EFECTO DEL BENZOATO DE ESTRADIOL EN LA POBLACIÓN FOLICULAR DE CABRAS NO CÍCLICAS

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1 EFECTO DEL BENZOATO DE ESTRADIOL EN LA POBLACIÓN FOLICULAR DE CABRAS NO CÍCLICAS J. Acosta, Zahilys López y Maylin Valdés Centro de Investigación para el Mejoramiento Animal de la Ganadería Tropical. Avenida 101 # 6214 e/ 62 y 100. Loma de Tierra. Cotorro. Ciudad de la Habana. Cuba. Correo electrónico. noelia@cima-minag.cu RESUMEN Durante los meses de febrero a abril 40 cabras mestizas no cíclicas fueron tratadas con dosis de 0.3 y 0.5 mg de benzoato de estradiol (im). A partir de las 12 h de aplicado el tratamiento, el celo fue detectado y treinta y seis horas después las cabras fueron sometidas a observación laparoscópica. El porcentaje de cabras en celo no mostró diferencias significativas entre las dosis y estos se presentaron entre 16 y 25 h después del tratamiento. En el grupo tratado con 0.5 mg el 73 % de las cabras mostraron el celo entre 16 y 20 h de aplicado el tratamiento, mientras que para la dosis de 0.3 mg el mayor porcentaje (50 %) se manifestó entre 21 y 25 h. El grupo tratado con 0.5 mg mostró un incremento significativo (P<0.05) en el número de folículo medianos, pequeños y total. Se concluye que ambas dosis son capaces de inducir el estro pero la dosis de 0.5 mg provocó un mayor número de cabras en celo y mayor crecimiento folicular. Palabras clave: benzoato de estradiol, folículos, anestro, cabras EFFECT OF ESTRADIOL BENZOATE ON FOLLICULAR POPULATION IN ANOESTRUS GOATS ABSTRACT From February to April 40 anoestrus crossbred goats were treated with 0.3 and 0.5 mg (im) of estradiol benzoate. Oestrus was detected 12 h after treatment and 30 h later goats were submitted to laparoscopic observation. The percentage of goat oestrus did not show significant differences between doses occurring 16 and 25 hr after treatment. In the group treated with 0.5 mg, 73 % of the goats showed oestrus between 16 and 20 hr after treatment while for those treated with 0.3 mg, the highest percentage (50 %) was observed between 21 and 25 h. The group treated with 0.5 mg showed a significant increase (P<0.05) in the number of medium, small and total follicles. It is concluded that both doses are capable of inducing oestrus, however the 0.5 mg dose provoked a higher number of oestrus and follicular growth in goats. Key words: estradiol benzoate, follicle, anoestrus, goat INTRODUCCIÓN En el trópico se observa una reducida actividad sexual de las cabras durante los meses de enero a mayo como consecuencia de la baja disponibilidad de alimentos, principalmente pastos (González-Stagnaro 1984). En Cuba, el período de anestro estacional en las hembras de las razas lecheras se enmarca entre los meses de marzo-junio, coincidente, con el fin de la época de sequía e inicio de la lluviosa, lo que hace probable que la disponibilidad de los pastos sea también un factor importante. (Pedroso et al. 1996). En la cabra se conoce que el incremento de los receptores de GnRH en la hipófisis inducido por el estradiol es esencial para que se produzca una descarga completa de gonadotropinas 91 (Sakurai et al. 1992, Adams et al. 1996). Al respecto, Caraty y Skinner (1999) demostraron en la oveja, que el hipotálamo medio basal es el primer sitio de acción de los estrógenos para estimular el pico de LH y que el área preóptica medio basal es el sitio donde los estrógenos actúan para inhibir la secreción de LH. Por otra parte, en cabras ovarioectomizadas e implantadas con estradiol se observa un incremento significativo del período prerreceptivo y receptivo (Okada et al. 1998). De igual forma en estos animales, la aplicación de implantes de estradiol provoca la aparición del estro entre 25.5 y 35 h (Kaplan y Katz 1994, Aoyama et al. 1998).

2 El objetivo de presente trabajo fue evaluar el efecto de diferentes dosis de benzoato de estradiol en la inducción del celo, sus características y la población folicular en cabras no cíclicas. MATERIALES Y MÉTODOS Durante los meses de febrero a abril 40 cabras mestizas entre 2 y 4 años de edad, fueron alimentadas con 400 g de concentrado comercial (PB. 14 %) por día, sales minerales, agua a voluntad y pasto natural durante 8 h diarias. En este período, el estro fue detectado diariamente con machos adultos para determinar el estado de actividad estral de las cabras. A inicios del mes de abril 29 cabras no habían presentado celo. En este momento se procedió a realizar extracción de sangre por punción de la vena yugular en dos ocasiones con un intervalo de 11 días para determinar la concentración de progesterona plasmática mediante la técnica de radioinmunoanálisis Una vez clasificadas las cabras como acíclicas, (valores de progesterona plasmática >2.0 nmol/l en los dos muestreos consecutivos) y con previo ayuno de 24 h las cabras fueron sometidas a una observación laparoscópica según la técnica descrita por Acosta (2001) para confirmar el estado acíclico. Se contó el número de folículos de izquierda a derecha por ambas caras de cada ovario y se clasificaron de acuerdo con su diámetro en: (grandes > 4 mm, medianos 2-3 mm y pequeños < 2 mm). Finalizada la observación, las cabras se enumeraron de mayor a menor de acuerdo con el total de folículos hallados, y se dividieron posteriormente en dos grupos, A y B el grupo A, tratado con 0.3 mg de benzoato de estradiol por vía intramuscular, y el B con 0.5 mg. A partir de las 12 h de aplicado el BE 2 el celo fue detectado con un macho adulto cada 4 h durante 5 días. Treinta y seis h después de aplicado el BE 2 las cabras fueron sometidas a observación laparoscópica para determinar el número de folículos grandes, medianos o pequeños existentes en ambos ovarios. ANÁLISIS ESTADÍSTICO Los resultados fueron analizados mediante prueba de T de Students para la comparación de medias utilizando el paquete estadístico Minitab (2000). RESULTADOS Y DISCUSIÓN El porcentaje de cabras en celo no mostró diferencias significativas entre las dosis, y solo una tratada con 0.3 mg (6.7 %) no presentó celo. (Tabla 1). La casi totalidad de los celos se presentaron entre 16 y 25 h, independientemente del tratamiento. Tabla 1. Porcentaje de cabras en celo según la dosis de benzoato de estradiol Dosis de BE mg 0.5 mg Cabras tratadas Cabras en celo (%) En el grupo tratado con 0.5 mg el 73 % de las cabras mostraron el celo entre 16 y 20 h de aplicado el BE 2, mientras que para la dosis de 0.3 mg el mayor porcentaje (50 %) se manifestó entre 21 y 25 h (Figura 1). En ambos grupos, un número reducido de cabras mostraron celo entre las 36 y 45 h después de aplicar BE 2.. En cabras, resultados similares durante la época de anestro fueron señalados por Sutherland y Lindsay (1991) y Billing y Katz (1997) quienes observaron que una dosis de 0.3 mg de benzoato de estradiol es suficiente para provocar el estro en cabras enteras 92

3 % 0.3 mg BE mg BE Horas después de aplicar BE 2 Figura 1. Distribución de los celos después de aplicar benzoato de estradiol La dosis de BE 2 aplicada no tuvo efecto significativo en la duración del estro ni en la duración del período entre el tratamiento y la aparición de éste (Tabla 2). Estos resultados difieren de Kaplan y Katz (1994) quienes, en cabras ovarioectomizadas tratadas con 0.15 mg, de BE 2 lograron inducir el estro en el 50 % de las hembras durante la época de monta y la aparición de éste a las 25.5 h con una duración de 12 h. Estas diferencias pueden estar dadas porque nosotros utilizamos cabras enteras, donde sin dudas los esteroides ováricos pueden influir en la respuesta y por esta razón es necesario incrementar la dosis de BE 2. Tabla 2. Efecto de la dosis de benzoato de estradiol en ovarios sin cuerpos lúteos en el inicio y duración del celo inducido Indicador N BE mg BE mg Tiempo al estro (h) 14 Duración del estro (h) ± ± ± ± 2.61 La población folicular antes de aplicar BE 2, en ambos grupos, no mostró diferencias significativas para los tipos de folículos (Tabla 3). La población folicular en el grupo tratado con 0.3 mg, no mostró cambios significativos después del tratamiento, aunque se observó un ligero incremento en el número de folículos medianos y pequeños. Esto sugiere, que otros factores están involucrados también en el inicio del celo, y que quizás un ligero incremento en el número de folículos es suficiente para provocar el estro. McNatty et al. (1984) platean que en ovejas en anestro la población folicular está compuesta por folículos activos e inactivos a los estrógenos, donde los activos son capaces de producir 93 niveles de estrógenos similares a los producidos durante la época de apareamiento sexual. Por otra parte, Bartlewski et al. (1998) plantearon que la ovulación puede ocurrir producto de folículos de Graff de diferentes tamaños. En nuestro experimento el grupo tratado con 0.5 mg mostró un incremento significativo (P<0.01) en el número de folículo medianos, pequeños y total después de aplicar el tratamiento lo que coincide con Meikle et al. (1998) quienes observaron que la aplicación de benzoato de estradiol a ovejas prepúberes produce un incremento en la concentración de LH entre 12 y 16 h después, y al mismo tiempo se observa un incremento en el número de folículos >2mm de diámetro.

4 Tabla 3. Variación de la población folicular antes y después de aplicar benzoato de estradiol Grupos antes de aplicar BE 2 A (0.3 mg) B (0.5 mg) Folículos G M P Total G M P Total Antes BE a ± a ± a ± a ± a ± a ± a ± a ±0.83 A. 0.3 mg (n=15) B. 0.5 mg (n=15) Después BE a ± a ± a ± a ± a ± b ± b ± b ±0.99 G. Folículos grandes, M. Folículos medianos, P. Folículos pequeños, Letras diferentes en una misma columna difieren significativamente P<0.05) CONCLUSIONES Podemos concluir que ambas dosis fueron capaces de inducir el estro pero, la dosis de 0.5 mg permitió una manifestación masiva de celos entre 16 y 20 h postratamiento, mientras, que la mayorías de las cabras tratadas con 0. 3 mg lo hizo entre 15 y 45 h. Además, la mayor dosificación incrementó el total de folículos presentes al momento del estro lo que supone un mayor efecto estrogénico. REFERENCIAS Acosta, J. Análisis de la dinámica folicular y su relación con la respuesta al tratamiento de superovulación en la oveja Pelibuey. Tesis en opción al grado académico de Master en Reproducción Animal. Centro de Investigación para el Mejoramiento Animal. Ciudad de La Habana. Cuba, Adams, B.M., Sakamurai, H., Adams, T.E. Concentrations of gonodatropin-releasing hormone (GnRH) receptor messenger ribonucleic acid in pituitary tissue of orchidectomized Sheep: Effect of estradiol and GnRH. Biology Reproduction 54: , Aoyama, M., Koga, A., Yamagishi, N., Takeuchi, Y., Mori, Y., Okumura, H. Alteration of ingestive behavior and plasma metabolites by estrogen in ovarioctomized goats. Journal of Reproduction and Development 44: , Bartlewski, P.M., Beard, A.P., Cook, S.J., Rawlings, N.C. Ovarian follicular dynamics during anoestrus in sheep. Journal Reproduction and Fertility 113: , Billings, H.J., Katz, L.S. Progesterone facilitation and inhibition of estradiol-induced sexual behavior in the female goat. Hormones and Behavior 31:47-53, Caraty, A., Skinner, D.C. Progesterone priming is essential for full expression of the positive feedback effect of estradiol in inducing the preovulatory gonadotropin-releasing hormone surge in the ewe. Endocrinology 140(1): , González-Stagnaro, C. Comportamiento reproductivo de las razas locales de rumiantes en el trópico americano. En: Reproduction des Ruminants en Zone Tropicale. Ed. Les Colloques de l INRA Nº 20, París, Kaplan D.H., Katz, L.S. Exposure to constant photoperiod alters serum prolactin concentration and behavioral response to estradiol in ovarioectomized goat Journal Animal Science 72: , McNatty, K.P., Hudson, N.L., Henderson, K.M., Lun, S., Heath, D.A., Gibb, M., Ball, K. McDiarmind, J.M., Thurley, D.C. Changes in gonadotrophin secretion and ovarian antral follicular activity in seasonally breeding sheep throughout the year. Journal Reproduction and Fertlity 70: , Meikle, A., Tasende, C., Garofalo, E.G., Forsberg, M. Priming effect of exogenous estradiol in luteinic in hormone secretion in prepubertal lambs. Animal Reproduction Science 54:75-85, Minitab User's Guide 2. Data analysis and quality 94

5 tools Relase 13 for Windows, Okada, M.Y., Takeuchi, Mori. Estradiol dependency of sexual behavior manifestation at the post-lh surge period in ovarioectomized goats. Journal of Reproduction and Development 44(1):53-58, Pedroso, R., González, Noelia, Carmenate, Caridad, Batiste, L.O. Comportamiento y eficiencia reproductiva de cabras Saanen, Nubia, Toggenburg y Alpina en cría semiintensiva y programa de inseminación artificial. Revista Cubana de Reproducción Animal 22:33-43, Sakurai, H., Adams, B.M. Adams, T.E. Pattern of Gonodatropin-releasing (GnRH)-Like stimuli sufficient to induce follicular growth and ovulation in ewes passively immunized against GnRH. Biology of Reproduction 47: , Sutherland, S.R.D., Lindsay, D.R. Ovariectomized does not require progesterone priming for oestrous behaviour. Reproduction Fertility Development, 3: , Recibido 9 de mayo de 2008 Aceptado 3 de octubre de