VITRIFICACIÓN DE OVOCITOS Y ORGANIZACIÓN DE UN BANCO
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- Aurora Romero de la Cruz
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1 VITRIFICACIÓN DE OVOCITOS Y ORGANIZACIÓN DE UN BANCO Inmaculada Navarro Sanz Bióloga de IMER En los últimos años se ha acrecentado considerablemente la demanda de criopreservación de ovocitos, por diferentes motivos: - Preservación de la fertilidad, la mujer puede decidir cuándo quiere ser madre, pacientes oncológicas previo quimioterapia - Programas de ovodonación - Imposibilidad del varón de recoger la muestra de semen tras la captación de ovocitos de su pareja Por este motivo los laboratorios de Reproducción Asistida hemos tenido que desarrollar un método rápido y eficaz para la criopreservación de ovocitos con alta tasa de supervivencia. El método utilizado en IMER es el desarrollado por K itazato en el año (K ato ladys clinic; T okyo, Japan; J. assit Reprod Genet,2000. RBM online 2005) PROTOCOLO 1. A signación de la donant e al pr ogr am a de donación de ov ocit os dent r o del B anco de Tejidos. El responsable del Programa de D onación de O vocitos es el encargado de adscribir las donantes, a uno de los siguientes supuestos dependiendo de las características de la donante, y las necesidades asistenciales de cada momento: D onación de ovocitos en fresco para parejas Receptoras incluidas en nuestro programa de recepción de ovocitos, y que estén en tratamiento. Programa de D onación para el Banco de Tejido de nuestro C entro. El responsable informa al laboratorio de Embriología del destino de los ovocitos de cada D onante cuando se programa la Punción folicular, para que el laboratorio prepare los ovocitos atendiendo a su destino.
2 2. C ódigo par a la donación. El responsable del Banco de Tejidos asigna un C ódigo a cada donación e informa de él al laboratorio con el siguiente formato: O VO - N X X XX -IMER-XX D onde XXXX proviene de la parte numérica del C ódigo que tiene asignado esa D onante dentro del Programa de D onación de O vocitos, y la N indica el número de aportación de esta D onante al Banco de Tejidos. Por otro lado, las XX del final del C ódigo hacen referencia al número de D onación, en general, dentro del total del Banco de ovocitos. Ejemplo: O VO IMER-17: la D onante con C ódigo X XXX-0324 estaría realizando su segunda aportación al Banco de Tejidos, y sería la muestra número 17 del cómputo global del Banco. 3. R egist r o de la donación. En el Laboratorio de FIV el registro de cada acto de donación se realiza por duplicado. a) Realizamos un registro informático de todos los datos, dentro del mismo archivo de Excel en el que se registran todas las punciones realizadas en el año. Dentro de este libro, tenemos una hoja Excel con el nombre: Banco de O vocitos donde se anota: N º FIV: número de punción en el año N ombre: nombre de la donante C ódigo: código asignado a la donante dentro del Programa de D onación de O vocitos Nº de ovocitos obtenidos N º ovocitos vitrificados. N º cryotops: número de cryotops usados. C olor: color de los cryotops. C ódigo del Banco de O vocitos: O VO -XXXX -IMER-X X asignado a cada donante. N º ovocitos/cryotops: se especifica cuantos ovocitos se han criopreservado en cada cryotop. Por otro lado, se registra también con un informe impreso que se almacena en un archivador ordenado alfabéticamente por el nombre de la D onante.
3 4. P r oceso de v it r ificación. Una vez captados los ovocitos en la punción folicular son incubados hasta el momento de la denudación, que una vez realizada nos permitirá su clasificación. Solo aquellos ovocitos que se encuentren en estadio Metafase II podrán ser vitrificados. El proceso de vitrificación se realizará mediante el protocolo de vitrificación-desvitrificación: K itazato VT 801-TO P vitrification K itazato VT 802-K IT thawing 5. Ident ificación de las m uest r as: Los ovocitos se vitrifican en C ryotops. C ada C ryotop va rotulado doblemente con el C ódigo de la D onación al Banco de ovocitos, tanto en la cubierta externa como en el mango del C ryotop.
4 Para ello utilizamos una Label Printer BMP 21-PLUS (Brady). 6. A lm acenam iento de m uest r as en el banco de ov ocit os. Los ovocitos vitrificados son almacenados en el interior de una bombona de N itrógeno líquido modelo GT -40 (BO MBO N A F). Los datos de cada donación quedan registrados en el D ocumento C riopreservacion de O vocitos que hemos adjuntado en el punto 3b. En este punto del proceso añadimos la localización de la muestra dentro de la Bombona de almacenamiento, especificando: Bombona F C anister: que van del 1 al 10. Margarita: A (superior) o B (inferior) C olor: color del quesito interior (N aranja, Rojo, Azul claro, Azul oscuro, N egro, Verde, Marrón, Gris, Morado, Amarillo, Rosa y C entro) D e igual modo, ésta localización de las muestras queda registrada informáticamente en nuestra aplicación informática para la gestión de historias clínicas de pacientes, que utilizamos en IMER, dentro del apartado Almacenes Almacén material biológico bombona F. 7. E nvíos ov ocitos v it r ificados del B anco de ovocit os a ot r os cent r os R egist r o: El responsable del Programa de D onación informa al laboratorio de los C ódigos que van destinados a cada envío, así como el C entro de D estino de las muestras criopreservadas. C on esa información al Laboratorio realiza un informe, que ira en el interior de la bombona de transporte, en el que se especifica: C ódigo de identificación de los C ryotops N º de cryotops. C olor de los C ryotops. N º ovocitos/cryotop. Ubicación dentro de la Bombona de transporte: C anister A o B, Posición 1,2 o 3. En el informe aparece un esquema grafico del interior de los canisteres, que describe perfectamente las posiciones existentes. Las bombonas de transporte utilizadas con las Voyager 2 en el interior de una Protecting shipping case (AC C -VO Y -100).
5 7.2. D ocum entación t r anspor t e. T al y como establece el RD 1301/2006 nuestro C entro tiene un contrato de Prestación de Servicios con una empresa especializada en el transporte de muestras biológicas. Para el envío, procedemos al etiquetado del contenedor externo de transporte. Esta etiqueta contendrá, al menos, la siguiente información: A. Identificación del establecimiento de tejidos de origen, incluyendo la dirección, el teléfono y la persona de contacto. B. Identificación del centro destino, incluyendo la dirección, el teléfono y la persona de contacto. C. La constatación de que el paquete contiene células humanas y que debe ser manejado con cuidado. D. C omo se envían células vivas y el mantenimiento de la viabilidad es básico para el éxito del tratamiento, añadimos en un lugar bien visible el anuncio de: «N O IRRAD IAR». E. Recomendaciones para las condiciones de transporte (posición, temperatura etc.). F. Instrucciones de seguridad propias de este tipo de envíos. A su vez, el contenedor externo va sellado con unas bridas de seguridad (PRO MET AL) que llevan un código. Ese código se envía al C entro Receptor de las muestras por mail. Valencia noviembre 2015
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