PNT07BIO0002 GESTIÓN LAB CULTIVOS CELULARES. Aprobado

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2 ÍNDICE CONTROL DE REVISIONES 2 1.-OBJETO Y ALCANCE 3 CONTROL DE REVISIONES Nº Rev/Fecha Naturaleza de la revisión 00 / Creación del procedimiento PNT07BIO00006 Rev 00 Página 2 de 5

3 1.-OBJETO Y ALCANCE El objeto del presente PNT es facilitar a los usuarios el procedimiento más adecuado para conocer las normas básicas de manipulación de cultivos en esterilidad en los laboratorios de cultivos celulares, así como las normas de uso de dichos laboratorios del Servicio General de Biología de la Universidad de Sevilla. Su aplicación permitirá llevar a cabo un buen uso del equipo por parte de los usuarios del Servicio. 2.- USO del laboratorio de Cultivos y Laboratorio de BIOSEG. P2 Los usuarios deberán conocer las normas básicas de manipulación de cultivos en esterilidad. No se podrán utilizar microorganismos patógenos, ni realizar cultivos que contengan bacterias o algún tipo de hongo, en los laboratorios propios de cultivos. Ningún usuario del Servicio de Biología del CITIUS podrá utilizar las instalaciones del laboratorio de cultivos sin que se haya registrado en la hoja de usuarios del laboratorio de Cultivos Celulares para lo cual tendrá que hablar con Modesto Carballo. No entrar en la sala de cultivos si esta la luz UV encendida de la cabina. Nadie podrá usar las cabinas de flujo vertical de la sala de cultivos para otros menesteres que no sea la de manipular estérilmente algún producto. Se establecen unas normas de higiene y bioseguridad para su utilización correcta que están colocadas en la cabina. No obstante se resaltan las siguientes normas: - Antes de entrar para utilizar la sala: lavarse bien las manos PNT07BIO00006 Rev 00 Página 3 de 5

4 - Utilizar una bata limpia preferentemente que se quede dentro del laboratorio para su uso exclusivo dentro del mismo. - Cada vez que se use la sala de cultivos, ésta deberá quedar impoluta y sin rastro alguno de que por ahí ha pasado alguien. - Si se usa la cabina de flujo, debe limpiarse después con desinfectante. NO usar nunca ni lejía, ni etanol puro para limpiar la base metálica ni el cristal de la cabina pues son corrosivos y fijan las sales del medio. - En las cabinas de flujo podrá almacenarse en su interior un juego de micro pipetas y gradillas de diámetro distinto, procurando que nunca interrumpan el flujo de aire. Esta terminantemente prohibido dejar ningún frasco de desecho biológico ni dentro ni fuera, ni ningún resto del material que se ha usado. - Si se usa guantes, jamás deben tocar picaportes, ni microscopio, ni puertas de nevera ni incubadores, ni el TELEFONO. Antes de que salgan las manos de la cabina de flujo hay que quitárselos y tirarlos a la basura. Las placas, frascos y tubos se pueden manipular con las manos limpias que se suponen no contaminados. Si se trabaja bien, todo lo que este en contacto con el exterior se supone que no es peligroso, de lo contrario contaminaremos a todos además de a nosotros mismos. No obstante hay que dejar claro que ésta es una sala de nivel de bioseguridad P1, para trabajar con líneas celulares y cultivos primarios. El uso de guantes es imperativo cuando se trabaja con material humano. - La utilización de virus y vectores estará restringido. En principio tendrán permiso de entrada aquellos vectores que puedan ser utilizados en un P1 y que además hayan pasado el visto de los responsables del Servicio, dando su conformidad para trabajar en una sala de nivel P1. - La entrada de animales para obtención de cultivos primarios: bazo, timo, nódulos, hígado...etc, se hará de acuerdo con las normas de bioseguridad sacrificando a los animales en las mejores condiciones higiénicas posibles. PNT07BIO00006 Rev 00 Página 4 de 5

5 Hay que tener en cuenta que los animales de laboratorio están tan sucios (o quizá menos) o contaminados como nuestra piel, pelo, mucosas, boca y ropa que viene del ambiente externo y que ésta es una sala solo de nivel de bioseguridad P1. Ahora bien, no por ello hay que descuidar nuestra descontaminación en la medida de lo posible antes de introducirnos en la sala. - Si se usa la bomba de vacío, hay que pasar después por la goma de succión un poco de lejía al 50% diluida para que limpie y desinfecte el conducto. No dejar nunca que el depósito se quede más de ¾ lleno. Cuando se termine de trabajar en la sala, recoger todo y dejarlo limpio y encender la UV de la cabina. Dejarla actuar al menos 30 min. PNT07BIO00006 Rev 00 Página 5 de 5

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