Detección y confirmación de la Resistencia a los herbicidas. Ricardo Labrada

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1 Detección y confirmación de la Resistencia a los herbicidas Ricardo Labrada

2 El monitoreo frecuente de los lotes es la única manera de saber qué malezas están presentes y por qué están ahí. Esto ayudará a documentar los cambios de las poblaciones de malezas en el tiempo debido a las prácticas de manejo, incluyendo la evolución de resistencia a algún herbicida. Las prácticas de manejo del cultivo y las malezas, basados en el monitoreo ayudan a: Maximizar los rendimientos y beneficios al disminuir la competencia de las malezas Reducir la producción de semillas de las malezas Maximizar la eficiencia de tácticas de remediación dentro de un ciclo de cultivo El monitoreo debe comenzarse entre 7-14 días luego de la aplicación de cada herbicida y se debe continuar periódicamente hasta la cosecha.

3 Malezas sobrevivientes luego de una aplicación Para averiguar la razón de la presencia de malezas en el lote luego de la aplicación de un herbicida debe tenerse en cuenta historia del lote, bilogía de las malezas, factores climáticos, problemas en las aplicaciones y las prácticas culturales usadas antes de inferir resistencia al herbicida Historia del lote: se refiere a cultivos anteriores, prácticas químicas y mecánicas de control de malezas que pudieran tener influencia en las poblaciones de malezas observadas. Esta historia puede dar una idea sobre la probabilidad del desarrollo de resistencia. Hay que considerar la siguiente información: Número de mecanismos de acción usados Número y tipo de cultivos participantes en la rotación Prácticas mecánicas y culturales usadas en el control de malezas Malezas presentes, considerando densidad y distribución

4 La probabilidad de evolución de la resistencia aumenta cuando se reduce la diversidad de prácticas de control usadas. El registro periódico de la densidad y distribución de las malezas en el lote ayudará a notar tempranamente cualquier cambio que pudiera indicar resistencia a herbicidas.

5 Para que un biotipo de maleza sea considerado resistente debe cumplir con los siguientes criterios: 1. Cumplimiento de la definición de resistencia de la WSSA (Weed Science Society of America o Sociedad Americana de la Ciencia de las malezas) y de la Encuesta Internacional de malezas resistentes a herbicidas 2. Confirmación de datos utilizando protocolos científicos aceptables. 3. La resistencia debe ser heredable 4. Demostración del impacto práctico de campo

6 Criterio 1. La WSSA define la resistencia a herbicidas como "la capacidad heredada de una planta para sobrevivir y reproducirse después de la exposición a una dosis de herbicida normalmente letal para el tipo salvaje. En una planta, la resistencia puede ocurrir naturalmente o ser inducida mediante técnicas como la ingeniería genética o la selección de variantes producidas por cultivo de tejidos o mutagénesis. La resistencia debe ser confirmada imparcialmente a través de la comparación de plantas resistentes y susceptibles de la misma especie en un ensayo replicado y científicamente sólido. El Comité de Acción de Resistencia a Herbicidas (HRAC por su siglas en inglés) ha preparado una publicación que se ocupa específicamente de la detección de resistencia a los herbicidas (HRAC, 1999). ".

7 Criterio 2. Para la caracterización inicial de un biotipo de maleza resistente putativo la prueba más preferida es un experimento de dosis-respuesta en condiciones controladas (cámara de crecimiento, invernadero, etc.) usando plantas enteras. Casi todas las otras pruebas se han ideado por ser más rápidas, o menos costosas, para facilitar la detección de rutina en cientos de muestras. Para confirmar un nuevo caso de resistencia el objetivo es imitar, tan estrechamente como sea posible, las condiciones normales de aplicación de campo en un ambiente controlado para determinar la GR50 (dosis requerida para reducir el peso de los tratados en un 50% con respecto a las plantas no tratadas) de las poblaciones resistentes y susceptibles. Se utiliza un rango de dosis de herbicidas de manera de incluir dosis sub-letales y letales para la población tanto resistente como susceptible (Heap, 1994). La resistencia en este experimento se confirma si hay una diferencia estadística en la respuesta al herbicida entre la población resistente putativa y la población susceptible (nota: esta es la definición científica en adelante).

8 Modelos de regresión no lineal se utilizan para comparar los biotipos (Streibig, 1988; cerebrales y Cousens 1989, Seefelt et al., 1995). Si las regresiones son estadísticamente diferentes, entonces la resistencia por lo general se reporta como la relación entre los GR50 del biotipo resistente y susceptible. Normalmente es un proceso relativamente sencillo documentar la resistencia cuando el nivel de resistencia es claro, con una relación de R/S (basado en GR50) de más de 10. Sin embargo, la confirmación de la resistencia de bajo nivel es mucho más difícil y en algunos casos subjetiva.

9 Confirmación de la resistencia a herbicidas Puede hacerse a campo o en invernadero. En el primer caso, para un herbicida post emergente, se realiza lo siguiente: Marcar en el lote - Evaluar un mínimo de 5, pero preferiblemente 20, de las malezas que mejor sobreviven a la primera aplicación del herbicida Buscar un área fuera del lote que no haya recibido aplicaciones del herbicida, pero donde esté presente la misma especie de maleza y marcar el mismo número de malezas que en el paso anterior Aplicar el herbicida en ambas superficies con dos tratamientos: dosis normal (la del marbete) y dosis doble Evaluar todas las plantas luego de días posteriores a la aplicación

10 La mejor manera de confirmar la resistencia en especies que no tienen historial de resistencia, en las cuales se sospecha resistencia a mas de un herbicida o cuando no existen pruebas de laboratorio para tal fin, es realizando ensayos en invernadero: Se colectan semillas de las malezas sospechosas Se siembran en el invernadero Las plantas resultantes reciben la aplicación del herbicida en cuestión La supervivencia de las población de invernadero es comparada con la de poblaciones identificadas como susceptibles y poblaciones identificadas como resistentes

11

12 Ensayo de resistencia de Kochia a glifosato

13 Criterio 3. La resistencia debe ser heredable En algunos casos, los científicos han comprobado la resistencia mediante la extracción de las plantas del campo en macetas, y luego llevado a cabo los experimentos de dosis-respuesta en ellas. Esto puede ser una prueba rápida para determinar si se deben realizar ensayos adicionales, pero no es aceptable para la confirmación de un nuevo caso de resistencia. Las poblaciones R (potencialmente resistente) y S (susceptibles) pueden estar en diferentes etapas de crecimiento, o pueden ya haber sido expuestas a un herbicida en el campo, que puede afectar gravemente el resultado del experimento.

14 Criterio 4. Demostración del impacto práctico de campo Esta evaluación está diseñada para relevancia práctica y no para documentar las variaciones naturales en respuesta a los herbicidas entre las poblaciones de malezas. Si no hay diferencia detectable en el control de la maleza en condiciones de campo en la dosis recomendada, entonces no se añadirá a la evaluación. Aunque pueden hacerse argumentos con validez científica por la aparición de resistencia de bajo nivel, incluso cuando la maleza se controla con la dosis de campo bajo estas condiciones. La planta objeto de estudio debe estar bien identificada hasta el nivel de especie.

15 Evolución de la resistencia a nivel mundial

16 Esta presentación fue patrocinada por el Proyecto Prometeo de la Secretaría Superior, Ciencia, Tecnología e Innovación de la República de Ecuador MUCHAS GRACIAS

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