Programa materia Genética Molecular UNIDAD 1. ADN COMO MATERIAL GENETICO
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- Alberto Miguélez Jiménez
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1 Programa materia Genética Molecular CICY UNIDAD 1. ADN COMO MATERIAL GENETICO 1.1. Identificación del ADN como depósito de información genética 1.2. Propiedades químicas y físicas del ADN 1.3. Topología del ADN Estructuras secundarias intramoleculares: Z-ADN, cruciforme, hélices triples Estructuras intermoleculares: R-loops, D-loops, estructuras de Holliday, concatémeros 1.4. ADN circular y superenrollado UNIDAD 2.METABOLISMO DEL ADN 2.1. Replicación del ADN Reglas básicas de la replicación Horquilla de replicación: origen, dirección, estructura Replicación semidiscontinua Proteínas involucradas en la replicación Inicio de la replicación Orígenes de replicación: secuencias consenso Fidelidad de la replicación Mecanismos que evitan errores Exactitud en el apareamiento de bases Edición Mecanismos de corrección Modelos de replicación Moléculas lineales Moléculas circulares de cadena sencilla Modelo del círculo rodante 2.2. Reparación del ADN Tipos de reparación Tramo corto Tramo largo Fotorreactivación Glucosilasas Sistema SOS Enzimología de la reparación CENT R O DE INVEST IG ACIÓ N CIEN T ÍFICA DE YU CAT ÁN, A.C. Calle 43 No. 130, Col. Chuburná de H idalgo, CP Tels. (99) Fax. (99)
2 UNIDAD 3. MECANISMOS DE REARREGLO E INTERCAMBIO DE MATERIAL GENETICO 3.1. Recombinación Tipos de recombinación Recombinación homóloga Recombinación entre moléculas intactas de ADN Estructuras de Holliday Modelo de transferencia de cadenas Resolución Propiedades de las proteínas RecA, RecBCD y RuvABC 3.2. Transposición Secuencias de inserción Tamaño y propiedades Transposones Detección de la transposición Localización de los sitios de inserción Tipos de transposones Transposición Duplicación de la secuencia blanco en un sitio de inserción Naturaleza de la unión transposón-secuencia blanco Mecanismo de la transposición Cointegración Replicación de un transposón Otros fenómenos genéticos mediados por transposones: fusión de replicones, deleciones e inversiones 3.3. Plásmidos Propiedades generales y tipos Incompatibilidad Control del número de copias Ejemplos de plásmidos bacterianos Plásmido F Plásmidos R Plásmidos colicinogénicos 4.1. Ciclo lítico 4.2. Ciclo lisogénico 5.1. ARN polimerasas UNIDAD 4. BACTERIOFAGOS UNIDAD 5. TRANSCRIPCION 2
3 Tipos y funciones 5.2. Promotores Secuencias consenso Enhancers 5.3. Inicio de la transcripción Formación del complejo de iniciación Factor sigma 5.4. Elongación de la cadena de ARN 5.5. Terminación del proceso Factor rho Terminación independiente del factor rho 5.6. Modificación del ARNm Unión de la cola de poli(a) Capping Partículas ribonucleoprotéicas UNIDAD 6. TRADUCCION 6.1. Código genético 6.2. Elementos que componen al aparato de traducción Ribosomas Subunidades Sitios A y P Actividades enzimáticas asociadas al ribosoma ARNt Estructura Región del anticodón Hipótesis del bamboleo de Crick 6.3. Inicio de la traducción Ensamble del complejo traduccional Formación del primer enlace proteíco 6.4. Elongación Traslocación Factores proteícos asociados al proceso ARNt sintetasas; Proceso de carga de los aminoácidos 6.5 Terminación Codones de terminación Desensamble del ribosoma Factores protéicos involucrados Reciclaje de subunidades ribosomales UNIDAD 7. REGULACION DE LA EXPRESION GENETICA EN PROCARIOTES 7.1. Mecanismos de regulación positiva y negativa 7.2. Concepto de operón Operón de la lactosa Operón de la galactosa 3
4 Operón de la arabinosa Operón del triptofano 7.3 Control en la terminación Atenuación Antiterminación UNIDAD 8. GENOMAS EUCARIOTES 8.1. Generalidades Diferencias y similitudes entre los genomas procariotes y eucariotes Niveles de empacamiento del ADN Cromatina activa Estructura de los genes eucariotes 8.2. Regulación de la expresión genética en eucariotes A nivel de genoma Pérdida Amplificación Rearreglos Metilación Transcripcional Exopresión basal y constitutiva Expresión inducible y tejido específica Elementos cis-reguladores Promotores Potenciadores Silenciadores Factores de transcripción De acción general De acción específica Post-transcripcional Procesamiento de mensajeros Transporte de mensajeros Vida media de mensajeros Traduccional Mecanismos de regulación traduccional Post-traduccional Tipos de modificación posttraduccional Compartamentalización 8.3. Transducción de señales Cascadas de cinasas en respuesta a estrés y reguladores de crecimiento UNIDAD 9. GENOMAS EXTRACROMOSOMALES 9.1. Mitocondria 9.2. Cloroplasto 4
5 UNIDAD 10. TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE Introducción Nomenclatura básica Etapas de desarrollo Enzimas de restricción Formación de una molécula de ADN recombinante Purificación y amplificación de secuencias clonadas en un plásmido Cepas bacterianas Métodos para identificar colonias conteniendo plásmidos recombinantes Vectores de clonación Plásmidos naturales Plásmidos artificiales Aislamiento de genes Bibliotecas genómicas y de ADNc Hibridación substractiva Análisis de la información genética PCR Hibridaciones: Southern, Northern, Western Secuenciación Regulación de la expresión genética Regiones promotoras, potenciadoras, silenciadoras Identificación de genes Banco de secuencias Complementación Expresión en plantas Sistema de transferencia de genes Biobalística Sistema de Agrobacterium tumefaciens Vectores de transformación Marcadores de selección Genes reporteros APLICACIONES 5
6 EVALUACION El aprovechamiento del alumno será evaluado con los siguientes parámetros: Actividad Porcentaje Exámenes 80 Discusión en clase 10 Investigación bibliográfica 10 La calificación mínima para acreditar el curso será de 80 puntos. Los exámenes podrán ser de preguntas puntuales, temáticas, diseño experimental, interpretación de resultados, resolución de problemas o de desarrollo de temas específicos. 6
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