USO DE DESPADAC COMO ALTERNATIVA A LOS PROGRAMAS USUALES DE DESINFECCIÓN DE MÁQUINAS INCUBADORAS Marca, J., Navarrete, E. Laboratorios Calier, S.A. INTRODUCCIÓN La desinfección química constituye un factor importante en el control sanitario, hasta el punto de constituirse una práctica imprescindible si se quiere tener alguna rentabilidad. De esta forma, se justifica una pequeña inversión en un buen proceso de desinfección. Dentro de los requisitos generales que incluye el diseño e higiene en una planta de incubación están: Ubicación aislada de la planta incubadora Clasificación del huevo incubable por separado de reproductoras pesadas y ligeras. Restricción del paso a personas ajenas a la planta. Buen y seguro suministro de servicios (energía, agua, teléfono, etc). Excelente programa sanitario que incluye aislamiento, diseño, ventilación, limpieza, desinfección, comunicación y muestreo microbiológico. El huevo debe ser desinfectado, ya que por los poros de la cáscara penetran gérmenes. Durante las fases finales del proceso de incubación se presenta una etapa crítica, ya que surge un incremento en la población microbiana. Antes de que los pollitos comiencen el picaje del cascarón, es posible aplicar un desinfectante en forma líquida sobre la superficie del cascarón para reducir la contaminación bacteriana. Resulta difícil, sin embargo, reducirla una vez que los microorganismos han penetrado el cascarón y han avanzado al interior del huevo. 1
Los microorganismos que logran sobrevivir a la desinfección superficial y penetran por la cáscara, proliferan masivamente durante las últimas etapas del proceso de incubación Esto también ocurre durante y después del momento de la eclosión, debido al alto nivel de detritus orgánicos resultantes del proceso de nacimiento. Este explosivo crecimiento bacteriano se disemina en el ambiente de la incubadora a través del aire que se mueve a alta velocidad y se difunde fácilmente a todos los pollitos recién nacidos que se encuentran en la máquina. Se han utilizado diversos desinfectantes en máquinas incubadoras, muchos de los cuales afectan al proceso de incubación dando lugar a pérdidas económicas. Ante la necesidad de un desinfectante para este uso concreto que no afecte a la calidad de incubación, se realizó una prueba con el producto Despadac. Despadac es un desinfectante constituido por cloruro de didecil dimetilamonio, glutaraldehido, formaldehido y glioxal. Tiene una gran efectividad frente a bacterias, virus, hongos y formas esporuladas. Su gran espectro de acción ha llevado a su utilización en casos tan graves como los brotes de Peste Porcina Clásica en España, virus frente al cual posee una gran actividad. OBJETIVO El objetivo del estudio fue el valorar el efecto de la desinfección de las máquinas incubadoras sobre la incubación y sobre el pollito y demostrar que la desinfección con productos utilizados de forma corriente (permanganato de potasio y formalina al 40 %) producen lesiones graves que no producen otros desinfectantes alternativos como el Despadac. MATERIAL Y MÉTODOS Para realizar el estudio, la empresa incubadora dispuso de una máquina incubadora con capacidad para 14580 huevos para cada estudio. Del total de pollos nacidos, se escogieron 10 pollitos de primera. Además se 2
recogieron huevos picados no nacidos y muestras de plumón de la máquina destinada para el estudio. Dos horas antes de la transferencia de los huevos a las incubadoras, se tomaron muestras de ambiente con Agar Sangre y Agar Sabouraud dentro de la máquina, tomando muestras cada 8 horas hasta la salida de los pollitos (7 tomas de muestras). De los 10 pollos tomados como muestras, se tomaron dos grupos de 5 para cultivar individualmente saco vitelino, hígado y vesícula biliar en medio de enriquecimiento selectivo. Las muestras de plumón y de huevos (fárfara) se procesaron del mismo modo. Se tomaron muestras de tejido traqueal y de piel para realizar un estudio histopatológico. Se realizaron 4 programas de desinfección: Programa 1: Desinfección usual que se lleva a cabo en la incubadora. Dos horas antes de la transferencia de los huevos, se realiza un a explosión triple con 150 g de permanganato de potasio y 3000 cc de formalina. Inmediatamente después de realizar la transferencia se hace una explosión doble con 90 g de permanganato y 180 cc de formalina y al mismo tiempo se colocan 2 toallas sanitarias dentro de cada máquina impregnadas con 80 cc de formalina. 6 horas después de la explosión doble se realiza una explosión sencilla con 45 g de permanganato y 90 cc de formalina y 2 horas después se reemplazan las 2 toallas sanitarias por unas nuevas impregnadas con 80 cc de formalina, repitiéndose el proceso de las toallas cada 8 horas hasta el nacimiento de los pollos. Programa 2: Se introduce la mezcla de formol y desinfectante través del sistema de humidificación de las máquinas y se realiza la desinfección usual con las 3 explosiones descritas, suprimiendo las 6 toallas sanitarias impregnadas con formalina. Programa 3: se continúa con la mezcla de formalina y desinfectantes en la humedad de la incubadora pero además de las toallas sanitarias 3
también se suprimen la explosión sencilla y la doble, dejando únicamente la explosión triple. Programa 4: se suprime totalmente la desinfección usual, dejando únicamente el Despadac en el sistema de humedad de la incubadora. RESULTADOS Al analizar las placas de Petri con muestras obtenidas del ambiente, el 25 % de los cultivos de muestras ambiente fueron estériles a las 48 horas, en el 26.7 % de los aislamientos se identificó Staphylococcus epidermis coagulasa positivo y el 17.8 % correspondió a Penicillium spp, al igual que Aspergillus fumigatus y flavus. En todos los casos, el número de Unidades Formadoras de Colonias fue lo suficientemente bajo como para evitar el riesgo de infección del huevo. En cuanto a los cultivos realizados a partir de pollo (hígado, saco vitelino y vesícula biliar), pulmón y fárfara, no hubo diferencia en los aislamientos realizados a lo largo del estudio entre los diferentes programas utilizados. También se realizó un estudio de la incubabilidad del lote y el porcentaje de nacimiento para cada estudio. Los resultados mostraron que las fluctuaciones en la incubabilidad fueron independientes de las variaciones en el plan sanitario (Programa 1: 83.5 %, Programa 2: 83.5 %, Programa 3: 84.9 % y Programa 4: 80.5 %) El mayor porcentaje de huevos infértiles se dio en el Programa 1 (8.2 %), superando un 2.2 % al parámetro permitido. La mortalidad inicial se observó incrementada respecto al margen permitido en el programa 1 (4.1 %). Según Rueda (1992) (1), los cilios vibran de 12 a 14 veces por segundo con una velocidad de transporte de 0.5 cm por minuto y sería evidente, si fuera posible el movimiento del moco. En los programas 3 y 4 del estudio, el transporte ciliar mejoró y la calidad del moco fue menos densa, por lo tanto más fácil de evacuar. 4
Los estudios histopatológicos revelaron diferencias significativas entre los distintos programas de desinfección ensayados. Para valorar las lesiones se tomó como referencia una gradación elaborada por Fletcher (1980) (2): Lesiones histopatológicas básicas del sistema respiratorio de las aves. Según dicha gradación, al analizar las lesiones se obtuvieron los resultados indicados en la tabla 1. Tabla 1. Gradación de las lesiones en pollitos tras aplicar 4 programas de desinfección distintos LESIÓN Puntos Programa 1 Programa 2 Programa 3 Programa 4 Deciliación 30 25 20 15 5 Necrosis epitelial 30 20 15 10 5 Congestión 5 4 4 3 2 Edema 5 2 2 1 0.5 Infiltración linfocitos Infiltración heterófilos Necrosis lámina propia Atrofia glándulas 5 4 4 2 1 5 4 4 2 1 5 3 3 1 1 10 7 6 4 2 Vacuolización 5 4 3 1 0.5 100 73 61 39 18 5
Al observar las muestras de histopatología se llega a la conclusión de que los programas 1 y 2 del estudio son muy similares en cuanto a efecto irritante, siendo los programas 3 y 4 similares en la disminución significativa de la severidad de las lesiones. Por otro lado, el tejido glandular ya no presenta hiperplasia o hipertrofia, sino que, por el contrario, la atrofia es evidente, por lo que al observar el tejido traqueal en fresco el moco es escaso y poco denso durante los programas de mayor irritación (1 y 2). Por lo tanto, es importante conocer que los efectos irritantes que causa la desinfección en incubadoras con formalina y permanganato son de tipo crónico y su resolución es mucho más complicada que la causada por el amoníaco o el formol. En el programa 1, es importante resaltar que la deciliación fue calificada con 25 puntos sobre 30 y la necrosis epitelial con 20 puntos sobre 30, lo que indica que el pollito de 1 día ofrecido al avicultor, utilizando este sistema de desinfección en la máquina incubadora, no cumple con las normas de integridad y sanidad requeridas por él. Es imposible esperar de estos pollos una respuesta inmediata y eficiente a las injurias que se encuentran al llegar al galpón, tales como agentes infecciosos (virus, bacterias, mycoplasmas) o agentes irritantes (polvo, amoníaco, etc). La infiltración de linfocitos y heterófilos son una muestra clara de que el tejido está completamente afectado de forma crónica, recibiendo una calificación de 4 sobre 5. El programa 1 tiene una puntuación total de 73 sobre 100, lo que confirma el efecto altamente nocivo de la desinfección usual en incubadoras. Respecto al programa 2, sólo difiere en unos pocos puntos respecto al programa 1 (61 sobre 100), por lo que su efecto irritante también queda demostrado. Los programas 3 y 4 de desinfección tuvieron resultados similares, aunque la puntuación más baja se obtuvo en el programa 4 (18 sobre 100), mientras que en programa 3 la puntuación fue de 38 sobre 100. Tanto la necrosis epitelal como la deciliación fueron menores en el programa 4 que en el 3, por lo que, posiblemente, los daños citados son atribuidos a las explosiones con Permanganato de Potasio y Formalina. Las alteraciones como congestión, edema, infiltración de heterófilos y linfocitos y la necrosis de lámina propia son calificadas de forma muy similar en los programas 3 y 6
4, y si comparamos con los programas 1 y 2 el pronóstico mejora ampliamente. La atrofia glandular se calificó con 4 puntos en el programa 3 y con 2 puntos en el programa 4, este hecho permite especular que la cantidad de moco mejorará. Este resultado, unido al aumento en el número de cilios y la cantidad superior de los mismos, indica que los animales obtenidos en este último programa están más capacitados para enfrentar y responder a las injurias que se presenten en los primeros días de vida y que involucran al sistema respiratorio. El tejido tegumentario también resultó severamente afectado por la acción del permanganato y la formalina. Las lesiones observadas fueron: edema, congestión, infiltración de heterófilos, exocitosis, necrosis de la dermis, hemorragia aguda y folículo dilatado, disminuyendo en gran parte al utilizar Despadac. Al ocurrir estas alteraciones, el plumón se desprende del folículo y el animal pierde gran parte de su plumaje para así enfrentar un nuevo ambiente no controlado en el galpón. DISCUSIÓN Según los resultados analizados anteriormente, es evidente que la desinfección de las máquinas incubadoras con Formalina y Permanganato de potasio produce graves daños a nivel del epitelio traqueal y del tejido tegumentario del pollito en eclosión. Las lesiones histopatológicas observadas en el sistema respiratorio son de tipo reversible, pero mientras el tejido se recupera nuevamente, el pollito es sometido a muchas situaciones de estrés que afectarían indudablemente a este proceso, tales como el sexaje, embalaje, transporte, fluctuaciones de temperatura, agua y alimentos contaminados, ambiente cargado de patógenos e irritantes, vacunaciones a primer día de vida, etc, donde la respuesta inmune exige que el sistema respiratorio del animal se encuentre intacto. Durante la reducción paulatina de las dosis de desinfección con permanganato de potasio y formalina, se pudo observar que las lesiones 7
fueron disminuyendo en intensidad, por lo tanto se demuestra con hechos que el incubador debe reemplazar esta desinfección por otra que no cause alteraciones en los tejidos de los animales. La desinfección con Despadac ofreció los mismos resultados microbiológicos que el resto de programas de desinfección (en ningún caso el número de Unidades Formadoras de Colonias fue representativo para causar infección en los animales), pero, sin embargo, los resultados histopatológicos demuestran que el uso de Despadac lleva a una reducción significativa de las lesiones, consiguiendo que el aparato respiratorio del pollito esté en buen estado para afrontar las situaciones de stress consecuentes a su nacimiento. El uso de Despadac, además, trajo muchas ventajas, ya que la mano de obra se redujo al emplear el sistema de humidificación como puerta de entrada del desinfectante a las máquinas, disminuyendo de esta manera el riesgo de accidentes de trabajo. NOTA: Este artículo se ha basado en el trabajo de investigación llevado a cabo por la Dr. Maria Fernanda Morales Orozco Evaluación de la desinfección en máquinas incubadoras con diferentes niveles de formaldehido y formaldehido en mezcla con otros desinfectantes. 8
BIBLIOGRAPHY 1. AVICULTURA EMPRESARIAL. Fumigación por Microaerosol, una alternativa al Formaldehido. Año 1. Nº 3. P. 12-15. 2. CALVER, John. Incubation in Hatchery Practice: Her Majesty s Stationery Office. London Bulletin 148, London. 1967. P 2-73 3. CONANT, Norman. Micología, 3 de. Méjido: Interamericana. 1972 p. 527-545. 4. CHICK MASTET. Primer Serminario de Incubación. Memorias. Santafé de Bogotá, 1988. 5. DIFCO. Manual de medios de cultivo deshidratados y reactivos para microbiología. Difco Laboratories. Detroit: 10 de 1984. P 705-839. 6. FLETCHER, O. J. Pathology of the Avian Respiratory System. Poultry Science. Vol 59. Pp 2666 2679. 7. GARCÍA, IVÁN DARÍO. Control de Calidad en Salas de Incubación Avícola Colombiana. Santafé de Bogotá, 1990. 8. GARZA DE LA FUENTE, Raymundo. Manejo y Desinfección del huevo incubable: Memorias VI Congreso anual de progenitoras Arbos Acres. Méjico, 1989. 9. GOODWIN, Mark A. Comparison of Histopatology to the direct immunofluorescent Antibody test for the diagnosis of infectious laryngotracheitis in chickens. Avian Diseases. Vol 35. 1991. P 389-391. 10. HARRIS, S. et Col. Programa de Incubación Pilch In. North Carolina State University. 1993. 9
11. JAMESWAY INCUBATOR CORPORATION. MEMORIAS Seminario de Incubación. Ontario. 1990. 12. MARENCO, Eduardo. Recomendaciones para el manejo del huevo incubable. Costa Rica, 1990 13. SAN GABRIEL, Alberto. Patología de la incubación y enfermedades del polluelo. 1ª De. Barceolna. Aedos, 1980. 10