1. EXTRACCIÓN DE TEJIDO PARA ANÁLISIS DE ADN

Transcripción

1 1. EXTRACCIÓN DE TEJIDO PARA ANÁLISIS DE ADN L - - o buenhacer del personal encomendado a la extracción y transporte de esta. Se ha admitida como prueba en un tribunal, por lo que se han de elaborar una serie de en algunos supuestos el juez instructor del caso pueda requerir la colaboración de adecuada para el desempeño de estas funciones, por lo que es recomendable el 1.1. Zonas de extracción de la muestra 13

2 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Muestras en personas vivas Sangre. Pelos con raíz Muestras en personas transfundidas Muestras en cadáveres en buen estado de conservación Sangre post mortem procediendo a pinchar en la yema del dedo con lo cual se puede extraer unas 3-4 gotas de aproximadamente 0,1 cm 3 la muestra debe ser similar a una moneda. Esta muestra se debe dejar secar al menos durante 1 hora al aire libre sin exponer a la luz solar. La palpar el tercero y el cuarto, y a esta altura, a 2 centímetros del reborde intercostal punzar con aguja raquídea 18 G. Ir retirando y aspirando hasta que la sangre comience a entrar en la jeringa. Si la sangre aún no se ha coagulado, se debe añadir anticoagulante EDTA en una Ambas muestras se recogen en tubos o jeringas perfectamente rotulados con tinta 14

3 EXTRACCIÓN DE TEJIDO PARA ANÁLISIS DE ADN posible al laboratorio para su procesamiento Músculo-esquelético No existe preferencia a la hora de escoger el músculo o músculos que son los idóneos para la toma de muestra. Se elige este tipo de tejido por ser, junto con el músculo piezas dentales, si es posible molares, y siempre que no se le haya practicado una C) Pelos el bulbo o raíz, por lo que para su recogida se deben arrancar y nunca deben ser cortados; lo idóneo es recoger al menos 20 pelos con bulbo. Estos se introducen D) Muestras vaginales o anales que el resto de muestras. Debido a la cantidad de contaminantes presentes en esta 15

4 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Muestras en cadáveres carbonizados A pesar de lo que la apariencia externa pueda indicar, y en contra de la creencia de zonas profundas, debido a que el fuego y las altas temperaturas eliminan las bacterias causantes de la putrefacción; así pues, los tejidos se esterilizan de zonas profundas y de la sangre semisólida que permanece Si la carbonización es total, lo recomendable es ponerse en contacto con el Muestras en cadáveres en avanzado estado de putrefacción o esqueletizados Hueso de húmero de unos cm, ya que los huesos de elección son los huesos largos. realizarse inmediatamente. ambiente durante al menos un día y colocar los restos en una bolsa o un recipiente Si no es posible disponer de esta muestra, lo recomendable es ponerse en contacto 16

5 EXTRACCIÓN DE TEJIDO PARA ANÁLISIS DE ADN Dientes Se seleccionan al menos cuatro piezas dentales, si es posible molares, que no Muestras en cadáveres embalsamados Otras muestras de referencia en personas fallecidas es posible analizar obtención de resultados. es posible analizar muestras que contengan restos biológicos del fallecido, tales como sobres maquinillas de afeitar, peines, cepillos, etc. que puede ser parte interesada en el proceso judicial Materiales Guantes. 17

6 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Mascarilla. Bata. Papel Whatman 3 mm o similar. Jeringas, 2 ml, 3 ml, 5 ml y 10 ml. Agujas. EDTA. Sobres de papel. Sobres acolchados. Marcador indeleble. Etiquetas Embalaje refrigerado para el traslado de la muestra al laboratorio es fundamental, ya que los indicios biológicos, especialmente los de los indicios al laboratorio sea correcto. 18

7 EXTRACCIÓN DE TEJIDO PARA ANÁLISIS DE ADN El número de referencia de la muestra. Nombre de la persona a la que se realiza la toma o código elegido para un frasco con etanol se tapa y se procede agitarlo; tras esto el etanol debe ser temperatura ambiente durante 7 días. Dejar secar a temperatura ambiente durante, al menos, un día y colocar que desprenden estas piezas, se recomienda congelar a las temperaturas anteriormente descritas. A modo general, las muestras que en el momento de su recolección han sido refrigeradas 19

8 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Las que no fueron ni refrigeradas ni congeladas deben trasladarse a temperatura así el contacto con otros líquidos que pudieran perturbar la muestra. 20

9 UNIDAD FORMATIVA 2: ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS 2.1. Anatomía del globo ocular 2.2. Desinfección e hidratación 2.3. Extracción del globo ocular 2.4. Recipiente húmedo para colocación del globo y su 2.5. Embalaje refrigerado para traslado al banco de córneas 2.6. Colocación de prótesis ocular 21

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11 2. ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS 2.1. Anatomía del globo ocular 23

12 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Proteger y proporcionar soporte de fotorreceptores. que la componen se encuentran desorganizadas; se encarga de proteger el contenido intraocular y proporciona cierta resistencia al globo ocular. delante sobrepasando el ecuador del ojo. Esta porción se conoce como coroides por su parecido macroscópico con el corion placentario. Cuerpo ciliar acuoso en los procesos ciliares. Iris central, la pupila a la intensidad de luz ambiental. Coroides, cuerpo ciliar e iris forman una capa conocida como La 24

13 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS compuesto fundamentalmente por agua, libremente intercambiable con retina permite el paso de la luz hacia esta. media de la zónula de Zinn que transmite la contracción o relajación muscular El El es la piel que recubre el frontal y el maxilar, que al llegar al reborde, la cual se repliega en la profundidad de ambos de la esclerótica, hasta el limbo corneoescleral donde termina. La 25

14 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver 2.2. Desinfección e hidratación de Pterigion que comprometa parte de la córnea, etc. Para realizar una adecuada desinfección e hidratación, se han de abrir cuidadosamente retirando todos los restos de secreciones y material extraño del saco corneal y extraños bajo los parpados, así como la contaminación microbiana. No debe entrar sustancia alguna en contacto con el ojo, ya que podría dañar la córnea. En el caso de proceder a la enucleación, deben estar preparados dos recipientes Si se realiza la escisión 26

15 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS 2.3. Extracción del globo ocular Criterios Las peculiaridades anatómicas de la córnea, especialmente la ausencia corneal sea diferente a otros con el objeto de trasplante. cualidad y calidad endotelial del tejido corneal. Muerte de causa desconocida. Ingestión de una sustancia tóxica o exposición a ella, que pueda ser transmitida en una dosis tóxica a los receptores del tejido. Exclusión de córneas sometidas a IQ por miopía. 27

16 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Se excluyen las córneas de donantes con 6-8 horas horas Diabetes mellitus incontrolable, con afección ocular secundaria. Neoplasmas. Ictericia escleral. Hemorragia escleral. de este tipo de cirugía, así como proteger de enfermedades al posible receptor. causa de la muerte Edad del donante para el trasplante independientemente de su edad, aunque en algunos hospitales solo son aceptadas las de donantes menores de 60 años por protocolo. córnea donante para trasplante. idóneas para la donación. 28

17 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS Donación y obtención de tejido ocular donante potencial. en la historia clínica del donante. la autorización de la autoridad legal competente antes de la extracción. ajeno al equipo de trasplante. procedente de la donación. Revisión de la historia clínica Causa de muerte y factores asociados. Tiempo aceptable de extracción. Se consideran aceptables para proceder 29

18 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver sido refrigerado. Preparación del donante estado es muy pequeña. desecación del epitelio antes de la enucleación. contacte entonces la gasa con el epitelio corneal. Acciones antes de la extracción Establecer el consentimiento. Completar todos los requisitos legales. con el nombre del fallecido. 30

19 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS encuentren intactos. Extracción 10 en la tapa y luego usar unas pinzas mosquito para colocar dos gasas de algodón de 5 x 5 como protector acolchado en cada uno. posible en los 360 grados alrededor de la córnea cuidadosamente, ya que una gran tracción puede causar pliegues y sufrimientos de la córnea, por lo que se aconseja se realice con la menor tensión posible. En donantes con órbitas pequeñas, como en los niños o muy ancianos, usar un blefarostato cuatro cuadrantes para facilitar el acceso a los músculos oculares. rectos y se seccionan cerca de su inserción. En caso de no cortar el recto lateral, tomar con una pinza mosquito cerca de su inserción y utilizarlo para guiar el globo, localizar el oblicuo mayor y el menor y separarlos como los otros músculos en el caso en el que no se hubieran cortado ya con los músculos rectos. 31

20 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver arriba y dejando un remanente de 3-6 mm unido al globo con cuchara. Debe tenerse cuidado de no tocar la córnea con ningún instrumento y mantenerse la forma del globo ocular sin alterar la presión intraocular. globo de la órbita, cortando los tejidos residuales con la tijera de enucleación. Hay que ser cuidadoso para no cortar ninguna pestaña en este momento. procedimiento se ha terminado y se puede irrigar. Irrigar con solución nunca el ojo sumergido en el líquido Registros del donante Formulario de consentimiento de la donación. Resultados de las pruebas de laboratorio y otras pruebas realizadas si las hubiera. 32

21 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS expediente. a cabo. comienzo de refrigeración, y hora de traslado al lugar de extracción. Lugar de extracción, equipo que la realiza y persona encargada. Grado de asepsia. el lote, la fecha de expiración, la temperatura, la cantidad, la concentración Injertos obtenidos y características pertinentes. Destino del tejido Empaquetado y distribución 33

22 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver Características del tejido. Número de lote. Datos morfológicos y funcionales. Fecha de distribución del tejido. Determinaciones serológicas realizadas al donante y sus resultados. Recomendaciones para el almacenamiento. manipulación necesaria Fecha de expiración tras la apertura o la manipulación Contenedor Es tejido humano Distribución 34

23 ENUCLEACIÓN DEL GLOBO OCULAR PARA BANCO DE CÓRNEAS a su distribución Transporte adecuadas Embalaje refrigerado para traslado al banco de córneas Método de conservación a corto plazo: cámara húmeda de la córnea Métodos de conservación a mediano plazo Implican la necesidad en todos los casos de practicar la extracción completa de la córnea con un margen escleral de 1 mm a partir del globo ocular del donante. 35

24 Extracciones de tejidos, prótesis, marcapasos y otros dispositivos contaminantes del cadáver 2.6. Colocación de prótesis ocular su totalidad o parte de este, en personas que han sufrido algún traumatismo, su fabricación se realiza a partir de un su espesor es delgado. Son usadas en hundimientos oculares, puesto que en estos casos el ojo permanece, aunque retraído. se usan de manera transitoria hasta la colocación de una La toma de medidas se puede realizar mediante si se requiere un resultado satisfactorio., haciendo una la consistencia necesaria para mantener la forma del globo ocular que falta. 36