Investigación científica y información veterinaria

Transcripción

1 Investigación científica y información veterinaria Results Un ensayo sobre 150 cepas clínicas de origen canino indica que Otodine es activo contra todos los microorganismos asociados a la otitis canina en perros Luca Guardabassi Profesor adjunto de Microbiología Clínica, Universidad de Copenhague (Dinamarca)

2 Investigación científica y información veterinaria Results Un ensayo sobre 150 cepas clínicas de origen canino indica que Otodine es activo contra todos los microorganismos asociados a la otitis canina en perros Luca Guardabassi Profesor adjunto de Microbiología Clínica, Universidad de Copenhague (Dinamarca) Otodine es un antiséptico ótico que contiene di-gluconato de clorhexidina y ácido diaminotetra-acético trometamina (Tris EDTA). El di-gluconato de clorhexidina ejerce una actividad bactericida por perturbación de la membrana (1). El Tris EDTA incrementa la permeabilidad de la membrana externa en las bacterias Gram negativas, potenciando así los efectos de varios antimicrobianos, incluyendo los antisépticos y los antibióticos sistémicos (2-3). La combinación de los dos compuestos produce un efecto sinérgico lo que permite usar dosis más bajas de clorhexidina que no sean ototóxicas (4-6). La actividad antimicrobiana del Otodine se evaluó ensayando una amplia colección de patógenos asociados con la otitis canina. La colección estaba formada por 150 cepas clínicas de origen canino pertenecientes a: Corynebacterium auriscanis (n=12) Escherichia coli (n=12) Malassezia pachydermatis (n=9) Proteus mirabilis (n=11) Pseudomonas aeruginosa (n=19) Staphylococcus aureus (n=22) Staphylococcus pseudintermedius (n=53) y Streptococcus canis (n=12). Las diluciones de Otodine que dieron lugar a la muerte total de los microorganismos ensayados se determinaron por el método de la micro dilución en caldo (8). En resumen, cada cepa se incubó durante 30 minutos a 37ºC en diluciones seriadas a la mitad de Otodine en caldo Mueller-Hinson y se evaluó la supervivencia de cada cepa transfiriendo una alícuota de cada dilución en un medio de agar adecuado.

3 Results Actividad sobre bacterias Gram negativas Todas las cepas Gram negativas, excepto una, fueron eliminadas completamente a una dilución 1:8 de Otodine. P. mirabilis fue la especie más resistente, y C. auriscanis la más susceptible. P. aeruginosa y E. coli presentaron niveles intermedios de susceptibilidad. Las cepas pertenecientes a estas dos especies quedaron, en general, eliminadas a diluciones 1:16 del producto (Tabla 1). Actividad sobre bacterias Gram positivas Todas las cepas Gram positivas fueron eliminadas a diluciones 1:16 del producto. S. pseudintermedius y S. canis fueron más susceptibles que S. aureus y la dilución 1:16 fue, en general, suficiente para matar las cepas pertenecientes a estas dos especies. No se observaron diferencias significativas entre estafilococos resistentes o susceptibles a la meticilina (Tabla 2). Actividad sobre levaduras Sorprendentemente, además de su actividad antibacteriana contra especies Gram positivas y Gram negativas, Otodine mostró una excelente actividad fungicida contra M. pachydermatis. Todas las cepas ensayadas quedaron completamente muertas a una dilución 1:32 del producto (Tabla 3). Ghibaudo Observaciones finales Según mi conocimiento, éste es el primer estudio que ha investigado la actividad antimicrobiana de un antiséptico ótico comercial frente a gran cantidad de cepas clínicas aisladas de perros, incluyendo bacterias multiresistentes como los estafilococos resistentes a la meticilina. Otodine se mostró activo in vitro contra todos los microorganismos patógenos involucrados en las otitis caninas incluyendo bacterias Gram positivas y Gram negativas multiresistentes, así como M. pachydermatis. Este amplio espectro de actividad antibacteriana es especialmente ventajoso en el tratamiento de la otitis externa, ya que esta enfermedad canina está frecuentemente causada por diferentes microorganismos. Cada una de las 150 cepas ensayadas estaba completamente muerta después de 30 minutos de exposición a diluciones 1:4 o mayores de Otodine y se obtuvieron resultados comparables reduciendo el tiempo de exposición a 10 minutos. Dado que se alcanzan concentraciones iguales o mayores in vivo después de aplicar Otodine en el canal auditivo afectado, es razonable sacar la conclusión que este producto puede emplearse con éxito para tratar algunos casos de infecciones del oído siguiendo los tiempos de aplicación indicados por el fabricante (o sea, 10 minutos, como mínimo). Es interesante señalar que Otodine afectó por igual a estafilococos resistentes y susceptibles a la meticilina. La combinación de di-gluconato de clorhexidina y Tris EDTA es eficaz contra estafilococos resistentes a la meticilina, que son notoriamente resistentes a múltiples antibióticos y representan un problema terapéutico serio (8), y parece que no facilitan la selección y la difusión de estas nocivas bacterias. Los resultados de este estudio indican que la formulación de Otodine puede ser una valiosa herramienta terapéutica para combatir los estafilococos resistentes a la meticilina, de reciente aparición en dermatología veterinaria.

4 Investigación científica y información veterinaria Results Referencias 1. Kuyyakanond T, Quesnel LB. The mechanism of action of chlorhexidine. FEMS Microbiology Letters 1992; 79: Lambert RJW, Hanlon GW, Denyer SP. The synergistic effect of EDTA/antimicrobial combinations on Pseudomonas aeruginosa. Journal of Applied Microbiology 2004; 96: Farca AM, Piromalli G, Maffei F, Re G. Potentiating effect of EDTA-Tris on the activity of antibiotics against resistant bacteria associated with otitis, dermatitis and cystitis. Journal of Small Animal Practice 1997; 38: Mills PC, Ahlstrom L, Wilson WJ. Ototoxicity and tolerance assessment of a TrisEDTA and polyhexamethylene biguanide ear flush formulation in dogs. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics 2005; 28: Ghibaudo G, Cornegliani L, Martino P. Evaluation of the in vivo effects of Tris-EDTA and chlorhexidine digluconate 0.15% solution in chronic bacterial otitis externa: 11 cases. Veterinary Dermatology 2004; 15: Merchant SR, Neer TM, Tedford BL, et al. Ototoxicity assessment of a chlorhexidine otic preparation in dogs. Prog Vet Neurol 1993; 4: Swinney A, Fazakerley J, McEwan N, Nuttall T. Comparative in vitro antimicrobial efficacy of commercial ear cleaners. Journal of Veterinary Dermatology 2008; 19: Loeffler A, Linek M, Moodley A, Guardabassi L, Sung JML, Winkler M, Weiss R, Lloyd DH.. First report of multiresistant, meca-positive Staphylococcus intermedius in Europe: 12 cases from a veterinary dermatology referral clinic in Germany. Veterinary Dermatology 2007; 18:

5 Tabla Tabla 1. Diluciones de Otodine que producen la muerte total de bacteria Gram negativas Cepa Especie 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1 Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Escherichia coli Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Proteus mirabilis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis Corynebacterium auriscanis muerte total (sin crecimiento) + inhibición parcial (1-100 colonias) ++ sin efecto (crecimiento confluente)

6 Tabla 2. Diluciones de Otodine que producen la muerte total de bacteria Gram positivas Tabla Cepa Especie a 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1 Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Streptococcus canis Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MS Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus pseudintermedius MR Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MS Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR Staphylococcus aureus - MR a MS = susceptible a la meticilina; MR = resistente a la meticilina - muerte total (sin crecimiento) + inhibición parcial (1-100 colonias) ++ sin efecto (crecimiento confluente)

7 Tabla Table 3. Diluciones de Otodine que producen la muerte total de levaduras Cepa Especie 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1 Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis Malassezia pachydermatis muerte total (sin crecimiento) + inhibición parcial (1-100 colonias) ++ sin efecto (crecimiento confluente) Luca Guardabassi Profesor adjunto de Microbiología Clínica, Universidad de Copenhague (Dinamarca)

8 mentalism DP0119/01