UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA BIOSEGURIDAD

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA PRACTICAS DE LABORATORIO BIOSEGURIDAD Maye Bernal Rivera Introducción El significado de la palabra bioseguridad se entiende por sus componentes: bio de bios (griego) que significa vida, y seguridad que se refiere a la calidad de ser seguro, libre de daño, riesgo o peligro. Bioseguridad en el Laboratorio de Microbiología es el conjunto de normas y procedimientos que debe seguirse, para conservar la salud y seguridad del personal que labora en el laboratorio y de la comunidad frente a los riesgos de infección para evitar contaminarse y contaminar a los demás con agentes potencialmente patógenos. Los microorganismos pueden entrar al huésped por diferentes mecanismos: contacto directo con la sustancia infectada (saliva, sangre, pus, lesión); salpicaduras de sangre o saliva, secreciones nasofaríngeas sobre la piel o mucosa sana o erosionada, contacto directo con objetos contaminados y, por aerosoles contaminados. Objetivos - Conocer las medidas de Bioseguridad en el laboratorio de enseñanza de Microbiología. - Aprender a utilizar los elementos de protección. - Tener consciencia de los agentes, material biológico y reactivos peligrosos que se manipulan en el Laboratorio. - Entender la importancia de manejar todas las muestras biológicas como potencialmente patógenas. - Aprender y practicar el lavado de manos. - Descartar adecuadamente y en los recipientes destinados para ello, los desechos. - Conocer los diferentes instrumentos del Laboratorio. - Utilizar adecuadamente el mechero de alcohol usado actualmente en el laboratorio.

2 - Capacitar al estudiante para afrontar el riesgo biológico en el laboratorio de Microbiología. - Respetar y cumplir con los objetivos del tema. Normas de Bioseguridad Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes de salir del laboratorio. Usar guantes para manipular muestras y cultivos de microorganismos, evitar contaminar el área de trabajo y los implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en la caneca roja. Dar uso adecuado a los guantes, ya que son un arma de doble filo Utilizar mascarillas de respiración, la cual debe encajar cómoda y adecuadamente sobre el puente de la nariz para evitar el empañamiento de las gafas protectoras. Esta protege sobre todo la mucosa nasal que es más susceptible a infecciones que la bucal, debido a que esta última tiene mayor cantidad de flora normal que la protege contra infecciones. Utilizar anteojos de protección para evitar lesiones oculares causadas por partículas proyectadas hacia el rostro del operador, a la vez que protege contra infecciones considerando que muchos gérmenes de la flora oral normal son patógenos oportunistas. No entrar al Laboratorio implementos que no tengan que ver con la práctica. No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el Laboratorio. Jamás llevarse el lapicero, bolígrafo o cualquier otro implemento a la boca. No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del Laboratorio. Hablar lo mínimo mientras está trabajando en el Laboratorio. No pipetear con la boca. No usar jeringas o agujas para manipular líquidos o especimenes clínicos. Utilizar únicamente mecheros comerciales, NUNCA improvisados Evitar la formación de aerosoles. Mantener el Laboratorio limpio y aseado. Descontaminar las áreas de trabajo antes de iniciar la práctica de laboratorio, cada vez que se derrame una sustancia y, una vez terminada la clase. Descartar todo el material contaminado en los recipientes destinados para ello. Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de abandonar el Laboratorio. Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos. Leer y entender los pasos de cada procedimiento antes de proceder a realizarlo. Preguntar al profesor cualquier duda sobre los procedimientos a seguir. No permitir el ingreso de personas ajenas a las áreas de trabajo. Notificar de inmediato al profesor cualquier accidente.

3 REACTIVOS Hipoclorito de Sodio 1-3% Averiguar la concentración del Hipoclorito de Sodio comercial y de acuerdo a ello, hacer la dilución correspondiente, de tal forma que quede a una concentración final del 1 al 3%, que es la concentración efectiva para ser utilizada como desinfectante. Jabón antiséptico Alcohol glicerinado PROCEDIMIENTOS 1. DECONTAMINACION DEL AREA DE TRABAJO: - Regar hipoclorito de sodio sobre el área de trabajo. - Dejar actuar durante 5 minutos. - Limpiar con toallas de papel, del centro hacia la periferia y descartar el papel en la caneca correspondiente. Nota: este procedimiento se debe realizar antes y después de las prácticas, durante todo el semestre. 2. MANEJO DE ELEMENTOS DE PROTECCION: Su profesor le indicará la manera adecuada de colocar, usar y retirar todos y cada uno de los elementos de protección (bata, anteojos, mascarilla respiratoria o tapabocas, guantes, etc.) a utilizar en el laboratorio de Microbiología. 3. LAVADO DE MANOS - Abrir la llave del agua con una toalla desechable o un trozo de papel. - Descartar ese papel en la caneca. - Humedecer las manos con agua de chorro y frotar. - Aplicar jabón antiséptico y frotar vigorosamente las manos, poner especial cuidado en dedos y limpiar uñas. - Colocar las manos debajo del chorro y dejar que corra el agua, hasta eliminar completamente el jabón. - Cerrar la llave del agua con un trozo de papel o toalla desechable. - Secar perfectamente las manos con toallas desechables. Importante: Siempre lavar sus manos antes de salir del laboratorio

4 4. MANEJO DE SANGRE Y OTRAS MUESTRAS BIOLOGICAS En general todo el personal que labora en salud está más expuesto a contraer infecciones al manipular pacientes o sus muestras biológicas; por consiguiente, para prevenir la transmisión de enfermedades infecciosas los pacientes y sus especimenes deben ser manejados con todas las medidas de Bioseguridad. De acuerdo con las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud, todos los especimenes clínicos deben ser manejados como si provinieran de pacientes con Hepatitis B y o SIDA. La enfermedad que más debe preocupar a los profesionales de la salud, es la infección por el virus de la Hepatitis B ya que se estima que en el mundo hay más de 200 millones portadores asintomáticos con este virus. 5. MANEJO DE DESECHOS: Para descartar los diferentes materiales tener en cuenta el color de las canecas y el letrero de los diferentes recipientes dispuestos para este fin, en cada una de las prácticas de laboratorio. 6. USO Y CUIDADO DEL MECHERO DE ALCOHOL El mechero es un instrumento de laboratorio de gran utilidad, diseñado con el propósito de obtener una llama que proporcione máximo calor y no produzca depósitos de hollín al calentar o esterilizar los objetos. En nuestra práctica utilizamos el mechero para esterilizar el asa bacteriológica. PELIGRO! Es importante conocer y seguir estas normas para evitar accidentes en el laboratorio que puedan afectarlo a usted y a otras personas que se encuentren a su alrededor: - Antes de iniciar la práctica, llenar cuidadosamente el mechero con alcohol, asegurándose de no derramarlo. - Impregnar la mecha con alcohol. El largo de la mecha debe ser el adecuado para proporcionar una llama eficiente - Revisar que el exterior del mechero y el área de trabajo estén completamente secas, libres de alcohol. - Revisar que sus manos y vestimenta estén libres de alcohol. - Evitar prender el mechero con guantes de cualquier material (látex, nitrilo y vinilo). - Encender exclusivamente con fósforos. NUNCA con mecheros vecinos, ni con otro tipo de encendedor. - Evitar mover o trasladar el mechero del lugar de trabajo cuando este se encuentre encendido.

5 - Para apagar el mechero colocar la tapa. Evitar soplar. 7. EN CASO DE ACCIDENTE: En caso de sufrir un accidente con una muestra biológica, material de laboratorio o medio de cultivo, hacer lo siguiente: - Colocar toallas de papel sobre el material regado. - Chorrear Hipoclorito de Sodio sobre toda el área. - Dejar en reposo 20 minutos. - Remover la toalla, recoger los desechos y eliminarlos en el recipiente para material contaminado. - Si hay derramamientos de productos biológicos o medios de cultivo sobre la bata, retirar cuidadosamente y mandar a esterilizar. En caso de sufrir lesión accidental con elementos corto punzantes (lanceta, bisturí, aguja, lámina portaobjeto) potencialmente infectados, proceder así: - Realizar un lavado minucioso con agua y jabón del área afectada - Presionar los bordes de la herida para favorecer la salida de sangre por la misma. - En caso necesario colocar un apósito. - No frotar la zona con cepillos debido al riesgo de originar microlesiones. En el caso de exposición de los ojos: - Lavarlos con abundante agua. - Lavarlos con solución salina estéril. 8. ACTIVIDAD 1. Defina el término de riesgo biológico. 2. Cómo se clasifican los microorganismo según el riesgo de peligrosidad? Escriba 3 ejemplos de cada uno. 3. Defina el concepto de Limpieza, contaminación, desinfección, descontaminación y esterilización 4. De ejemplos de reactivos o sustancias utilizadas para cada uno de los anteriores propósitos.