MEJORA DE PATRONES DE AGRIOS TOLERANTES A TRISTEZA

Proyecto Nº SC94-037 MEJORA DE PATRONES DE AGRIOS TOLERANTES A TRISTEZA Equipo Investigador: Valencia Juan Bautista Forner Valero (Dr. I.A.) Luis Fernandez de Córdova O Conor (I.T.A.) José Gallego Rodríguez (I.T.A.) Cataluña Soledad Verdejo Lucas (Dra. Far.) Juan Pons Mas (Dr. I.A.) Javier Sorribas Royo (Dr. C.B.) Ignacio Lliso Bernet (I.A.) Equivalente de jornada completa: 2,90 Centro de Investigación: Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias. (IVIA). Valencia. Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentaries. (IRTA). Cataluña. Duración: Coste: Enero 1994 - Diciembre 1997 Miles de pesetas: 14.946 Financiación INIA 100 % 1

PLANTEAMIENTO Y OBJETIVOS La presencia de tristeza en España obliga a utilizar patrones tolerantes a esta virosis, en las nuevas plantaciones y reposiciones de naranjo dulce, de mandarino y de pomelo. Los principales patrones tolerantes a tristeza, utilizados en nuestro país, son los citranges Troyer y Carrizo y el mandarino Cleopatra. En los últimos años, y como consecuencia de los estudios realizados en proyectos anteriores, también han adquirido cierta difusión el Citrus volkameriana Ten & Pasq., y el Swingle citrumelo CPB 4475. Sin embargo, el comportamiento agronómico de dichos patrones presenta determinadas sensibilidades específicas (sensibilidad a la caliza y a la salinidad de los citranges Troyer y Carrizo; sensibilidad a Phytophthora spp. del mandarino Cleopatra y del C. volkameriana; sensibilidad al nematodo de los cítricos de todos los patrones utilizados, a excepción de citrumelo 4475, etc), por lo que no es posible cubrir adecuadamente todas la situaciones presentes en nuestra citricultura. Este hecho, unido a la utilización incorrecta de los patrones, en muchos casos, explican la aparición de ciertos problemas en el campo (clorosis férrica, muerte de árboles por "dry root rot", crecimiento pobre en replantaciones, etc.) y la consiguiente inquietud entre los agricultores. Buena prueba de esta inquietud, es la utilización cada vez mayor, y a todas luces indeseable, que se está haciendo del Citrus macrophylla Wester, como patrón de variedades de naranjo dulce (Navelate) y de mandarino (Clementina Hernandina y Fortune); el uso de este patrón, sensible a tristeza y muy sensible al frío, puede destruir el mercado de variedades muy selectas, como el de la Navelate, debido a que reduce fuertemente la calidad de la fruta. Además este último patrón, que induce una rápida entrada en producción, da lugar a plantaciones de vida económica corta. Teniendo en cuenta la situación expuesta, se fijaron los siguientes objetivos: 1. Ampliar la gama de patrones tolerantes a tristeza, disponibles actualmente en España, mediante las siguientes líneas de trabajo: a) Obtención de híbridos entre genitores con los caracteres deseables, especialmente orientados a la consecución de patrones enanizantes o semienanizantes. b) Selección de tipos anormales entre los patrones conocidos. c) Introducción de nuevos patrones, parcialmente ensayados en el extranjero. d) Estudio de la posible resistencia a cepas de tristeza presentes en España, de patrones híbridos obtenidos en proyectos anteriores. e) Continuación del estudio de la tolerancia a tristeza de los híbridos ya plantados en la parcela experimental correspondiente (Cárcer) y establecimiento de una nueva parcela, en terrenos del IVIA con aquellos nuevos híbridos cuyo desarrollo permita su multiplicación y preparación de planta. f) Continuar los estudios de tolerancia a la salinidad de híbridos. g) Estudio de la reacción de los híbridos al nematodo de los agrios Tylenchulus semipenetrans. Identificación de biotipos de este nematodo. h) Determinación de índices y metodologías que permitan la evaluación precoz del carácter enanizante de nuevos patrones, en base al abundante número de híbridos procedentes de anteriores proyectos, y cuyo carácter enanizante o semienanizante es ya conocido. i) Continuar el control de las parcelas experimentales establecidas en proyectos anteriores, en diversas ecologías españolas, para el estudio del comportamiento agronómico de nuevos patrones híbridos, especialmente en lo que se refiere a su influencia sobre el vigor y tamaño final del árbol, productividad y calidad del fruto de las distintas variedades

injertadas. Establecimiento de nuevas parcelas experimentales si existen garantías de continuidad en la financiación. 2. Realizar estudios y observaciones de campo que permitan ir normalizando las condiciones de utilización de los nuevos patrones tolerantes a tristeza que se multiplican comercialmente (Citrumelo 4475, Citrus volkameriana, etc.). RESULTADOS Se han obtenido 37 nuevos híbridos de mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata. Se han seleccionado 24 tipos anormales en semilleros de patrones comerciales. Uno de ellos, procedente de citrange Carrizo, es tetraploide, mientras que los restantes son híbridos claros. No se ha encontrado ningún patrón extranjero que presente interés. Se ha determinado la resistencia a tristeza de 9 híbridos. Se ha comprobado la tolerancia a una cepa extraordinariamente severa de tristeza, del híbrido de citrange Troyer x mandarino común nº 18. Este híbrido, que en su momento resultó no ser resistente a tristeza, ha sido ya registrado para toda la UE con el nombre de Forner-Alcaide nº 418. Se ha determinado la excelente tolerancia a la salinidad, de algunos híbridos. En particular, cabe destacar el híbrido de mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 5, que presenta una tolerancia intermedia entre el citrange Carrizo (sensible) y el mandarino Cleopatra (resistente). Este híbrido ha sido también registrado para toda la UE con el nombre de Forner-Alcaide nº 5. De los 66 patrones ensayados, 15 híbridos de mandarino cleopatra x Poncirus trifoliata han mostrado resistencia a T. semipenetrans (58% de los híbridos de esta selección). Tres híbridos de Citrus wolkameriana x P. trifoliata y un híbrido de mandarino king x P. trifoliata también se comportaron como resistentes. El biotipo Mediterráneo de Tylenchulus semipenetrans es el predominante en España, probablemente debido a la amplia difusión de los patrones naranjo amargo y citranges Troyer y Carrizo. Se ha determinado la curva de maduración de 3 variedades sobre cuatro patrones y se ha establecido la época de recolección más adecuada para cada combinación. Se ha determinado la tolerancia o sensibilidad relativa a la caliza, de 16 patrones. INFORMACION CIENTIFICA Y TECNICA PROPORCIONADA POR EL PROYECTO. POSIBLES APLICACIONES Al igual que los proyectos anteriores, de los cuales es continuación, en este proyecto se ha ampliado el número de híbridos, se ha profundizado en el conocimiento de las características 3

que presentan los híbridos obtenidos, así como en el comportamiento agronómico de los patrones actualmente utilizados por los viveristas autorizados de agrios. Por ello, la información científica y técnica obtenida en este proyecto, es utilizable, tanto para la realización de otros estudios científicos, como para mejorar los criterios de utilización de patrones en las nuevas plantaciones y replantaciones. Así, los híbridos de Citrus volkameriana x Poncirus trifoliata, obtenidos en proyectos anteriores, están siendo utilizados por la Dra. Mª José Asíns para el estudio de marcadores genéticos de resistencia al virus de la tristeza y otras características. La determinación de las curvas de maduración de las variedades Navelina, Navelate y Clementina de Nules sobre los patrones citranges Troyer o Carrizo, citrumelo 4475, mandarino Cleopatra y Citrus volkameriana. Se ha realizado una amplia prospección de campo por la zona sur de la provincia de Tarragona para determinar los niveles caliza que puede soportar el citrange Troyer. Se han analizado los suelos de 38 parcelas de Clemenules sobre citrange Troyer, determinándose la textura, conductividad eléctrica en el extracto de saturación, contenido en materia orgánica, capacidad de intercambio catiónico, carbonatos totales y caliza activa. Los resultados que se han obtenido son coincidentes con los obtenidos previamente en la Comunidad Valenciana: la caliza activa es el parámetro que mejor se correlaciona con los síntomas de clorosis, y no suelen presentarse problemas de clorosis férrica cuando los valores de caliza activa no superan el 7-9%. La determinación de la tolerancia o sensibilidad relativa a la clorosis férrica de varios patrones, permite elegir adecuadamente el patrón, en función del contenido en caliza activa de la parcela a plantar. Dos citranges procedentes de California, el C-32 y el C-35 han resultado ser muy sensibles. El C-35 está siendo utilizado en pequeña escala, por algún agricultor, sin tener en cuenta esta sensibilidad, porque era desconocida hasta ahora. Por otro lado, el nematodo de los cítricos, Tylenchulus semipenetrans, constituye uno de los factores más importantes que condicionan el éxito de las replantaciones de cítricos. En el proyecto se ha confirmado el gran número de plantaciones infectadas por el nematodo, y que el biotipo Mediterráneo de dicho nematodo es el predominante en nuestras áreas de cultivo. El biotipo Mediterráneo se reproduce en las especies del género Citrus, citranges Troyer y Carrizo, viña y caqui, pero no se reproduce en P. trifolita, ni en olivo. La detección de un sólo biotipo del nematodo en España probablemente responda a la amplia difusión de los patrones naranjo amargo y citranges Troyer y Carrizo.Todos los patrones utilizados actualmente en nuestro país, a excepción del Swingle citrumelo CPB 4475, son sensibles a este biotipo del nematodo. Pero, desgraciadamente, este último patrón es de poca utilidad en España por ser muy sensible a la clorosis férrica. En consecuencia, antes de realizar una replantación, es preciso desinfectar el terreno o dejar pasar un par de años para que se reduzca al máximo la población de nematodos existente en el huerto que se arrancó. Por todo ello, la posibilidad de utilización de patrones, que siendo resistentes al nematodo presenten buena tolerancia a la caliza y a la salinidad, además de otras cualidades, es de suma importancia. Máxime si tenemos en cuenta que la tristeza ha tenido una fuerte expansión en los últimos años y habrá que replantar grandes extensiones en un futuro inmediato. 4

En este sentido, de búsqueda de patrones resistentes al nematodo de los cítricos, se ha identificado la resistencia de un número importante de híbridos con P. trifoliata como parental (36% de los híbridos ensayados). Uno de ellos, híbrido de mandarino cleopatra x P. trifoliata, ha sido ya registrado para toda la UE con el nombre de Forner-Alcaide nº 5: además de ser resistente a tristeza, es más tolerante a la caliza y a la salinidad que el citrange Carrizo, da lugar a árboles de tamaño medio y gran productividad, con gran calidad de fruta. No obstante, todos estos patrones que se han encontrado resistentes a T. semipenetrans, en ensayos de invernadero, habrá que verificarla en condiciones de campo en proyectos posteriores. El procedimiento desarrollado en este proyecto para la evaluación de la resistencia de patrones de cítricos por su resistencia a T. semipenetrans ha establecido las condiciones óptimas (nivel de inoculo del nematodo, edad de la planta, duración del ensayo, indicadores de resistencia, etc.) para evaluar una gran cantidad de material vegetal en una primera fase de evaluación mediante ensayos en invernadero. Este procedimiento ha mostrado ser eficaz y reproducible, y el protocolo utilizado en el mismo formará parte de la nueva edición de Evaluating plant species for resistance and tolerance to nematodes editado por J. L. Starr, R. Cook, y J. Bridge. CAB International Wallingford, UK. Un aspecto de carácter científico a resaltar, de los resultados de este proyecto, es la demostración de que T. semipenetrans puede habituarse a reproducirse en patrones parcialmente resistentes como consecuencia de la exposición continuada del patrón al nematodo. PUBLICACIONES Artículos científicos Jacas, J. A., Garrido, A., Margaix, C., Forner, J.B., Alcaide, A., Pina, J.A. 1997. Screening of different citrus rootstocks and citrus-related species for resistance to Phyllocnistis citrella (Lepidoptera: Gracillariidae). Crop Protection, 16.8. 701-715. Verdejo-Lucas, S., Sorribas, F.J., Pons, J., Forner, J.B., Alcaide, A. 1997. The mediterranean biotypes of Tylenchulus semipenetrans in Spanish citrus orchards. Fundamental and Applied Nematology, 20. 399-404. Verdejo-Lucas. S., Sorribas, F.J., Forner, J.B., Alcaide, A. 1997. Screening hybrid citrus rootstocks for resistance to Tylenchulus semipenetrans. Hortscience, 32. 1116-1119. Artículos de divulgación Forner, J. B. 1996. Presente y futuro de los patrones tolerantes a tristeza (I). Agricultores y Ganaderos, 59. 10-11. Forner, J. B. 1996. Presente y futuro de los patrones tolerantes a tristeza (II). Agricultores y Ganaderos, 60. 16-17. Forner J. B. 1997. Presente y futuro de los patrones tolerantes a tristeza (III). Agricultores y Ganaderos, 69. 28-29. 5

Forner, J. B., Alcaide, A. 1994. La mejora Genética de patrones de agrios tolerantes a tristeza en España: 20 años de historia (I). Levante Agrícola, XXXII. 325. 261-267. Forner, J. B., Alcaide, A. 1994. La mejora Genética de patrones de agrios tolerantes a tristeza en España: 20 años de historia (II). Levante Agrícola, XXXIII. 329. 273-279. Forner, J. B., Alcaide, A. 1994. Últimas investigaciones en patrones tolerantes. El Agricultor Cualificado, 0. 21-24. Forner, J. B., Alcaide, A. 1997. Últimas investigaciones en patrones tolerantes. Comunidad Valenciana Agraria, 10. 11-14. Verdejo-Lucas. S., Sorribas, F.J., Forner, J.B., Alcaide, A. 1996. Reacción de patrones híbridos de cítricos al nematodo Tylenchulus semipenetrans. Fruticultura Profesional, 76. 30-34. Libros Verdejo-Lucas, S., Sorribas, F.J. 1997. Capítulo: Enfermedades producidas por nematodos. En: Enfermedades de los cítricos. Monografía de la Sociedad Española de Fitopatología. Eds. P. Moreno y N. Durán. Verdejo-Lucas, S., Kaplan, D. T. 1998. Capítulo: The citrus nematode: Tylenchulus semipenetrans. En Evaluating plants for resistance and tolerance to nematodes. Eds. J.M. Starr, R. Cook & J. Bridge. CAB International. Wallingford. Trabajos presentados a congresos, reuniones o simposios Forner, J.B. Influencia de los diversos patrones y maderas intermedias. Perspectivas de nuevos modelos. I Congreso de Citricultura de L'Horta Sud. Picasent, Valencia (España). Octubre, 1994. Ed.: Ajuntament de Picasent. Forner, J.B. Perspectivas en la utilización de patrones en citricultura. II Congreso de Citricultura de La Plana. Nules, Castellón (España). Marzo, 1995. Ed.: Ajuntament de Nules. Forner, J.B. Nuevos patrones en Huelva. II Congreso de Citricultura de L'Horta Sud. Picasent, Valencia (España). Octubre, 1996. Ed.: Ajuntament de Picasent. Forner, J.B. Rootstocks in Spain. Workshop: 8th Congress ISC. Sun City (Sudáfrica). Mayo, 1996. Ed.: Int. Soc. Citriculture. Forner, J.B., Alcaide, A., Verdejo Lucas, S., Sorribas, F.J. New Hybrids as citrus rootstocks in Spain. 8th Congress ISC. Sun City (Sudáfrica). Mayo, 1996. Ed.: Int. Soc. Citriculture. Forner, J.B. Patrones. Jornadas Técnicas Andaluzas. Lepe, Huelva (España). Mayo, 1995. Verdejo-Lucas, S., Sorribas, F. J., Forner, J. B. Reacción de nuevos patrones híbridos de cítricos al nematodo Tylenchulus semipenetrans. VI Cong. de la Soc. Esp. de Ciencias Hortícolas. Barcelona (España). Abril, 1995. 6

Verdejo-Lucas, S., Sorribas, F. J., Pons, J., Forner, J. B. Niveles poblacionales del nematodo Tylenchulus semipenetrans en plantaciones de cítricos. VI Cong. de la Soc. Esp. de Ciencias Hortícolas. Barcelona (España). Abril, 1995. Verdejo-Lucas. S., Sorribas, F.J., Forner, J.B., Alcaide, A. Screening citrus rootstocks for resistance to Tylenchulus semipenetrans. Third International Nematology Congress. Guadeloupe (Francia). Julio, 1996. Verdejo-Lucas. S., Sorribas, F.J., Forner, J.B., Alcaide, A. Dinámica poblacional de Tylenchulus semipenetrans en plantaciones de cítricos. VII C. Nac. de la Soc. Española de Fitopatología. Córdoba (España). Septiembre, 1996. Verdejo-Lucas S., Sorribas F. J. Changes in population densities of Tylenchulus semipenetrans in Spanish citrus orchards. 36 R. An. de la Society of Nematologists. Tucson, Arizona (USA). Julio, 1997. Verdejo-Lucas, S., Sorribas, F. J, Forner, J. B., Alcaide A. Resistencia a Tylenchulus semipenetrans Cobb en nuevos patrones híbridos de cítricos. IX Cong. Nac. de la Soc. Esp. de Fitopatología. Salamanca (España). Octubre, 1998. Patentes y obtenciones Forner, J.B., Alcaide, A. Forner-Alcaide nº 5. Unión Europea. Julio, 1996. Pendiente de adjudicación. Forner, J.B., Alcaide, A. Forner-Alcaide nº 418. Unión Europea. 1997. Pendiente de adjudicación. Otros trabajos de difusión de resultados 1.- Se han impartido las clases correspondientes a patrones de los cursos de Master de Citricultura realizados conjuntamente por la Universidad Politécnica de Valencia y el I.V.I.A. durante 1994-95, y 1996-97. 2.- Se han impartido las clases correspondientes a patrones, de los cursos de Lucha integrada que organiza anualmente la Federación de Cooperativas Agrarias de la Comunidad Valenciana (FE.CO.AV.) para técnicos de cooperativas. 3.- Se han impartido numerosas conferencias así como las clases correspondientes a patrones de los cursos de Agricultor Cualificado y de Agricultor Especialista que organizan distintas entidades tales como la Consellería de Agricultura, Pesca y Alimentación de la Generalidad Valenciana, Asociación Valenciana de Agricultores, Cooperativas y Ayuntamientos de la Comunidad Valenciana. En total han sido más de 40 clases y conferencias. 4.- Se han realizado numerosas entrevistas para prensa, radio y televisión, de las comunidades Valenciana y Andaluza. 5.- Habitualmente se atienden más de 100 consultas anuales de agricultores, tanto en el IVIA como visitando huertos con problemas. 7

Tolerancia o sensibilidad relativa a la clorosis férrica de los patrones estudiados. PATRONES Citrange Carrizo Citrange C-32 Citrange C-35 Forner - Alcaide nº 5 Citrange Troyer x mandarino Cleopatra nº 4 Citrange Troyer x mandarino Cleopatra nº 25 Citrange Troyer x mandarino Cleopatra nº 39 Citrange Troyer x mandarino Cleopatra nº 49 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 7 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 8 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 9 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 24 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 42 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 43 Mandarino Cleopatra x Poncirus trifoliata nº 46 Mandarino Cleopatra x citrange Troyer nº 9 CALIFICACIÓN Sensible Muy sensible Muy sensible Sensible Sensible Sensible 8