Suplementación de sustratos degradados por el cultivo de Pleurotus ostreatus para su utilización en nuevos ciclos de cultivo A. Pardo*, J. E. Pardo**, Mª. R. Picornell**, J.A. de Juan** * Centro de Investigación, Experimentación y Servicios del Champiñón (CIES), C/ Peñicas, s/n, Apartado 63. 16220 Quintanar del Rey, Cuenca, España. E-mail: apardo.cies@dipucuenca.es ** Escuela Técnica Superior de Ingenieros Agrónomos, Universidad de Castilla-La Mancha, Campus Universitario, s/n. 02070 Albacete, España. Palabras clave: setas cultivadas, sustrato post-cultivo, valorización, parámetros de producción Resumen En el presente trabajo se describe el estudio de la viabilidad de cultivar comercialmente Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm., segundo hongo en importancia cultivado en España, utilizando para ello sustratos selectivos basados en la reutilización de sustratos post-cultivo del mismo hongo, utilizando como aditivos dos suplementos nutritivos comerciales a dos dosis diferentes. Para ello, tras la caracterización química y biológica de los sustratos, se han evaluado los parámetros de producción cualitativos y cuantitativos en un nuevo ciclo de cultivo. El mejor comportamiento agronómico se observó con los sustratos suplementados con Calprozime, a dosis de 20 y 10 g.kg -1, proporcionando altos valores de eficiencia biológica (41,8 y 35,0 g por 100 kg de sustrato, respectivamente), no resultando significativamente diferentes del sustrato comercial utilizado como control en la mayoría de parámetros considerados. Esta aplicación constituye una alternativa a considerar en la producción comercial para reemplazar parcialmente a los sustratos orgánicos empleados habitualmente para este fin, con la doble ventaja de disminuir los costes de elaboración y el impacto ambiental. INTRODUCCIÓN Castilla-La Mancha y La Rioja son las principales regiones españolas en cuanto a la producción de champiñón y setas, llegando a generar más de 500.000 t anuales de sustratos post-cultivo. Entre los posibles usos que pueden tener los sustratos degradados por el cultivo de hongos encontramos referencias, recopiladas por Rinker (2002), a su empleo en biorremediación (purificación de aire, agua, suelos y sustratos contaminados con plaguicidas), utilización en otros cultivos (flores y hortalizas en invernadero, frutas y hortalizas en campo, y otros), enmienda general de suelos, semilleros y paisajismo, alimentación animal y acuicultura, control de plagas y enfermedades y usos diversos (combustible, vermicultura, otros), considerando también su reutilización en el cultivo de hongos, como material de cobertura para Agaricus spp. y como sustrato para el cultivo de otras especies. Sobre este último aspecto existen referencias acerca de la utilización de diferentes sustratos post-cultivo en la producción de distintas especies de hongos comestibles, entre otras, de los géneros Agaricus, Auricularia, Lentinula, Pleurotus y Volvariella (Pardo, 2008). El principal objetivo de este trabajo consiste en evaluar la viabilidad de cultivar comercialmente Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm., utilizando, para ello, sustratos 670
previamente degradados en cultivos anteriores del mismo hongo, a los que añadieron dos suplementos nutritivos comerciales en diferentes dosis. MATERIAL Y MÉTODOS La caracterización química de los materiales utilizados (Tabla 1) se llevó a cabo según la metodología descrita en Pardo et al. (2008). Como material de base para el cultivo se utilizó un sustrato degradado previamente en un ciclo de cultivo de P. ostreatus, obtenido inicialmente a partir de paja de trigo, al que se añadió sulfato cálcico (50 g.kg -1 ). El sustrato degradado fue mezclado y humectado, tras lo cual se sometió a un tratamiento térmico de pasteurización (60-65ºC, 8 h) y progresivo descenso en 15 h a temperatura de siembra (25ºC). Finalizado el tratamiento, se añadieron suplementos nutritivos comerciales (Calprozyme -CPZ- y Promycel 600 PRO-) a dosis de 10 y 20 g.kg -1, obteniéndose finalmente cinco sustratos a evaluar: material no suplementado (SAP) y material suplementado con 2 aditivos cada uno de ellos (SAP + CPZ, 1%; SAP + CPZ, 2%; SAP + PRO, 1%; SAP + PRO, 2%). Como testigo, se empleó un sustrato comercial (SCOM). Los diferentes sustratos fueron posteriormente inoculados utilizando una dosis de siembra de 30 g.kg -1, empleando micelio comercial Fungisem K-15. Para el cultivo, se emplearon sacos perforados transparentes de polietileno, con capacidad para 6 kg de sustrato, a los que se practicaron 4 orificios, de 22 mm de diámetro, distribuidos uniformemente en la superficie lateral de cada saco. Se utilizó un diseño de bloques al azar con seis repeticiones. En total, se utilizaron 36 sacos, de 6 kg de sustrato cada uno. El desarrollo del ciclo de cultivo tuvo lugar en un túnel invernadero experimental en condiciones climáticas controladas y dentro de los rangos recomendados para la cepa de micelio comercial objeto de estudio. La incubación de los sustratos se desarrolló entre 24 y 27ºC durante 17 días, sin ventilación exterior ni iluminación, tras los cuales se procedió a la inducción de la fructificación mediante ventilación, reducción de la temperatura y humedad relativa e iluminación. La duración total del ciclo de cultivo fue de 70 días. La recolección de las piñas de setas (grupo de carpóforos que fructifican simultáneamente desde el mismo orificio practicado en el saco de sustrato) se realizó diariamente en el estado óptimo comercial de desarrollo. Los parámetros de producción considerados fueron los siguientes: precocidad (tiempo, en días, transcurrido desde la siembra hasta la cosecha de la primera florada), grado de fructificación (cociente entre el número de piñas producidas y el número de orificios practicados a los sacos), eficiencia biológica (relación entre el rendimiento de setas producidas y la cantidad de sustrato utilizado), peso unitario, materia seca, proteína y cenizas. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En la tabla 2 se presentan los resultados obtenidos para los principales parámetros de producción considerados. Entre los aspectos más destacables se observó como el sustrato SAP, no suplementado, mostró dificultades de germinación, detectándose un alto grado de contaminación por Gliocladium spp., que puede asociarse al bajo valor del ph del sustrato, y que trajo como consecuencia la dificultad para el desarrollo del micelio y la ausencia de producción. La precocidad del sustrato comercial (SCOM) (36,7 días) fue mejorada significativamente por los sustratos SAP + CPZ al 1% (25,4 días) y al 2% (22,5 días). En lo referente a la eficiencia biológica, se encontraron diferencias significativas entre el sustrato comercial (SCOM) (46,2 kg 100kg -1 ) y los sustratos suplementados con Promycel 600 al 1% (17,6 kg 100 kg -1 ) y al 2% (16,3 kg.100kg -1 ), con valores 671
comercialmente aceptables para los sustratos suplementados con Calprozyme al 1% (35,0 kg 100kg -1 ) y al 2% (41,8 kg 100kg -1 ). Con respecto al grado de fructificación no se encontraron diferencias significativas entre sustratos. Las setas obtenidas con los sustratos suplementados presentan, en general, mayor contenido en materia seca (entre 10,00 y 10,96 g kg -1 ) que el comercial (9,29 g.kg -1 ), y también mayor contenido en proteína. Sobre este último parámetro destaca el alto contenido en proteína proporcionado por el sustrato SAP + PRO al 2% (28,06 g.kg -1 ), cuyos carpóforos presentaron también el mayor contenido en cenizas (7,27 g.kg -1 ). Debido a la presencia de hongos competidores, el material no suplementado (SAP) no ha resultado útil como sustrato en el cultivo de Pleurotus; en cambio, cuando se le añade el suplemento nutritivo comercial Calprozyme, se mejora notablemente el comportamiento agronómico, no resultando significativamente diferente del sustrato comercial utilizado como control en la mayoría de parámetros. Los mejores resultados se han obtenido a partir del sustrato suplementado con Calprozyme, especialmente a dosis de 20 g kg -1, que proporcionó altos valores de eficiencia biológica, con una cosecha más temprana y produciendo setas con alto contenido en materia seca aunque de pequeño tamaño. En contraposición al comportamiento del Calprozyme, la suplementación con Promycel 600 pierde potencial de utilización en base a los bajos valores de eficiencia biológica obtenidos. Agradecimientos El presente trabajo se enmarca dentro del proyecto RTA2006-00013-00-00 cofinanciado por el INIA y FEDER. Referencias Pardo, A. 2008. Reutilización del sustrato agotado en la producción de hongos comestibles cultivados. ITEA Producción Vegetal 104(3): 360-368. Pardo, A., Perona, M.A. y Pardo, J. 2008. Utilización de fibra de kenaf (Hibiscus cannabinus L.) en la elaboración de sustratos específicos para cultivo de Pleurotus ostreatus (Jacq. ex Fr.) Kummer. Rev. Iberoam. Micol. 25(1): 57-61. Rinker, D.L. 2002. Handling and using spent mushroom substrate around the world. p. 43-60. En: J.E. Sánchez, G. Huerta y E. Montiel (eds.), Mushroom Biology and Mushroom Products. Universidad Autónoma del Estado de Morelos, Cuernavaca, México. 672
Tabla 1. Caracterización química de los materiales utilizados. MATERIAL SAP (+5% CaSO 4 ) Sustrato comercial ph (aq.1:5, p/v) Humedad (g kg -1 ) N total Cenizas Materia orgánica C/N Fibra bruta Grasa bruta E.L.N. Solubles neutrodetergentes Celulosa Hemicelulosa 5,88 756 6,0 276,6 723,4 69,9 294,8 3,0 388,1 213,1 293,4 157,8 59,1 8,15 672 9,6 143,0 857,0 51,8 426,2 5,1 365,7 124,0 375,8 264,0 93,2 Calprozyme 9,46 109 63,8 118,4 881,6 8,0 153,6 16,3 313,0 497,0 85,3 216,5 82,8 Promycel 600 6,11 121 55,9 55,9 944,1 9,8 63,0 31,0 500,7 727,1 38,7 161,6 16,7 SAP: sustrato agotado de Pleurotus Lignina 673
Tabla 2. Resultados de los parámetros de producción para cada tipo de sustrato evaluado Eficiencia Peso Materia Precocidad biológica Nº piñas/ Proteína Cenizas Sustrato (días) (g 100kg -1 unitario seca orificio (g) (g kg -1 (g kg -1 ) (g kg -1 ) ) sustrato) SAP -- -- -- -- -- -- -- SAP+CPZ (1%) 25,4 bc 35,0 ab 0,56 17,0 ab 10,00 ab 21,85 b 6,21 ab SAP+CPZ (2%) 22,5 c 41,8 a 1,00 10,4 b 10,96 a 22,36 ab 5,91 b SAP+PRO (1%) 32,0 ab 17,6 b 0,44 10,6 b 10,75 a 25,59 ab 6,49 ab SAP+PRO (2%) 31,6 ab 16,3 b 0,63 11,8 b 10,16 ab 28,06 a 7,27 a COMERCIAL 36,7 a 46,2 a 1,00 26,5 a 9,29 b 20,70 b 6,67 ab Media 29,5 26,2 0,60 15,5 10,20 23,48 6,47 En la misma columna, valores seguidos de distinta letra son significativamente diferentes entre sí (p 0,05, test de Tukey) SAP: sustrato agotado de Pleurotus; CPZ: Calprozyme ; PRO: Promycel 600 674