IV Congreso de la Red Nacional de Biobancos. Madrid, 18-19 Octubre. IMPLEMENTACIÓN DE UN NUEVO PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO PARA INVESTIGACIÓN Egia A. 1, Ugalde A. 2, Fernandez S. 2, Castillo M. 3, Castro E. 1, Del Villar A. 1, Cordon-Cardo C. 3, Bilbao R. 1 1 Biobanco Vasco para la Investigación, 2 Hospital Universitario Basurto, Bilbao, 3 Mont Sinai Hospital, New York
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN Sangre, orina. Tejido parafinado, en OCT
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN Sangre, orina. Tejido parafinado, en OCT Tejido Fresco Proteómica Transcriptómica Metabolómica
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO 1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES.
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO Pieza quirúrgica de colon que presenta adenocarcinoma. Pieza quirúrgica de una próstata con adenocarcinoma.
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO 1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES. 2. Tiempo de isquemia (caliente y fría) transcurrido por la cirugía Robótica (Da Vinci)
PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO 1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES. 2. Tiempo de isquemia (caliente y fría) transcurrido por la cirugía Robótica (Da Vinci) 3. Manipulación de la muestra: Tinta china y Ac. Acético.
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO Redirigir el uso del PUNCH DERMATOLÓGICO 4 mm
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO 1 2 Medir la próstata Marcar con tinta 3 4 Fijar la tinta con Acético Corte sagital
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO 5 6 Punch de un lóbulo Aislar punch 7 8 Corte longitudinal del punch Primera mitad, bloque de Parafina
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO 9 10 Marcaje con Eosina en zona de punch Mitad de tejido en fresco para Biobanco 11 12 Congelación rápida Almacenaje a -80ºC
PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO EN FRESCO Adenocarcinoma de próstata. 4 X Adenocarcinoma de próstata. 20X Tejido prostático benigno. 4 X, Tejido prostático benigno. 20X
CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA) Muestras contaminadas con tinta china y acético durante la manipulación de la pieza. Gradiente de contaminación de izq (menos) a drcha (más). Primera separación de fases. Sin restos de tinta en la fase acuosa.
CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA) > Muestras contaminadas con tinta china y acético durante la manipulación de la pieza. Gradiente de contaminación de izq (menos) a drcha (más). > Primera separación de fases. Sin restos de tinta en la fase acuosa. RIN 6.4 6.9 7.5 6.3 8.4 7.6 28s 18s Gel del RNA obtenido de las muestras. Electroferogramas obtenidos de las muestras.
CONCLUSIÓN Ventajas adquiridas con el protocolo: Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza. Mayor % de muestra neoplásica obtenida. Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco. Se preserva la calidad del RNA de las muestras.
CONCLUSIÓN Ventajas adquiridas con el protocolo: Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza. Mayor % de muestra neoplásica obtenida. Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco. Se preserva la calidad del RNA de las muestras. Protocolo aplicable a otros tejidos con difícil visualización macroscópica de la zona tumoral.
AGRADECIMIENTOS Servicio de Urología del Hospital Universitario de Basurto (HUB) Servicio de Anatomía Patológica del HUB Jon Diez Beldarrain (Reportaje fotográfico del protocolo)
Muchas Gracias! Eskerrik asko! Ainara Egia 944 00 64 26 bancodetejidos.hbasurto@osakidetza.net