TABLETAS ROSCO PARA DETECCION
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- César Juárez Serrano
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1 VII Congreso de la Sociedad rgentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas SDEBC 2012 EVLUCIÓ DEL DESEMPEÑO O DE LS TBLETS ROSCO PR DETECCIO SIMULTE DE β-lctmss TIPO MPC Y β-lctmss DE ESPECTRO EXTEDIDO. RPOPORT, M; PSTER, F; LUCERO, C; VELIZ, O; CORSO,. Servicio ntimicrobianos, IEI LIS Dr. C. G. Malbran rapoport@anlis.gov.ar Vakgraun
2 Introducción La detección de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE), β-lactamasas tipo mpc (mpc-c o mpc-p) son parte de la rutina de los laboratorios de microbiología, y esta detección es crucial para guiar el tratamiento y evitar su diseminación Resistencia a C3G: islamientos de infecciones intrahospitalarias Red WHOET-rgentina 2010 E. coli 18% K. pneumoniae 63% E. cloacae 50% Esta resistencia a que mecanismos se asocia? diferencia de lo que ocurre para enterobacterias productoras de BLEE, la detección de enzimas tipo mpc plasmídico (mpc-p) no se encuentra estandarizada en ninguna normativa
3 OBJETIVO EVLUR EL DESEMPEÑO DE LS TBLETS ROSCO TM COMBIDS PR L DETECCIO DE β-lactamasas TIPO mpc Y β-lactamasas DE ESPECTRO EXTEDIDO E ETEROBCTERIS
4 Materiales y métodos Placa de gar Mueller-Hinton inoculada con una suspensión bacteriana equivalente al 0,5 de Mc Farland, donde se colocan las 4 tabletas ROSCO eo-sensitabstm (Rosco Diagnostica /S, Dinamarca): 1. Cefotaxima 30μg (CTX) 2. Cefotaxima 30μg + c. Clavulanico (CTX+C) 3. Cefotaxima 30μg + Cloxacilina (CTX-CX) 4. Cefotaxima 30μg + c. Clavulanico + Cloxacilina (CTX-CC) Se incuba en aerobiosis por 16-18hs; lectura de las zonas de inhibición. ITERPRETCIO Δ CTX+C CTX 5mm o Δ CTX-CC CTX-CX 5mm Δ CTX-CX CTX 5mm o Δ CTX-CC CTX+C 5mm Δ CTX-CC CTX-CX 5mm y Δ CTX-CC CTX+C 5mm BLEE mpc BLEE + mpc
5 Ejemplos de Interpretación de Resultados Salmo 5158 MOX Δ CTX-CX CTX = 10 Δ CTX-CC CTX-CX = 4 Pmi 9207 Δ CTX-CX CTX = 7 Δ CTX-CC CTX-CX = 0 GR16 PER-2 Δ CTX+C CTX = -2 Δ CTX-CC CTX-CX = 16 (efecto sinergia) Salmo CTX-M Δ CTX-CC CTX-CX = 14 Δ CTX-CC CTX+C = 7 Eco PER Δ CTX-CC CTX-CX = 6 Δ CTX-CC CTX+C = 12
6 Resultados ID ro Mecanismo Ensayo +B ID ro Mecanismo Ensayo +B 9757 TCC SHV-18 B Pmi# 9629 Eco 5306 TEM-19 Pmi# GR16 PER +B Pmi 9207 PL4 CTXM B Pmi CTXM+PER+imperm S.boydii Kox FLE17 PER B S.flexnerii mpc derrep+imperm S.sonnei KPC Salmonella Cfr GUT8 Eco Sma CE31 Salmonella 5158 MOX HMI MOX Mmo POSB H.alvei 7782 CC Pst FOX-5 Salmonella DH S. flexnerii DH Eco TCC Eco PER +B Cko 7522 Salmonella GUT18 +CTXM+imperm +CTXM MOX+CTXM CTXM+mpC +B B +B Ref. tabla: = mpc, B= BLEE, / = Wild Type / salvaje. = Klebsiella pneumoniae; Kox= K. oxytoca; Pmi= Proteus mirabilis; Eco= Escherichia coli; = Enterobacter cloacae; Cfr= Citrobacter freundii; Sma= Serratia marcescens; Mmo= Morganella morganii; Pst= Providencia stuartii; Cko= Citrobacter koseri. #Pmi productor de con cefoxitina sensible. HGC7 PER+mpC +B mpc-p mpc+blee BLEE : salvaje
7 Resultados y Conclusiones * Las ET salvajes no productoras de mpc y las productoras de otros mecanismos como KPC se agruparon correctamente como negativas para mpc y/o BLEE. * mpc-p fue detectado en 17/20 cepas: los tres falsos negativos correspondieron a una cepa productora de CC (mpc-p de bajo nivel), y a dos cepas con mecanismo combinado: +CTX-M+imperm con resultado negativo por causa de la impermeabilidad y MOX+CTX-M con resultado de BLEE unicamente (probable enmascaramiento de mpc-p por causa de la BLEE). * En el caso de las cepas productoras de BLEE, 9/12 se clasificaron correctamente: las 3 fallas de detección correspondieron a una cepa productora de TEM-19 (BLEE de bajo nivel), una con BLEE+impermeabilidad, y una con +CTX-M+imperm. * Las cepas productoras de mpc inducible se detectaron sin inconvenientes, excepto un C. freundii y una P. stuartii. El método evaluado resultó en un aceptable desempeño para la detección de mecanismos adquiridos y transferibles como mpc-p y BLEE de aislamiento frecuente en nuestro país. Las limitaciones correspondieron a mecanismos de baja prevalencia, cepas salvajes con altos niveles de sensibilidad y cepas multi-resistentes de compleja presentación fenotípica.
8 VII Congreso de la Sociedad rgentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas SDEBC 2012 Muchas gracias! Servicio ntimicrobianos, IEI LIS Dr. C. G. Malbran Vakgraun
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