EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DE FUNGICIDAS FRENTE A FUSICLADIUM OLEAGINEUM, AGENTE DEL REPILO DEL OLIVO

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1 UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS Y DE MONTES EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DE FUNGICIDAS FRENTE A FUSICLADIUM OLEAGINEUM, AGENTE DEL REPILO DEL OLIVO INFORME PRELIMINAR DEL CONTRATO DE PRESTACIÓN DE SERVICIOS ENTRE LA EMPRESA AGRIPHAR IBERIA S.L.U Y EL DEPARTAMENTO DE AGRONOMÍA DE LA UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA INVESTIGADOR RESPONSABLE: ANTONIO TRAPERO CASAS PARTICIPANTES: LUIS FERNANDO ROCA CASTILLO CÓRDOBA, ABRIL DE 2014

2 OBJETIVOS 1.- Evaluación de la eficacia fungicida del producto SYLLIT, de la empresa AGRIPHAR IBERIA, sobre la infección por Fusicladium oleagineum, agente del Repilo del olivo, en platones de olivo inoculados de forma artificial. 2.- Evaluación de la eficacia fungicida del producto SYLLIT sobre la infección por Fusicladium oleagineum sobre olivos en campo sometidos a infección natural. 3.- Evaluación de la resistencia al lavado por lluvia del producto SYLLIT en plantones de olivo inoculados artificialmente. Tabla 1. Fungicida evaluado frente a Fusicladium oleagineum en plantones inoculados de forma artificial y sobre olivos en campo. Nombre comercial Materia activa Dosis (ml /l) SYLLIT FLOW Dodina 54% 1.25 Tabla 2. Productos de referencia incluidos en los distintos experimentos de evaluación de Syllit Productos Dosis Objetivos Oxicloruro de cobre 50% (comercial) 2000 mg Cu/l 1; 3 Sulfato de cobre puro (laboratorio) 2000 mg Cu/l 1; 3 Oxicloruro de cobre 38% (comercial) 3800 mg Cu/l 2 MATERIAL Y MÉTODOS Objetivo 1.- La evaluación de los productos frente al Repilo se llevó a cabo empleando plantones del cultivar Picual, de 1 año de edad. Se evaluó independientemente el efecto preventivo y curativo de los mismos en aplicación anterior (4 días) y posterior (4 días) a la inoculación. La inoculación de los plantones se realizó siguiendo el método desarrollado por el Dpto. de Agronomía de la Universidad de Córdoba (López Doncel et al., 2000), consistente en pulverizar los plantones de olivo con una suspensión conidial del patógeno, 1

3 ajustada a 10 5 conidios/ml. Tras la inoculación, los plantones se mantuvieron en cámara de ambiente controlado, a una temperatura entre ºC y una humedad relativa del 100%, durante 48 horas. Tras dicho periodo, los plantones fueron trasladados a umbráculo hasta la aparición de los síntomas. Se incluyeron seis repeticiones (plantones) por combinación experimental. Se incluyeron plantones testigo que no recibieron tratamiento fungicida, así como plantones tratados con oxicloruro de cobre comercial y plantones tratados con sulfato de cobre puro a modo de referencia (Tabla 2). La evaluación de la enfermedad se realizó a los 135 días de la inoculación, sumergiendo 10 hojas de cada plantón en una solución de hidróxido sódico al 5% durante 20 minutos, lo cual permitió la evaluación de las infecciones totales (visibles+latentes) (Zarco et al., 2007). Para cada plantón se calculó la incidencia de la enfermedad, definida como el número total de hojas que presentaban lesiones causadas por F. oleagineum y la severidad o porcentaje de superficie foliar afectada. A partir de dichos parámetros se calculó el Índice de Enfermedad (IE), expresado en porcentaje como: IE= (S*(1/S max ))*100 S: severidad S max : Severidad máxima de la escala de evaluación (8) Se realizaron análisis de la varianza y comparaciones de medias del Índice de Enfermedad (IE) según el test de Tukey al nivel de probabilidad del 0.05, empleando el programa Statistix v.9 (Analytical software, 2008). Objetivo 2.- La evaluación en campo se llevó a cabo en un olivar comercial con alta incidencia natural de la enfermedad. La aplicación del producto se realizó con atomizador. Se llevaron a cabo tres tratamientos anuales, en octubre, febrero y mayo. El diseño experimental fue en bloques al azar con cuatro repeticiones. La parcela elemental constó de 21 árboles, distribuidos en tres filas, de los cuales se muestrearon los 5 centrales. La evaluación de la enfermedad se realizó tomando muestras de 100 hojas por parcela en el momento de máximo nivel de infecciones visibles (marzo) y calculándose el Índice de Enfermedad al igual que en 2

4 el Objetivo 1. Se incluyó un tratamiento con oxicloruro de cobre comercial a modo de referencia (Tabla 2). Objetivo 3.- Para la evaluación de la persistencia se aplicó el producto Syllit sobre plantones que fueron sometidos a tres regímenes de lavado, 0, 50 y 180 l/m 2, en simulador de lluvia. Posteriormente se inocularon con Fusicladium oleagineum siguiendo el procedimiento descrito en el Objetivo 1. La evaluación de la enfermedad se realizó como se indica en dicho objetivo. Se incluyeron plantones tratados con oxicloruro de cobre comercial y plantones tratados con sulfato de cobre puro, a modo de referencia (Tabla 2). 3

5 RESULTADOS Objetivo 1.- Se observó un efecto preventivo significativo de todos los productos evaluados. Los productos más efectivos fueron el sulfato de cobre puro y Syllit, que redujeron el Índice de Enfermedad en un 97 y 99% respecto al testigo, respectivamente. Ambos productos difirieron significativamente del oxicloruro de cobre comercial, que redujo dicho parámetro en un 71% respecto al testigo (Tabla 3; Tabla A1). El producto Syllit, al igual que el sulfato de cobre puro, mostraron además un notable efecto curativo, efecto que no mostró el oxicloruro de cobre comercial. El producto Syllit fue el más efectivo, ya que redujo el Índice de Enfermedad en un 95% en el tratamiento posterior a la inoculación, difiriendo significativamente del sulfato de cobre que redujo dicho parámetro en un 64% respecto al testigo (Tabla 3; Tabla A1). Tabla 3. Efecto de los fungicidas evaluados sobre el Índice de Enfermedad en plantones inoculados artificialmente con Fusicladium oleagineum (1) Índice de Enfermedad (%) Productos Efecto preventivo (2) Efecto curativo (2) Testigo 61.9 a 61.9 a Oxicl. Cu 17.7 b 66.5 a Sulfato Cu 1.7 c 21.9 b Syllit 0.2 c 2.9 c (1) La inoculación de los plantones se realizó pulverizando los plantones con una suspensión conidial del patógeno, ajustada a 10 5 conidios/ml. (2) Se evaluaron el efecto preventivo y curativo de los productos de forma independiente, aplicando los productos 4 días antes (preventivo) y 4 días después (curativo) de la inoculación. (3) Valores medios de 6 plantones por combinación experimental. En cada columna, medias seguidas de la misma letra no difieren significativamente según el test de Tukey protegido de Fisher (P=0.05). 4

6 Objetivo 2.- El producto Syllit mostró un efecto similar al del oxicloruro de cobre comercial incluido a modo de referencia (Tabla 4; Tabla A2). En este ensayo no se incluyó testigo sin tratamiento fungicida, debido al alto riesgo de defoliación de los árboles. Tabla 4. Efecto de los fungicidas evaluados sobre el Índice de Enfermedad en olivos en campo Productos Índice de Enfermedad (%) Oxicl. Cu 12.0 a (1) Syllit 7.2 a (1) Valores medios de 100 hojas por parcela elemental. Diseño experimental en bloques al azar con cuatro repeticiones por producto. En cada columna, medias seguidas de la misma letra no difieren significativamente según el test LSD protegido de Fisher (P=0.05). 5

7 Objetivo 3.- El producto Syllit mostró una persistencia similar a la del oxicloruro de cobre comercial incluido a modo de referencia. En ambos tratamientos de lavado, 50 y 180 litros, el produto Syllit mostró el menor valor de Índice de Enfermedad, reduciendo dicho parámetro respecto al testigo en un 95 y 66%, respectivamente (Tabla 5; Tabla A3). En ninguno de los dos tratamientos de lavado llegó a diferir del oxicloruro de cobre. El sulfato de cobre puro, debido a su mayor solubilidad, resultó el producto con menor persistencia en ambos tratamientos. En el tratamiento con 180 litros de lavado, el valor de IE correspondiente al sulfato de cobre no llegó a diferir del testigo, indicando una pérdida prácticamente total del cobre tras dicha cantidad de lluvia simulada (Tabla 5; Tabla A3). Tabla 5. Efecto de los fungicidas evaluados sobre el Índice de Enfermedad en plantones sometidos a tres regímenes de lavado por lluvia simulada e inoculados artificialmente con Fusicladium oleagineum (1) Índice de enfermedad (%) Regímenes de lavado (2) Productos 0 l/m 2 50 l/m l/m 2 Testigo 61.9 a (3) 61.9 a (3) 61.9 a (3) Oxicl. Cu 15.4 b 16.7 bc 29.4 b Sulfato Cu 1.7 c 21.4 b 55.4 a Syllit 0.6 c 2.7 c 21.0 b (1) La inoculación de los plantones se realizó pulverizando los plantones con una suspensión conidial del patógeno, ajustada a 10 5 conidios/ml. (2) Plantones sometidos a 3 regímenes de lavado (0, 50 y 180 l/m 2 ) en simulador de lluvia. (3) Valores medios de 6 plantones por combinación experimental. En cada columna, medias seguidas de la misma letra no difieren significativamente según el test de Tukey protegido de Fisher (P=0.05). 6

8 CONCLUSIONES - Se ha observado un notable efecto preventivo del producto SYLLIT frente a la infección por Fusicladium oleagineum, superior incluso al oxicloruro de cobre comercial de referencia, cuando se aplicó 4 días antes de la inoculación artificial en plantones de olivo. - El producto SYLLIT mostró además un significativo efecto curativo frente a la infección, cuando se aplicó 4 días después de la inoculación. Este efecto no se observó en el oxicloruro de cobre comercial. Este efecto puede suponer una ventaja frente a los productos cúpricos, ampliamente utilizados en el control del Repilo del olivo, ya que éstos son en su mayoría de naturaleza eminentemente preventiva. - En la evaluación realizada en campo el producto Syllit ha mostrado un efecto similar al de un oxicloruro de cobre comercial. Estos datos son preliminares y corresponden a la evaluación de la enfermedad realizada tras un año de utilización del producto (tres aplicaciones). - El producto Syllit mostró una notable persistencia o resistencia al lavado por lluvia. Tras 50 y 180 litros de lavado por lluvia simulada, logró reducir la infección de forma similar al oxicloruro de cobre comercial utilizado como referencia. BIBLIOGRAFÍA Analytical Software Statistix 9. User s manual. Thallase, Florida. 397 pp. López-Doncel, L.M., Viruega, J.R., Trapero, A Respuesta del olivo a la inoculación con Spilocaea oleagina, agente del Repilo. Bol. San. Veg. Plagas, 26: Zarco, A.; Viruega, J.R.; Roca, L.F.; Trapero, A Detección de las infecciones latentes de Spilocaea oleagina en hojas de olivo. Bol. San. Veg. Plagas, 33:

9 ANEJO Tabla A1. Análisis de la varianza del Índice de Enfermedad en plantones tratados con fungicidas e inoculados de forma artificial con Fusicladium oleagineum Tratamiento preventivo Completely Randomized AOV for IE Prod Error Total Grand Mean CV Homogeneity of Variances F P Levene's Test O'Brien's Test Brown and Forsythe Test Welch's Test for Mean Differences Source DF F P Prod Error 9.1 Component of variance for between groups Effective cell size 6,0 Tratamiento curativo Completely Randomized AOV for IE Prod Error Total Grand Mean CV Homogeneity of Variances F P Levene's Test O'Brien's Test Brown and Forsythe Test Welch's Test for Mean Differences Source DF F P Prod Error 9.7 Component of variance for between groups Effective cell size 6,0 8

10 Tabla A2. Análisis de la varianza del Índice de Enfermedad en olivos en campo tratados con fungicidas y sometidos a infección natural Randomized Complete Block AOV Table for IE Bloque Productos Error Total 7 Note: SS are marginal (type III) sums of squares Grand Mean CV Tukey's 1 Degree of Freedom Test for Nonadditivity Nonadditivity Remainder Relative Efficiency, RCB 1,14 9

11 Tabla A3. Análisis de la varianza del Índice de Enfermedad en plantones de olivo sometidos a tres regímenes de lavado por lluvia simulada e inoculados artificialmente con Fusicladium oleagineum. Lavado: 0 litros/m 2 Completely Randomized AOV for IE Prod Error Total Grand Mean CV Homogeneity of Variances F P Levene's Test O'Brien's Test Brown and Forsythe Test Welch's Test for Mean Differences Source DF F P Prod Error 10.2 Component of variance for between groups Effective cell size 6,0 Lavado: 50 litros/m 2 Completely Randomized AOV for IE Prod Error Total Grand Mean CV Homogeneity of Variances F P Levene's Test O'Brien's Test Brown and Forsythe Test Welch's Test for Mean Differences Source DF F P Prod Error 10.0 Component of variance for between groups Effective cell size 6,0 10

12 Lavado: 180 litros/m 2 Completely Randomized AOV for IE Prod Error Total Grand Mean CV Homogeneity of Variances F P Levene's Test O'Brien's Test Brown and Forsythe Test Welch's Test for Mean Differences Source DF F P Prod Error 10.6 Component of variance for between groups Effective cell size 6,0 Effective cell size 6,0 11