BioCapture Bacterial DNA

Transcripción

1 Descripción: BioCapture Bacterial DNA BioCapture Bacterial DNA es un kit para extracción y purificación magnética de DNA de bacterias y protozoos. Incluye los reactivos necesarios listos para usar. BioCapture Bacterial DNA es una tecnología novedosa, sencilla y eficiente, para aislar ácidos nucleicos en cuatro pasos básicos: lisis, extracción / binding, lavado, elución. Bajo la acción de detergentes y un medio desnaturalizante se solubilizan los ácidos nucleicos e inactivan las proteínas que pueden degradar el material. Con el buffer de extracción, los ácidos nucleicos se unen en forma específica al recubrimiento de sílica de la resina magnética de BioCapture Bacterial DNA. Luego de una serie de lavados, los ácidos nucleicos purificados se extraen y concentran en el buffer de elución, listo para su uso. Para estas operaciones se utiliza un separador magnético tipo rack (*). Componentes Separador magnético (para 6 eppendorf / 6 tubos 15 ml) 1) Proteinasa K (1 ml, 20 mg/ml) 2) Buffer de lisis (25 ml) 3) Buffer de extracción / binding (25 ml) 4) Resina magnética (2 ml) 5) Buffer de lavado (60 ml) 6) Buffer de elución (5 ml) Presentación: 50 reacciones (*) no incluido en el kit, cod Esquema general del protocolo de extracción

2

3 Protocolo Objetivo: aislamiento de ácidos nucleicos totales de una muestra de cultivo bacteriano. 1. Transferir de 100 µl de material de cultivo y agregar 100 µl de buffer de lisis y 10 µl de proteinasa K y colocar a baño maría durante 20 min (**). 2. Adicionar dos volúmenes de buffer de extracción / binding y 20 µl de resina magnética previamente homogeneizada. Agitar en vórtex y dejar reposar 5 minutos. 3. Colocar el microtubo en el separador magnético, esperar que la resina magnética se adhiera a la pared central del separador, aspirar cuidadosamente el sobrenadante con micropipeta y descartar. 4. Retirar el microtubo del separador magnético, adicionar 600 µl de buffer de lavado y homogeneizar en vórtex. Colocar en rack y retirar el sobrenadante una vez que la resina se haya adherido a la pared lateral. Repetir el paso nuevamente. 5. Finalmente, retirar el microtubo del separador magnético, dejarlo en reposo con tapa abierta durante 5 minutos entre 15 C y 30 C. 6. Adicionar 50 μl de buffer de elución y homogeneizar en vórtex, dejar reposar 5 minutos. Colocar el microtubo en el separador magnético y esperar que la resina se haya adherido a la pared lateral. Transferir a un nuevo tubo el sobrenadante con el material purificado. (**) parámetros de referencia, pueden requerir ajustes según el material de partida. Resinas de purificación Magnacryl HI - Purificación por interacción hidrofóbica Resina acrílica para purificación de compuestos hidrofóbicos mediante separación magnética. Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo. Referencias tecnológicas 1) Purification of monoclonal antibodies by hydrophobic interaction 2) Theory and use of hydrophobic interaction in protein purification applications 3) Manipulation of hydrophobic interactions in protein adsorption

4 Magnacryl Dye - Purificación por afinidad con colorantes Resina acrílica para purificación de proteínas por afinidad con colorantes mediante separación magnética. Versión correspondiente para cada colorante. Producido en Argentina. HE-3B (CI Reactive Red 120): para enzimas NADP+ dependientes, dehidrogenasas, monooxigenasas, reductasas, sintasas, HE-4BD (CI Reactive Green 19): para separación de fracciones de IgG de suero. Rosa Bengala: para unión a BSA y para estudio de daños fotooxidativos. Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo. Referencias tecnológicas 1) Purification of neutral protease by dye affinity chromatography 2) Immunoenzymatic assay of dyes currently used for protein purification 3) Dye-ligand affinity systems Magnacryl IMAC - Purificación por afinidad con metales pesados Resina acrílica para purificar proteínas con His-tag o ácidos nucleicos de cadena simple mediante separación magnética. Posee ácido imino-diacético (IDA) como ligando que permite unir metales pesados (Cobre, Níquel, Zinc y Cobalto) y así retener de manera diferencial para luego lavar y eluir en un protocolo sencillo. Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo. Referencias tecnológicas 1) Purification of Proteins Using Polyhistidine Affinity Tags 2) Immobilized-Metal Affinity Chromatography (IMAC) - A Review 3) IMAC as a Technique for IgG1 Monoclonal Antibodies Purification 4) Nucleic Acid Separations Utilizing Immobilized Metal Affinity Chromatography Rack de separación magnética Práctico para operaciones de rutina en protocolos con partículas magnéticas: capacidad para seis microtubos de 1.5 / 2.0 ml, y seis tubos de 15 ml material plástico de alta resistencia mecánica y durabilidad soporta temperaturas entre -40 C y 90 C dos imanes de Neodimio por cada posición

5 Quick-Zol - Purificación de RNA Reactivo para extracción ARN total a partir de células y tejidos (sólidos o líquidos). Quick-Zol está optimizado para la obtención de ARN celular de gran integridad y pureza, libre de contaminación de DNA y proteínas. El ARN purificado puede ser utilizado para estudios de Northern blot, poly (A)+ selection, traducción in vitro, RNAse protection y clonado, entre otros. Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo. Biolumina Reactivo Quimioluminiscente Reactivo quimioluminiscente para la detección de antígenos específicos inmovilizados. Utiliza anticuerpos marcados con Horseradish Peroxidasa (HRP). Producido en Argentina. Alta sensibilidad: Sistema de detección más sensible que los sistemas colorimétricos. Alta resolución: presenta un alto contraste en la señal generada. Rapidez: La proteína específica puede ser revelada en menos de un minuto de exposición. Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo. G-Microparticles Partículas de vidrio pretratadas, listas para usar. G-Microparticles tiene aplicación general en Biología Celular y Molecular en protocolos de lisado de organismos con pared celular resistente, como plantas, hongos y levaduras. Se adicionan al buffer de lisis usual. Es el paso previo a la extracción de proteínas, DNA y RNA. G-Microparticles se ofrece en dos presentaciones, 30 gr y 60 gr, y en tres rangos de tamaño para mejor adaptación a la necesidad de cada protocolo: 1) large, de 180 a 425 µm (0140-L) 2) medium, de 100 a 200 µm, (0140-M) 3) small, de 50 to 100 µm, (0140-S) Características de las micropartículas Pre tratadas, lista para usar De superficie neutra (ph 7) Producido en Argentina, sólo aplicable a investigación y desarrollo

6 Investigación y Desarrollo Transformar Conocimiento en Aplicaciones - technology@kaliumtech.com - Copyright Kalium Technologies