208 Rev Biomed 1995; 6:208-215. Efecto del parto sobre la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de Eimeria en cabras criollas. Juan F. Torres-Acosta 1, Roger I. Rodríguez-Vivas 2, Ramón Cámara-Sarmiento 1. 1 Departamento de Producción Animal. Area de Pequeños Rumiantes, 2 Departamento de Parasitología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma de Yucatán. Mérida, Yucatán, México. RESUMEN. Introducción. El incremento peripartal de la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de protozoarios en las hembras, es un fenómeno que está asociado con la relajación peripartal de la inmunidad. Su importancia radica en que favorece la infestación de las fuentes de alimento con nemátodos y protozoarios, lo que permite que los animales inmunológicamente susceptibles ingieran grandes cantidades de parásitos. Este fenómeno es bien conocido en ovinos y bovinos pero ha sido escasamente descrito en caprinos. Objetivo. Conocer el efecto del parto sobre la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de Eimeria en cabras criollas bajo condiciones de clima tropical. Material y métodos. 28 cabras criollas adultas fueron distribuidas en 2 grupos: A) 14 cabras en el último mes de gestación y B) 14 cabras no gestantes. Ambos grupos fueron desparasitados dos semanas antes del parto del grupo A (Levamisol subcutáneo, 6 mg/kg PV). Cada semana se tomaron muestras de heces fecales mediante el siguiente esquema: a) cuatro semanas preparto del grupo A, b) al momento del parto y c) 9 semanas postparto. Las muestras fueron analizadas mediante la técnica de McMaster modificada. Las muestras positivas a nemátodos del orden strongylida fueron transferidas a coprocultivos (técnica de Corticelli-Lai). Se realizaron cultivos de ooquistes en dicromato de potasio para la identificación de las especies de Eimeria en Solicitud de sobretiros: Juan F. Torres-Acosta. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma de Yucatán. Km 15.5 Carretera Mérida-Xmatkuil. AP. 116. Mérida, Yucatán, México. Recibido el 28/Junio/1995. Aceptado para publicación el 28/Sep./1995. Vol. 6/No. 4/Octubre-Diciembre, 1995.
209 JF Torres-Acosta, RI Rodríguez-Vivas, R Cámara-Sarmiento. las muestras de ambos grupos. Resultados. La eliminación de huevecillos del orden strongylida de los grupos A y B fue semejante durante el preparto y permaneció así hasta la semana 3 postparto. A partir de la semana 4 postparto se observó un incremento en la eliminación del grupo A superior al del grupo B (p<0.05) permaneciendo así hasta la semana 6. No existió diferencia significativa en la eliminación de huevecillos de Strongyloides sp y Trichuris sp y ooquistes de Eimeria entre los grupos A y B. Los géneros del orden strongylida más frecuentes fueron: Haemonchus sp y Ostertagia sp. Las especies de Eimeria más frecuentes fueron: E. ninakholyakimovae y E. allijevi. Conclusión. Se concluye que en el postparto existe un aumento en la excresión de huevecillos de nemátodos del orden strongylida en cabras criollas. Sin embargo, no se encontró efecto del parto sobre la eliminación de ooquistes de Eimeria. Palabras claves: periparto, cabra, Haemonchus, Eimeria. SUMMARY. THE EFFECT OF PARTURITION ON NEMATODE EGG OUTPUT AND OOCYST OUTPUT OF CRIOLLO GOATS. Introduction. Periparturient rise of parasitic nematode egg production and protozoa oocysts is a phenomena associated with the periparturient relaxation of immunity. It is important because it favours the infestation of feedstuffs with nematodes and protozoa. This allows the ingestion of large amounts of parasites in a period when the animals are immunologically susceptible. This phenomena is well known in Revista Biomédica sheep and cattle but it has been rarely described in goats. Objective. To determine the effect of parturition on the parasitic nematode egg output and Eimeria oocyst output of criollo goats under tropical conditions. Material and methods. 28 adult criollo goats were divided in two groups: A) 14 goats in the last month of gestation and, B) 14 non-pregnant goats. Both groups were drenched 2 weeks before the parturition of the animals in group A (Levamizol subcutaneus, 6mg/Kg BW). Faecal samples were taken every week as follows: a) 4 weeks before the parturition of group A (Prepartum), b) At parturition, and c) 9 weeks postpartum. Faecal samples were processed by the modified McMaster technique. Samples positive to nematodes of the strongylida order were transfered to coproculture (Corticelli-Lai technique). Identification of Eimeria species in all samples was done through oocyst culture in potasium dicromate. Results. During the prepartum period, nematode egg counts of the strongylida order were similar in both groups. This similarity was maintained up until the third week postpartum. From week four there was an increase in the egg count in group A compared to that of group B (p<0.05). The same trend remained until week six postpartum. There was no significant difference in the egg output of Strongiloides sp and Trichuris sp, and of Eimeria oocysts between groups A and B. The most frequent nematode genus of the strongylida order were Haemonchus sp and Ostertagia sp. The most frequent Eimeria species were E. Ninakholyakimovae and E. allijevi. Conclusion. It is concluded that after parturition there is a rise in nematode egg output (strongylida order) in criollo goats. However, parturition has no effect on the output of Eimeria oocysts. Key words: peripartum, goat, Haemonchus, Eimeria.
210 Eimeria en cabras criollas. INTRODUCCION. El incremento de la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de protozoarios en las hembras al momento del parto y durante la lactación es conocido como "Alza peripartal" o "Spring rise" (1). Este es un fenómeno asociado con la relajación peripartal de la inmunidad (RPI)(1,2). LLoyd y col. (3) mencionan que durante la gestación y lactación existe una inmunosupresión de células T dependientes, disminuyendo la resistencia de los animales a helmintos, protozoarios, virus y bacterias. Armour (4) relaciona esta disminución de la inmunidad a los niveles circulantes de prolactina, que posee un efecto depresor sobre el sistema inmunitario del hospedero. Sin embargo, existe una corriente que contradice esta hipótesis relacionando el efecto inmunodepresor a los cambios en los niveles de anticuerpos IgA antiparasitarios a nivel del abomaso (5). La importancia epidemiológica del incremento de la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de Eimeria radica en que favorece la infestación de los pastos con nemátodos y contaminación de fuentes de alimento y agua con protozoarios, lo que permite que los animales inmunológicamente susceptibles ingieran grandes cantidades de parásitos (6). El aumento en la eliminación de huevecillos y ooquistes es un fenómeno bien conocido en ovinos (6,7) y bovinos (8) aunque escasamente descrito en caprinos (1). Mucha de la información encontrada en ovinos es aplicada indiscriminadamente a los caprinos. Lo anterior pone de manifiesto la necesidad de conocer este fenómeno en caprinos, para poder tener los elementos necesarios para dictar medidas de control. El objetivo del presente trabajo fue conocer el efecto del parto sobre la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de Eimeria en cabras criollas bajo condiciones de clima tropical. MATERIAL Y METODOS. El presente estudio fue realizado en el rebaño caprino del Area de Pequeños Rumiantes de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Autónoma de Yucatán. La unidad de estudio se encuentra ubicada en una zona de clima tropical cálido subhúmedo con lluvias en verano. Animales de estudio. Se utilizaron 28 cabras criollas adultas, las cuales fueron distribuidas en 2 grupos de acuerdo a su estado fisiológico: 1) grupo A con 14 cabras en el último mes de gestación sincronizadas para parir con un máximo de 8 días de diferencia y 2) grupo B con 14 cabras vacías (no gestantes) como grupo control. Los animales fueron alimentados a base de ramoneo (8 h por día) en agostadero nativo de la región. Los animales de ambos grupos fueron desparasitados dos semanas antes del parto del grupo A, con Levamisol subcutáneo (6 mg/kg de peso vivo). La reinfestación de parásitos gastrointestinales post-tratamiento ocurrió en forma natural. Muestreos. Se tomaron muestras de heces fecales directamente del recto de las cabras mediante bolsas de polietileno (5 gramos de heces). Los muestreos de heces fueron efectuados cada semana mediante el siguiente esquema: a) cuatro semanas anteriores al parto (preparto), b) al momento del parto de los animales de grupo A (día 0) y c) 9 semanas después del parto (postparto). Análisis de muestras. Se realizaron análisis coproparasitoscópicos de las muestras de cada cabra mediante la técnica cuantitativa de McMaster modificada (9). Las muestras positivas a nemátodos gastrointestinales del orden strongylida fueron transferidas a coprocultivos mediante la técnica de Corticelli-Lai (9) para la identificación de los géneros presentes en los animales de ambos grupos. Además se realizaron cultivos de ooquistes para la identificación de las especies de Eimeria en dicromato de potasio al 2.5% (9) en las muestras de los animales de ambos grupos. Análisis estadístico. Se compararon los datos de eliminación de huevecillos de los diferentes tipos de Vol. 6/No. 4/Octubre-Diciembre, 1995.
211 JF Torres-Acosta, RI Rodríguez-Vivas, R Cámara-Sarmiento. nemátodos y ooquistes de Eimeria entre los grupos A y B, utilizando la prueba de suma de rangos de Wilcoxon (10). Debido a que los datos de ooquistes de Eimeria no tenían una distribución normal, se utilizaron las medianas para hacer el análisis estadístico. RESULTADOS. En la figura 1 se observa la dinámica de eliminación de huevecillos del orden strongylida en los grupos A y B. Se observa que la carga parasitaria del grupo A tuvo un comportamiento semejante al del grupo B en el preparto, permaneciendo así hasta la semana 3 postparto (p>0.05). A partir de la semana 4 se observó un incremento en la eliminación de huevecillos de las cabras del grupo A. En este momento la cantidad de huevecillos eliminada por el grupo A es significativamente mayor que la del grupo B (p<0.05). Esta diferencia permaneció así hasta la semana 6. A partir de la semana 7 la carga parasitaria para ambos grupos fue similar (p> 0.05). Figura 1.- Dinámica de la eliminación de huevecillos del orden strongylida en cabras criollas gestantes-lactantes (grupo A) y vacías (grupo B) antes y después del parto del grupo A. Revista Biomédica La eliminación de huevecillos de Strongiloides sp y Trichuris sp fueron bajas (menores de 50 huevecillos por gramo de heces) y no existió diferencia significativa (p<0.05) entre los grupos A y B durante el preparto y el postparto. En la figura 2 se puede observar que las medianas de eliminación de ooquistes del género Eimeria fluctuaron entre 200 y 1300 ooquistes por gramo de heces, no existiendo diferencia significativa entre los grupos de estudio durante el preparto y el postparto (p> 0.05). Los resultados de los coprocultivos de los nemátodos del orden strongylida se presentan en el cuadro 1. DISCUSION. Los resultados de la figura 1 demuestran que las cabras del grupo A tuvieron un incremento en la eliminación de huevecillos de nemátodos del orden strongylida en el postparto. Este comportamiento pudo estar asociado al fenómeno de la RPI, que se caracteriza por una caída del estado inmune del huésped relacionada con los cambios endrocrinos del parto y lactación, especialmente de esta última (11,12). Se ha postulado que la suspensión temporal de la capacidad inmunológica de las hembras gestantes y lactantes puede resultar en varios eventos, entre los más importantes se mencionan: 1) la reactivación de las larvas en estado de hipobiosis (13), 2) el incremento del establecimiento de larvas recién ingeridas (14), 3) el aumento de la fecundidad de los gusanos hembras (15), y 4) la suspensión de la mortalidad normal de los parásitos adultos en el tracto digestivo (16,17). Todos estos eventos producen un incremento en la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de protozarios gastrointestinales por parte del huésped. Por otro lado, en la figura 2 se observa que no existe un incremento de la eliminación de ooquistes del género Eimeria relacionado con el periparto en las cabras del grupo A. Esto no coincide con lo
Cuadro 1 Frecuencia de los géneros de nemátodos del orden strongylida identificados mediante coprocultivos en cabras criollas según su estado fisiológico. Géneros Grupos de cabras 212 Eimeria en cabras criollas. Gestantes/lactantes Vacías (Grupo B) (Grupo A) Haemonchus 81.4 % 8.6 % Oesophagostomum 6.4 % 6.7 % Ostertagia 7.4 % 6.9 % Trichostrongylus 3.5 % 5.3 % Cooperia 1.3 % 2.5 % Los resultados de los coprocultivos del género Eimeria se presentan en la cuadro 2. Se puede observar que E. ninakohlyakimovae (ovinoidalis) es la especie más frecuente en ambos grupos de estudio. Cuadro 2 Frecuencia de especies de Eimeria identificadas mediante cultivo de ooquistes en las cabras criollas según su estado fisiológico. Especie Grupo de cabras Gestantes/Lactantes Vacías (grupo B) (Grupo A) ninakohlyakimovae 52.28 % 51.50 % (ovinoidalis) caprina 5.42 % 5.00 % arlongi 19.59 % 13.14 % allijevi (parva) 22.71 % 30.35 % reportado por Soulsby (1) quien menciona que en el postparto las borregas presentan un incremento en la eliminación de ooquistes de Eimeria. Xiao y col. (18) también encontró un aumento en la excresión de ooquistes de otros protozoarios gastrointestinales tales como Crypstosporidium parvum y Giardia sp y lo relacionó con la RPI en borregas tanto gestantes como lactantes. Existe controversia en relación al momento en que ocurre el incremento peripartal de la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de protozoarios. Por un lado, se reporta que los niveles máximos de huevecillos pueden encontrarse en el preparto y postparto independientemente de la época del año en que ocurre el parto (8,11,19,20). Por otro lado, Agyei y col. (21) menciona que el incremento ocurre en el postparto. En el presente estudio no se pudo estudiar la dinámica de elimina- Vol. 6/No. 4/Octubre-Diciembre, 1995.
213 JF Torres-Acosta, RI Rodríguez-Vivas, R Cámara-Sarmiento. Figura 2.- Dinámica de la eliminación de ooquistes del género Eimeria en cabras gestantes-lactantes (grupo A) y vacías (grupo B) antes y después del parto del grupo A. Los valores están expresados en medianas. ción preparto debido a que los animales fueron desparasitados en este período. Sin embargo, Gibbs (12) indica que durante la lactancia ocurre el mayor incremento de la excresión de huevecillos de nemátodos (12). El efecto de la lactación puede ser interpretado en función de su habilidad para suprimir la expulsión de parásitos a través de sus interferencias hormonales, particularmente debida a la prolactina (12). Shekhovtsov y col. (22) y Fleming y Conrad (23) al estudiar este fenómeno en ovinos, reportan que la RPI está asociada con la lactación de las borregas. Sin embargo, Jeffcoate y col. (24) reportaron la existencia de indicadores que contradicen la hipótesis de que la concentración elevada de prolactina plasmática en el postparto está asociada a la RPI. Esto fue comprobado con borregas tratadas con bromocriptina (antagónico de la prolactina) en el postparto, que produjo una reducción de los niveles plasmáticos de prolactina y, sin embargo, la dinámica del incremento de huevecillos postparto no fue diferente a los animales gestantes sin tratamiento con bromocriptina. Revista Biomédica Los argumentos anteriores pierden fuerza al encontrarse que la RPI puede ser inducida artificialmente mediante la administración de hormonas sexuales (progesterona, diethylstilbestrol, sinoestrol o estradiol) y hormonas lactogénicas (prolactina) en hembras vacías y machos (22,23). Por otra parte, Jeffcoate y col. (5) mencionan que el incremento peripartal de la eliminación de huevecillos de Ostertagia circumcinta está asociado con el incremento significativo de los niveles plasmáticos de anticuerpos IgA antiparasitarios. Este incremento ocurrió en el momento en que la IgA era transportada de intestinos a la leche durante la lactación. Estos autores postulan que lo anterior puede conducir a la reducción en los niveles de anticuerpos abomasales de las hembras y por lo tanto permitir el establecimiento de larvas infestantes y/o la reactivación y desarrollo de larvas hipobióticas, produciendo el incremento peripartal de la eliminación de huevecillos. En los coprocultivos de los huevecillos del orden strongylida de las cabras estudiadas se determinó que los géneros Haemonchus, y Ostertagia fueron los más frecuentes (cuadro 1). Estos dos parásitos se reportan como los más patógenos en caprinos y tienen la particularidad de ser muy fértiles (1). El género Haemonchus es reportado como el parásito que se encuentra con mayor frecuencia en los estudios de la RPI en ovinos y bovinos de clima tropical (7,21). Sin embargo, existen reportes de que otros géneros están involucrados con la RPI, tales como Cooperia, Oesophagostomum, Ostertagia, y Trichostrongylus (8), siendo estos géneros los mismos que los encontrados en los dos grupos de cabras estudiados. Los resultados del cuadro 2 muestran que la especie más frecuente del género Eimeria en las cabras estudiadas es E. ninakohlyakimovae. Esta especie es conside-
214 Eimeria en cabras criollas. rada como la más patógena en caprinos (1,25). A pesar de lo anterior, no se encontró que alguna de las especies encontradas tuviera relación con el incremento de la eliminación de ooquistes en el postparto del grupo A. Hasta el momento no existe un reporte que indique las especies de Eimeria involucradas en el aumento en la eliminación de ooquistes asociados a la RPI. La importancia del incremento de la eliminación de huevecillos de nemátodos y ooquistes de Eimeria radica en favorecer la infestación de los pastos y aumenta el riesgo de que las crías adquieran infecciones masivas que repercutan en su estado productivo. Al respecto, Jansen (26) reportó que las crías de borregas desparasitadas durante el preparto tuvieron mayor crecimiento que las crías nacidas de borregas no desparasitadas. Esto plantea la necesidad de realizar estudios posteriores donde se evalúen medidas de control de parásitos en el periparto de las cabras y los posibles efectos de las medidas de control sobre la producción de leche y el crecimiento de las crías. Se concluye que en el postparto existe un aumento en la excresión de huevecillos de nemátodos del orden strongylida en cabras criollas. Sin embargo, no se encontró efecto alguno del parto sobre la eliminación de ooquistes de Eimeria. influence on infection with Toxocara canis. J Small Anim Pract 1983; 24:237-247. 4. Armour J. Epidemiologia e controle dos nematoides gastrintestinais e pulmonares dos rumiantes. En: Seminario Brasileiro de Parasitologia Veterinaria, 3, 1982. Balneário Camburiú, Brasilia: EMBRAPA- DDT, 1985:17-29. 5. Jeffcoate JA, Wedrychowicz H, Fishwick G, Dunlop EM, Duncan JL, Holmes PH. Pathophysiology of the periparturient egg rise in sheep: a possible role for IgA. Res Vet Sci 1992; 53:212-218. 6. Gibbs HC. Mechanism of survival of nematode parasites with enphasis on hipobiosis. Vet Parasitol 1982; 11:25-48. 7. Fleming MW, Rhodes RC, Gamble HR. Evaluation of Haemonchus contortus infections in sexually intact and ovariectomized ewes. Am J Vet Res 1988; 49:1733-1735. 8. Lima WS, Guimaraes MP. Behaviour of helminth infections in beef cows during gestation and lactation. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaria e Zootecnia 1992; 44:387-396. 9. Rodríguez VRI, Domínguez AJL, Cob GLA. Técnicas diagnósticas de parasitología veterinaria. Mérida: Universidad Autónoma de Yucatán, 1994:38-98 10. Bailey NTJ. Statistical method in biology. 2nd ed. London: Edward Arnold, 1981: 33-52. 11. O Sullivan BM, Donald AD. A field study of nematode parasite populations in lactating ewe. Parasitol 1970; 61:301-315. 12. Gibbs HC. Hipobiosis in parasitic nematodes: An update. Adv Parasitol 1986; 25:129-173. REFERENCIAS. 1. Soulsby EJL. Parasitología y enfermedades parasitarias de los animales domésticos. 7ª ed. México DF: Interamericana, 1987:613-615. 2. Fleming MW. Selection for a strain of Haemonchus contortus that exhibits periparturient egg rise in sheep. J Parasitol 1993; 79:399-402. 3. Lloyd S, Amerasinghe PH, Soulsby EJ. Periparturient immunosupression in the bitch and its 13. Gibbs HC, Barger IA. Trichostrongylid infections in parturient, lactating and dry ewes. Vet Parasitol 1986; 22:56-57. 14. Donald AD, Morley FHW, Waller PJ, Axelsen A, Dobson RJ, Donelly JR. Effects of reproduction, genotype and anthelmintic treatment of ewes on Ostertagia spp populations. Int J Parasitol 1982; 12:403-412. 15. O Sullivan BM, Donald AD. Response to infection with Haemonchus contortus and Trichostrongylus Vol. 6/No. 4/Octubre-Diciembre, 1995.
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