Universidad de Puerto Rico Recinto de Río Piedras Departamento de Biología

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Natividad Salinas Pérez
hace 6 años
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1 Universidad de Puerto Rico Recinto de Río Piedras Departamento de Biología Dra. Yvette Pérez-Chiesa Laboratorio de Genética Biol 3350 Familiarización con Drosophila melanogaster Uno de los requisitos para analizar el control genético de un rasgo es que existan formas o características contrastadas del mismo, la forma normal o común versus la forma menos común o mutante. Para poder reconocer un fenotipo mutante con certeza uno debe estar familiarizado con la apariencia general y ciclo de vida del organismo que se va a analizar. Los objetivos de este estudio son: 1. Familiarizarse con la anatomía externa y apariencia general del tipo salvaje de la mosca Drosophila melanogaster, y con algunas de sus mutaciones. 2. Aprender a distinguir entre machos y hembras. 3. Aprender a cultivar las moscas y adquirir práctica en el manejo de las mismas. 4. Repasar el ciclo de vida observando cultivos de diversas edades. Materiales y métodos A. Materiales 1. Microscopio de disección 2. Anestesiadores y reanestesiadores 3. Éter 4. Pinceles finos o agujas de disección 5. Tarjetas blancas (index card 3x5) 6. embudos 7. Cultivos de Drosophila melanogaster salvajes en diversas etapas de desarrollo 8. Material en demostración para observar con microscopio: a. Placas petri con alimento: 1. huevos 2. larvas del 1er y 2do instar

2 3. larvas del 3er instar b. Mutantes de D. melanogaster vivas o preservadas en aceite mineral Las moscas anestesiadas de un mismo tipo pueden colocarse sobre una laminilla o cristal cóncavo y echar sobre ellas aceite mineral; (la preparación puede durar varios días) B. Métodos 1. Antes de este laboratorio deberá leer los métodos para el manejo de Drosophila y su ciclo de vida (Guía para el uso de Drosophila). Luego vea las demostraciones del instructor sobre el manejo de las moscas. Examine los cultivos y placas petri. 2. Separe alrededor de 6 moscas salvajes de una botella de cultivo en un pequeño pote de cristal, anestésielas y examínelas cuidadosamente bajo el microscopio de disección. 3. Lea las descripciones de anatomía externa y compare las figuras (Ver guía para el uso de Drosophila) con las moscas que tiene. Para distinguir Drosophila melanogaster de otras especies del mismo género se usan las siguientes características: a. Cada una de la cerdas y pelos del mesonoto no nacen de una manchita oscura. b. Los segmentos abdominales están marcados con una banda oscura continua de un lado a otro del abdomen. c. Hay ocho filas de pelos acrosticales. d. El color del tórax es amarillento. e. Las venas cruzadas de las alas son claras. f. Las cerdas del escutelo son convergentes. g. Los machos tienen peine sexual y el arco genital es cóncavo h. Los huevos tienen dos filamentos. 4. Aprenda a distinguir entre machos y hembras. Fíjese y compare la genitalia, la coloración del abdomen, el tamaño y la presencia del peine sexual en el macho. 5. Use la Tabla 1 para añadir cualquier otra descripción que se aplique al fenotipo de la mosca salvaje.

3 6. Examine y compare las moscas mutantes y salvajes. Llena la Tabla 1. Coloque el número y nombre de la cepa al lado de la característica afectada, escriba una descripción corta sólo para la característica mutante. Tabla 1 Fenotipos Salvajes y Mutantes de Drosophila melanogaster Parte del cuerpo Descripción cepa Nombre Descripción cepa salvaje mutante Antena: Cerdas torácicas Patrón de distribución Cerdas y pelos de las patas: Peine sexual Alas: Tamaño

4 Venas de las alas: Halterios Patrón Ojo compuesto: Tamaño Textura Ocelos: Patrón Cuerpo: de la cabeza del tórax del abdomen *Larva: Ganchos bucales

5 *Huevos: Permeabilidad de la membrana vitelina * Algunas mutaciones afectan también a las larvas o a los huevos de las hembras mutantes.

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