Crecimiento bacteriano Prof. M.Leyla Gómez C. 28 de Marzo de 2011
Crecimiento sistemas biológicos: Incremento ordenado y coordinado de todos los componentes del sistema Crecimiento bacteriano Aumento en el número de células microbianas en una población determinada.
A escala individual los eventos del crecimiento hacen referencia al ciclo celular procariótico: Secuencia de acontecimientos identificables e interconectados.
Períodos del ciclo celular procariótico Fase C: Replicación del ADN Cromosómico (S de Eucariontes) Fase D: Su término coincide con la finalización de la división celular (G 2 + M de Eucariontes ). Fase innominada( G 1 de Eucariontes)
Ciclo celular procariótico Proceso de replicación Cromosómica y de plásmidos. Segregación de cromosoma y plásmidos a células hijas. Síntesis de nuevos materiales de las envolturas bacterianas. Proceso de división celular : formación del tabique o septum.
Crecimiento de la Pared Celular Ocurren dos procesos fundamentales: expansión o aumento de tamaño de la pared formación del tabique transversal o septo en el centro de la célula.
Biosíntesis del peptidoglican(pg)
1)NAG y NAM sintetizados por separado 2)Formación de NAM-Pentapéptido: L-ala D-glu L-lys D-ala-D-ala 3)NAM -Pentapéptido se transfiere a Bactoprenol 4)Bactoprenol-NAM(Pentapéptido)-NAG
Regulación El crecimiento del peptidoglican y formación del septo dependen de la actividad controlada y localizada de autolisinas. Autolisinas :transglucosidasa y/o transpeptidasa Estas enzimas son los sitios de acción de las penicilinas (PBP).
Síntesis de ácidos teicoicos Las subunidades completas de los ácidos teicoicos y teicourónicos se sintetizan en la membrana celular (en portadores lipídicos) antes de su transporte e inserción a la pared celular preexistente.
Síntesis del LPS El ensamblaje del lípido A se realiza en la membrana celular y los azúcares centrales se van uniendo secuencialmente. Polisacarido O Polisacarido Central Lípido A
Las subunidades del Ag O son sintetizadas independientemente sobre un portador lipídico. El Ag O sintetizado se une a la región central y al lípido A, generándose el LPS en la membrana celular antes de su paso e inserción a la membrana externa. El PG subyacente serviría de andamio facilitando el montaje de toda la estructura de la membrana externa.
Formación del tabique transversal o septum El comienzo de la tabicación requiere 2 señales: 1.- Término de replicación cromosomal y las copias hijas separadas en extremos opuestos. 2.-La célula debe haber alcanzado una longitud umbral.
Formación del tabique transversal o septum Poco antes de la división y bajo control del ciclo celular, proteína FtsZ se ensambla en la cara citoplasmática de la membrana celular y forma un anillo citocinético. Una vez que FtsZ ocupa el lugar del futuro septo, otras proteínas FtsZ forman un complejo llamado Divisoma.
Los polímeros de FtsZ se contraen tracccionando las envolturas bacterianas al interior,ftsz además activan autolisina específica de septum. La división de la bacteria por fisión binaria simétrica se logra gracias a la invaginación de la membrana celular y del peptidoglican en el centro de la célula madre.
Formación del Septum
Crecimiento Bacteriano Poblacional
Tiempo de generación
Tiempo de generación Escherichia coli : 17 minutos Staphylococcus aureus : 27-30 minutos Mycobacterium tuberculosis : 14 horas (792-932 minutos)
Cultivo Discontinuo (batch).
Cultivo Continuo Quimiostato
Cultivo Asincrónico. Cultivo Sincrónico
Métodos de Medición del Crecimiento Bacteriano Directos: Número de células bacterianas. Indirectos: Permiten estimar la Masa celular.
Métodos directos de recuento bacteriano Recuento en Cámara de Petroff-Hausser
Método directo-recuento viable
Nº de colonias bacterianas x Dilución= UFC microorganismo /ml de muestra
Métodos Indirectos de Medición del Crecimiento Bacteriano Medición de la Actividad Metabólica: Consumo o Producción de Metabolitos por unidad de tiempo:consumo de O 2,producción de CO 2,Acido. Peso Seco: Masa Microbiana Seca es 10-20% de la Masa húmeda bacteriana y 1mg de peso seco equivale a unas 5x10 9 bacterias.
Turbidometría
Curva de crecimiento bacteriano
Características de la fases de la Curva de Crecimiento Fase de Latencia: Adaptación,intensa actividad metabólica: síntesis de DNA, RNA,Enzimas, Proteínas. Duración depende del estado metabólico previo del inóculo y calidad del medio de cultivo original. Fase Exponencial: División bacteriana en progresión geométrica y constante.
Crecimiento críptico. Fase Estacionaria: Etapa de sobrevivencia Energía de mantención de barreras osmóticas. movilidad. reparar y resintetizar. Célula bacteriana degrada sus estructuras externas Genes SUR
Fase de Muerte o Declinación: Fase Logarítmica de Muerte. Disminución de Células Viables en Tasa Uniforme. Células grandes, hinchadas, distorsionadas, (formas fantasmas) Duración:Semanas o Meses,depende de la especie.
Fin de la clase