a una conservación o un transporte inadecuados de la muestra. Si hay sospecha de que el paciente está infectado por los patógenos que se están buscando, debe analizarse otra muestra fecal. El exceso de muestra fecal puede provocar la aparición de bandas de color parduzco, en lugar de las bandas coloreadas específicas. Las bandas de color parduzco no tienen ningún valor diagnóstico. En dichos casos, será necesario repetir el ensayo con una cantidad más pequeña de heces o diluir más la suspensión ya preparada para determinar si los patógenos que se están buscando están en la muestra, pero están enmascarados por el exceso de matriz fecal. El ensayo Rota-Adeno-Noro no se ha validado con todos los genotipos de norovirus y, como resultado, es posible que no pueda detectar el norovirus, debido a la enorme diversidad de antígenos existentes en las cepas actuales. Se ha observado que las muestras fecales con un elevado contenido en sangre pueden interferir negativamente en el ensayo y provocar posibles reacciones no específicas en muestras que son negativas para rotavirus, adenovirus y norovirus. Esta inestabilidad del ensayo suele verse acompañada de una alteración en el color de las bandas de control y de prueba. El ensayo puede conducir a resultados positivos en heces de pacientes a los que se ha administrado la solución oral de la vacuna RotaTeq hasta 15 días después de la vacunación. 13. Características de rendimiento Sensibilidad y especificidad diagnósticas El ensayo Rota-Adeno-Noro se evaluó con las siguientes muestras: - 82 muestras negativas para rotavirus y adenovirus muestras negativas para norovirus GI y GII. - 8 muestras positivas para norovirus GI muestras positivas para norovirus GII muestras positivas para rotavirus muestras positivas para adenovirus. La técnica de referencia empleada fue PCR, salvo para las muestras de adenovirus en las que se utilizó una prueba rápida disponible en el mercado. Los resultados obtenidos se indican en la siguiente tabla: Sensibilidad Especificidad Rotavirus >99,9% 98,8% Adenovirus >99,9% 97,6% Norovirus GI 87,5% 98,9% Norovirus GII 95,0% 96,6% RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

11 13.2. Precisión La precisión intraensayo del RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi se midió con diez réplicas de las tres concentraciones establecidas como CP (control positivo), CPB (control positivo bajo) y CN (control negativo) para cada analito siguiendo las normas internas, y las mediciones se realizaron en un mismo día y por una misma persona. Se obtuvo una reproducibilidad del 100% con estas tres concentraciones críticas para cada analito, lo que indica una precisión intraanálisis elevada del ensayo. La precisión interdiaria del RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi se determinó con un solo lote, midiendo la curva de sensibilidad de cada analito a lo largo de un periodo de 4 días. Se obtuvieron resultados muy reproducibles (la misma sensibilidad para rotavirus, adenovirus, norovirus GI y norovirus GII a lo largo de los cuatro días de medición). La precisión entre operadores del RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi se determinó mediante la medición de la curva de sensibilidad de cada analito por duplicado y con la participación de cinco operadores. Se observaron diferencias, pero en ningún caso superaron una dilución doble. Todas las diferencias observadas en las distintas secciones de precisión son aceptables para una técnica inmunocromatográfica cualitativa con su variabilidad inherente Reactividad cruzada Los microorganismos enumerados a continuación no interfieren en los resultados. Bacterias: Aeromonas baumanii, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae, Bacillus spp., Burkholderia cepacia, Campylobacter coli, Campylobacter jejuni, Citrobacter freundii, Clostridium perfringens, Clostridium difficile, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Escherichia coli O111, Escherichia coli O127, Escherichia coli O26, Escherichia coli O55, Escherichia coli O157:H7, Hafnia alvei, Helicobacter pylori, Klebsiella pneumoniae, Lactobacillus casei BL23, Lactococcus lactis MC1363, Listeria monocitogenes, Morganella morganii, Plesiomonas shigelloides, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Proteus penneri, Providencia stuartii, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas stutzeri, Salmonella cholerasuis, Salmonella entérica serogrupo B, Salmonella entérica serogrupo D, Salmonella typhi, Serratia marcescens, Shigella flexnerii, Shigella sonneii, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus viridans, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica. Virus: Astrovirus, adenovirus, enterovirus, rotavirus cepa Wa, rotavirus, sapovirus, virus Aichi. Hongos y parásitos: Blastocystis hominis, Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica, Entamoeba coli, Giardia lamblia. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

12 13.4. Sustancias interferentes Las sustancias que se indican en la tabla siguiente no interfirieron en los resultados del ensayo cuando se añadieron a muestras fecales (positivas y negativas) en la concentración especificada: Racecadotrilo 5% (p/v) Ibuprofeno 20% (p/v) Cimetidina 10% (p/v) Ácido acetilsalicílico 30% (p/v) Loperamida 5% (p/v) Edulcorante 5% (p/v) Metronidazol 10% (p/v) Ácido palmítico 40% (p/v) Omeprazol 3% (p/v) Sulfato de bario 5% (p/v) Ampicilina 15% (p/v) Mucina 5% (p/v) 13.5 Sensibilidad analítica Tira Rota-Adeno: la sensibilidad analítica suele ser de 31 ng/ml aproximadamente tanto para rotavirus como adenovirus, aunque se suelen detectar concentraciones más bajas. Tira Norovirus: el control interno utilizado para validar los lotes manufacturados es una mezcla de "partículas similares al virus" GI.1+GII.4, ya que son los genotipos más frecuentes y representativos dentro de cada genogrupo. La sensibilidad analítica de NoV GI.1 y NoV GII.4 es de 12,5 ng/ml y 1,5 ng/ml respectivamente, aunque se suelen detectar concentraciones más bajas. Es importante tener en cuenta que el límite de detección del ensayo también se analizó mediante muestras fecales auténticas. Los valores mostraron coherencia con los obtenidos a partir de las normas internas. Estos resultados demostraron la solidez del ensayo Efecto prozona o "High Dose Hook" Se analizaron concentraciones muy elevadas de los cuatro analitos detectados por el ensayo Rota-Adeno-Noro y no se observó reducción en la intensidad de las señales positivas. Estos valores de concentración (más elevados que los valores máximos que pueden encontrarse entre la población) fueron los siguientes: - Adenovirus: ng/ml, aproximadamente 1000 veces su límite de detección. - Rotavirus: ng/ml, aproximadamente 1600 veces su límite de detección. - Norovirus GI: ng/ml, aproximadamente 1200 veces su límite de detección. - Norovirus GII: 5000 ng/ml, aproximadamente 3300 veces su límite de detección. RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi

13 Bibliografía 1. F. Bon et al. Prevalence of a group A rotavirus, human calicivirus, astrovirus, and adenovirus type 40 and 41 infections among children with acute gastroenteritis in Dijon, France. Journal of Clinical Microbiology, Sept. 1999, p Bodo R. Eing et al. Evaluation of two enzyme immunoassays for detection of human rotaviruses in fecal specimens. Journal of Clinical Microbiology, Dec. 2001, p Umesh D. Parashar et al. Global illness and deaths caused by rotavirus disease in children. Emerging Infectious Diseases, vol. 9, No.5, May 2003, p Atmar RL and Estes MK. Diagnosis of non-cultivatable gastroenteritis viruses, the human caliciviruses. Clinical Microbiology Reviews, Vol: 14 (pp: 15-37). 5. Ribes Fernández JM and Buesa Gómez J. Infecciones por Norovirus. Enferm Infecc Microbiol Clin, Vol: 28 (pp: 51-55). 6. Patel MM, Hall AJ, Vinjé J and Parashar UD. Noroviruses: a comprehensive review. Journal of Clinical Virology, Vol: 44 (pp: 1-8). 7. Buesa J, Montava R, Abu-Mallouh R, Fos M, Ribes JM, Bartolomé R, Vanaclocha H, Torner N and Domínguez A. Sequential evolution of Genotype GII.4 Norovirus variants causing gastroenteritis outbreaks from 2001 to 2006 in Eastern Spain. Journal of Medical Virology, Vol: 50 (pp: ). 8. Siebenga J, Kroneman A, Vennema H, Duizer E and Koopmans M. Food-borne viruses in Europe network report: the norovirus GII b (for US named Minerva-like, for Japan Kobe034-like, for UK V6) variant now dominant in early seasonal surveillance. Eurosurveillance, Jan-Mar Vol: 13 (Issues 1-3). 9. Okame M, Akihara S, Hansman G, Hainian Y, Tran HT, GiaPhan T, Yagyu F, Okitsu S and Ushijima H. Existence of multiple Genotypes associated with acute gastroenteritis during 6- year survey of Norovirus infection in Japan. Journal of Medical Virology, Vol: 78 (pp: ). 10. Hoonmo L. Koo and Herbert L. DuPont. Noroviruses as a potential cause of protracted and lethal disease in immunocompromised patients. Clinical Infectious Disease, Vol: 49 (pp: ). RIDA QUICK Rota/Adeno/Noro Combi