Desarrollo, mortalidad y sobrevivencia de las etapas inmaduras de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) en neumáticos.

Transcripción

1 84 Rev Biomed 1998; 9: Desarrollo, mortalidad y sobrevivencia de las etapas inmaduras de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) en neumáticos. Artículo Original Pablo Manrique-Saide 1, Hugo Delfín-González 1, Victor Parra-Tabla 2, Sergio Ibáñez-Bernal 3. 1 Depto. de Zoología, 2 Depto. de Ecología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Yucatán. Mérida, Yucatán, México. 3 Departamento de Entomología, Instituto Nacional de Referencia Epidemiológica, Secretaria de Salud, México, D.F. RESUMEN. Objetivo. Determinar el desarrollo, mortalidad y supervivencia de las etapas inmaduras del mosquito Aedes aegypti en neumáticos, en Mérida, Yucatán, México. Material y Métodos. Se construyeron tablas de vida para hacer estimaciones de tasas de mortalidad y supervivencia específicas para las edades o estadios. Resultados. La duración promedio del ciclo de vida de Ae. aegypti en neumáticos fue de días (± 2.68 sd). La etapa de larva con sus distintos estadios ocupa un total de 8.1 días (± 2.40 sd), mientras que la etapa de pupa dura 3.05 días (± 1.09 sd). Del número inicial de individuos (larvas de primer estadio) solamente emergió el 9%, es decir, que la mortalidad total de las etapas inmaduras fue del 91%. La mayor tasa de mortalidad se observó en las larvas de cuarto estadio (54%), mientras que la menor mortalidad se ob- servó en la etapa de pupa (18%). La proporción de sexos de los adultos emergidos fue de 1:1. Conclusión. Los valores ajustados de mortalidad larvaria y pupal de Ae. aegypti en neumáticos y bajo condiciones seminaturales, corresponden a una curva de sobrevivencia tipo II. (Rev Biomed 1998; 9:84-91) Palabras clave: Aedes aegypti, larvas, neumáticos, tabla de vida. SUMMARY. Development, mortality and survival of immature stages of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) in car tyres. Objective. Development, mortality and survival were determined for immature larval stages of the mosquito Aedes aegypti bred inside car tyres in Merida, Yucatan, Mexico. Solicitud de sobretiros: M. en C. Pablo Manrique-Saide. Universidad Autónoma de Yucatán. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Depto. de Zoología. Apdo. postal Itzimná. Mérida, Yucatán, México. Recibido el 12/Oct./1997. Aceptado para publicación el 20/Enero/1998. Este artículo esta disponible en Vol. 9/No. 2/Abril-Junio, 1998

2 85 P Manrique-Saide, H Delfín-González, V Parra-Tabla, S Ibáñez-Bernal. Material and Methods. Life tables were elaborated in order to estimate specific mortality and survival rates for different larval ages or stages. Results. Mean life cycle lasted days (± 2.68 sd). Larval and pupal stages averaged 8.1 days (± 2.40 sd) and 3.05 days (± 1.09 sd), respectively. Only 9% of the emerged individuals reached the adult stage corresponding to a total mortality of 91% for immature stages. The highest mortality rate was observed in the fourth larval instar (54%) while the lowest mortality occurred during the pupal stage (18%). The sexual ratio for emerged mosquitoes was 1:1. Conclusion. Ae. aegypti larvae and pupae adjusted mortality rates in tyres and under seminatural conditions corresponded to a survival curve type II. (Rev Biomed 1998; 9:84-91) Key words: Aedes aegypti, larvae, tyres, life table. Revista Biomédica INTRODUCCIÓN. El mosquito Aedes aegypti (Ae aegypti) (Lineo,1762) es el vector más importante de los virus del dengue, de la fiebre amarilla urbana y otras arbovirosis (1). El ciclo de vida de este mosquito presenta cuatro etapas marcadas sucesivas: huevo, cuatro estadios larvales, pupa y adulto. Los estadios larvales y el estado de pupa constituyen las etapas inmaduras y se desarrollan en el ambiente acuático; en contraste, la etapa adulta y reproductiva del insecto que representa la parte final del ciclo, se desarrolla en el ambiente terrestre y está adaptada para el vuelo y la dispersión. En América, Ae. aegypti es considerado como "doméstico" o "urbano", ya que con mucha frecuencia se reproduce en recipientes artificiales, en las viviendas humanas o en los alrededores de éstas, habiendo proliferado gracias al aumento en el número de sitios propios para el desarrollo de sus etapas inmaduras estos sitios estan provistos de almacenamiento a gran escala de agua en recipientes y tanques (habitualmente creados por el inadecuado suministro de agua), en contenedores plásticos, metálicos o de cristal de desecho (acumulados por la insuficiente capacidad de los servicios para la remoción de estos) (2). En estudios llevados a cabo en la zona urbana del municipio de Mérida, Yucatán, se ha detectado que los contenedores más comunes y con mayor positividad (presencia de larvas) a Ae. aegypti son las latas, los neumáticos usados y las botellas de cristal, en orden decreciente de importancia (3). En zonas suburbanas los contenedores son los mismos, con la excepción de que la mayor positividad se observa en los neumáticos (4). Sin embargo, se desconocen los aspectos demográficos básicos de esta especie en cada uno de estos ambientes reproductivos a nivel regional. En general, el estudio de los aspectos demográficos de una especie tiene particular interés para entender la causa de las fluctuaciones poblacionales y la determinación de los niveles promedio en los que estos cambios ocurren. En otras palabras, su dinámica poblacional. Los principales factores involucrados en esta dinámica poblacional son: supervivencia/mortalidad, dispersión y natalidad. La manera más común de expresar los patrones de sobrevivencia y mortalidad es por medio de tablas de vida, las cuales recopilan una serie de mediciones secuenciales que revelan los cambios a través del ciclo de vida de una especie (5). Los trabajos de Christophers (6) y Southwood y col. (7) constituyen las únicas referencias previas de tablas de vida para esta especie, lo cual es algo notable, tomando en cuenta su importancia real y potencial para el diseño de estrategias de abatimiento y control de plagas (8,9). El presente estudio fue diseñado para conocer los aspectos poblacionales (desarrollo, mortalidad y supervivencia) de las etapas inmaduras de Ae. aegypti en los criaderos considerados como más importantes, bajo condiciones seminaturales en Mérida, Yucatán, México. MATERIAL Y MÉTODOS.

3 86 Supervivencia de Aedes aegypti. Se estableció un depósito (tiradero) de neumáticos en las instalaciones de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Autónoma de Yucatán, situada al sur de la ciudad de Mérida (Km carretera Mérida-Xmatkuil). El clima del área es del tipo Awo o cálido subhúmedo, con lluvias en verano y una sequía marcada en la mitad caliente del año (10). El trabajo de campo se llevó a cabo durante los meses de agosto y septiembre de 1994 con una temperatura ambiental promedio de 27.4 ºC (máxima 33.7 y mínima de 21.1 ºC) y una precipitación pluvial de 7.89 mm en agosto y 3.35 mm en septiembre. Para estudiar el patrón de desarrollo de cada una de las etapas inmaduras, se utilizaron un total de 20 neumáticos de automóviles usados colocados en posición horizontal, en contacto con el piso y cubiertos individualmente por una malla a manera de trampas de emergencia. En cada uno se depositó cuatro litros de agua de pozo almacenada y previamente filtrada para evitar la presencia de otros organismos. Posteriormente, se agregó a cada uno de los neumáticos un lote con 50 larvas de primer estadio recién emergidas de huevos (Cepa Mérida) proporcionados por el Laboratorio de Entomología del Instituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos (INDRE) de la Secretaría de Salud. Al alcanzar el segundo, tercero y cuarto estadio, las larvas fueron transferidas respectivamente a un segundo, tercero y cuarto lote de neumáticos. Las pupas se transfirieron a cámaras de emergencia. Las larvas y pupas se contaron diariamente hasta que todas alcanzaron la fase adulta. Se registró el número total de organismos y el número de individuos de cada uno de los cuatro estadios larvales, pupas y adultos. Se añadió la información de los promedios de duración de cada uno de los estadios larvales y etapa de pupa, con base en el tiempo tomado por más de la mitad de la población para mudar a la siguiente etapa (50%+1) y la proporción de sexos en los adultos emergidos. La temperatura del agua fue de ºC y el ph fue de Los datos demográficos se presentan en forma de tablas de vida (11). Dado que se conocía el número inicial de organismos en cada generación, se construyó una tabla de vida de cohorte con los promedios de los valores de los datos observados. En la primera columna de la tabla, encabezada como grupo de edad, se señaló las distintas etapas del ciclo de vida que fueron consideradas. En la segunda columna ax se enlista el número total de individuos observado en la población en cada etapa. En la tercera columna, lx, se enlistó los mismos datos, pero ya estandarizados con un valor inicial de 1.00, que representan la proporción original de la cohorte que sobrevivió al inicio de cada etapa. La porporción de la cohorte original que murió durante cada etapa, dx, se obtuvo por la diferencia entre lx y lx+1. En la columna qx o tasa de mortalidad específica por etapa se presentó los datos que pueden tomarse como la probabilidad promedio de un individuo de morir y se obtuvieron considerando a dx como fracción de lx, es decir dx/lx. La última columna de la tabla se conoce como poder de mortalidad, kx, que se obtuvo por la diferencia entre log10ax-log10ax+1, este parámetro al igual que los valores de qx es una estimación de la tasa de mortalidad, con la diferencia de que estos valores pueden sumarse y permiten hacer comparaciones entre los distintos valores del mismo ciclo y con otros estudios (11). Los datos de mortalidad de las etapas inmaduras de Ae. aegypti, fueron ajustados con el modelo paramétrico de análisis de supervivencia de Weibul (12), considerando a los días como variable independiente y al número de individuos supervivientes de un día a otro, como la variable de respuesta. La función gráfica de supervivencia en el tiempo se obtuvo con el método de ajuste de Kaplan-Meir (12). Así mismo, se construyó la curva de supervivencia para el caso graficando el número de organismos sobrevivientes en cada grupo de edad. Los tipos de curvas principales según Pearl (13) se presentan a manera de una curva convexa si la mortalidad se halla concentrada al final del ciclo de vida (tiempo (tipo I), una curva cóncava si la mortalidad se halla concentrada al inicio (tipo Vol. 9/No. 2/Abril-Junio, 1998

4 87 P Manrique-Saide, H Delfín-González, V Parra-Tabla, S Ibáñez-Bernal. Cuadro 1 Duración promedio en días (± desviación estándar) de los distintos estadios de desarrollo desde larva a adulto de Ae. aeqypti en neumáticos (agosto-septiembre de 1994). Etapa Larva I Larva II Larva III Larva IV Pupa Total a 1.25(0.12) 2.20(0.23) 2.80(0.28) 3.15(0.23) 3.55(0.29) b 1.00(0.00) 1.70(0.80) 2.50(1.14) 2.90(1.16) 3.05(1.09) a Cuando el total de individuos pasaron a la siguiente etapa de desarrollo. b Cuando 50% + 1 de los individuos pasaron a la siguiente etapa de desarrollo. III), o una línea recta si la probabilidad de la muerte permanece constante con la edad (tipo II). RESULTADOS. Desarrollo de las etapas inmaduras de Ae. aegypti en neumáticos. La duración promedio observada en 1,000 organismos para el período total de larva de primer estadio hasta adulto fue de días (cuadro 1), con un mínimo de duración de nueve días y un máximo de 20 días. La proporción sexual promedio de adultos emergidos observada fue de 3.00 machos por 2.75 hembras, lo cual no representa una diferencia significativa de una relación 1:1 en las proporciones sexuales (t= 0.409; p>0.05; t-student). Mortalidad y supervivencia de las etapas inmaduras de Ae. aegypti. El número inicial de organismos (cohorte inicial) en cada neumático fue de 50 larvas de primer estadio y de este total, la supervivencia final Cuadro 2 Tabla de vida de valores promedio para las etapas inmaduras de Ae. aeqypti en neumáticos. Grupo de edad ax lx dx qx log10ax log10lx kx Larva I Larva II Larva III Larva IV Pupa Adulto donde: ax: número de organismos al inicio de cada grupo de edad. lx: proporción de la cohorte original que sobrevive a cada grupo de edad. dx: proporción de la cohorte original que muere durante cada grupo de edad. qx: tasa de mortalidad. kx: poder de mortalidad. Revista Biomédica

5 Cuadro 3 Duración promedio en días de los distintos estadios larvales y pupas de Ae. aegypti en neumáticos comparados con mediciones en el laboratorio y en otros contenedores. 88 Supervivencia de Aedes aegypti. estadios larvales Contenedor I +II III IV Pupa Total Fuente Neumáticos Estudio Florero (7) Jarrón Trampa para hormigas Laboratorio (6) hasta la emergencia del adulto fue de nueve por ciento (4.5 adultos por neumático; ± 2.60 de). Esto significa que de la cohorte inicial de 1000 organismos, emergieron 90 mosquitos adultos. La mortalidad total en las etapas inmaduras de Ae. aegypti fue del 91%. La tasa de mortalidad es mayor en los dos últimos estadios del desarrollo larvario (54% y 44% para las larvas de cuarto y tercer estadio, respectivamente) (cuadro 2) (figura 1). El poder de mortalidad kx total de la etapa larvaria de Ae. aegypti en neumáticos fue de 0.95 y el de las primeras dos etapas es de 0.37 (cuadro 2) (figura 1). El modelo de regresión de análisis de supervivencia fue significativo (prueba de registro inicial de regresión ISTR= 28.41, p<0.0001), la función de sobrevivencia indicó una tasa de mortalidad constante en el tiempo (figura 2) sugiriendo una curva de supervivencia tipo II (13, 8), como se ilustra en la curva de supervivencia graficada (figura 3). Figura 1.- Tasa de mortalidad (qx= dx/lx) y poder de mortalidad (kx= logax-logax+1) en etapas inmaduras de Aedes aegypti en neumáticos. La línea continua representa a kx y la línea discontinua representa a qx. Figura 2.- Curva de función de supervivencia ajustada con el método de estimación de Kaplan-Meir, para las etapas inmaduras de Aedes aegypti en neumáticos. Vol. 9/No. 2/Abril-Junio, 1998

6 89 P Manrique-Saide, H Delfín-González, V Parra-Tabla, S Ibáñez-Bernal. Figura 3.- Curva de supervivencia (número de organismos vivos en cada grupo de edad) de las etapas inmaduras de Aedes aegypti en neumáticos. DISCUSIÓN. Los datos de Southwood y cols. (7) bajo condiciones naturales y de Christophers (6) en condiciones de laboratorio se comparan a priori con los tiempos observados en neumáticos (cuadro 3). En los neumáticos, el tiempo requerido para llevar a cabo el ciclo completo fue menor que en cualquiera de los otros recipientes bajo condiciones naturales, con diferencias que fueron de casi 3 días, -como en el caso de floreros- y aproximadamente seis días y medio en trampas para hormigas. El tiempo ocupado por cada uno de los estadios larvales tuvo una duración menor y la mayor diferencia se observó en el cuarto estadio larval, inferior en más de tres días con lo reportado (7). En contraste, para la etapa pupal el tiempo ocupado es mayor en neumáticos, superando por uno o dos días a cualquier otro de los casos. La comparación de los resultados obtenidos en el presente experimento con los obtenidos bajo condiciones de laboratorio (6), muestra un comportamiento diferente. En todos los estadios larvales, salvo en los primeros dos, la duración fue menor que en neumáticos, diferencias que se tradujeron en un ciclo completo más corto. Destacan Revista Biomédica las diferencias encontradas en el tercer y cuarto estadios, que en condiciones de laboratorio representan sólo un tercio de la duración del ciclo completo en neumáticos, duración que probablemente se explica por las condiciones controladas que existen en el laboratorio, principalmente temperatura y alimento. En cuanto a la duración relativa de cada uno de los estadios larvales, Christophers (6), reportó que en Ae. aegypti el segundo y tercer estadios son más cortos que el primero, y el cuarto es el más largo de todos. En nuestro estudio se observó que la etapa de menor duración fue la de larva de primer estadio y que cada una de las etapas posteriores tuvo una duración mayor que la predecesora (cuadro 1). El crecimiento del último estadio larval involucra los cambios más grandes en biomasa, así como transformaciones de tejidos, por lo que no es sorprendente que requiera de más tiempo que los estadios predecesores (14). Sin embargo, la menor duración del primer estadio larval, puede deberse a posibles presiones ambientales como el lapso de permanencia del agua en los neumáticos o a la presencia de condiciones adecuadas para su desarrollo. En general, la tasa de crecimiento de las larvas de mosquito parece depender de tres factores principales: la temperatura ambiental, la naturaleza del medio de cultivo (disponibilidad de alimento) (15) y las características genéticas de la especie (16). Se ha reportado que el intervalo de temperatura óptimo para el desarrollo de las formas juveniles de Ae. aegypti es entre 25 y 30 ºC, con una duración aproximada de diez días (17). En condiciones naturales, el agua de los sitios reproductivos comunes para Ae. aegypti en su mayoría es limpia o con una cantidad moderada de materia orgánica. Aunque no valoramos el efecto de la temperatura ni de la disponibilidad de alimento en la supervivencia, se consideró que el posible efecto de éstos era poco significativo ya que se trabajó dentro de lo que se considera como intervalos óptimos para Ae. aegypti. El efecto de los factores genéticos dentro de las poblaciones es

7 90 Supervivencia de Aedes aegypti. difícil de evaluar, aunque se puede esperar que la duración relativa de los estadios larvales, sea en parte una característica específica que se mantiene dentro de ciertos rangos. Algunas presiones ambientales (como la permanencia del agua) son importantes en la duración del ciclo de vida, de manera que las especies que se desarrollan en acúmulos temporales de agua, son aptas para tener una tasa de desarrollo rápido (18). Es posible que este sea el caso del desarrollo de Ae. aegypti en neumáticos y otros contenedores como ha sido sugerido por algunos autores (18), sin embargo es necesario llevar a cabo una evaluación específica de cada uno de los factores determinantes en el desarrollo de las diferentes etapas de esta especie. La mortalidad larvaria por sí misma, fue responsable del 89% del total de la mortalidad. El que la tasa de mortalidad fuera mayor en el último de los estadios larvarios de Ae. aegypti (figura 1), puede deberse a que en insectos con etapas bien marcadas, en ocasiones las mayores mortalidades se dan en las etapas cercanas a la metamorfosis (11). Esta mortalidad también es semejante a la que presentan las poblaciones larvarias de mosquitos que sufren ataques de patógenos o epibiontes (19-20). Southwood y cols. (7) encontraron que en poblaciones larvarias de Ae. aegypti, la mayor mortalidad, en jarrones y en trampas para hormigas, se observaba en larvas de cuarto estadio en la temporada fría del año. Sin embargo, se observó que en la temporada cálida las mayores mortalidades se presentaron en el primer estadio larval. En ausencia de depredadores y patógenos se consideró que la competencia por la cantidad de comida limitada fue la causa de mortalidad. En otras especies de mosquitos, tales como Aedes cantans, la mortalidad más significativa ocurre durante los dos primeros estadios larvales. En presencia de virus, hongos y otros epibiontes, la mayor mortalidad ocurrió en las larvas de cuarto estadio (21). Se concluyó que factores desconocidos son los responsables de gran parte de la mortalidad en las etapas inmaduras; se sugirió que el fenómeno de alta mortalidad podía deberse a enfermedades, parásitos y epibiontes, o ser producto de la competencia por comida y espacio, ambos factores limitantes del tamaño poblacional (21). El poder de mortalidad (kx) evaluado en las formas juveniles (cuadro 2) fue menor en neumáticos que el observado en otros contenedores. El valor total para larvas de Ae. aegypti en neumáticos es similar al reportado en jarrones (0.95 y 0.88, respectivamente) (7), y representa el 67% del reportado para trampas de hormigas y el 48% para floreros (7). La curva de supervivencia representada en este experimento (figura 3) correspondió a una curva tipo II de Pearl (13), que representa un sistema en el cual hay una tasa constante de individuos que mueren o sobreviven conforme transcurre el tiempo (figura 2). Sin embargo, de acuerdo a los valores de tasa de mortalidad (qx) y poder de mortalidad (kx), existe una menor probabilidad de sobrevivir en los últimos estadios larvales (figura 1). Finalmente, aunque en México se carece de datos demográficos de las etapas inmaduras de Ae. aegypti y sobre la productividad de los distintos criaderos, el que la supervivencia y la duración del ciclo de vida en neumáticos sean menores a los reportados para otros tipos de contenedores en otros países, refuerza la importancia de los neumáticos como criaderos y blanco para el control del vector del dengue. La eliminación de los tiraderos de neumáticos o almacenaje apropiado, son la mejor solución para el control. Dado que en lugares como Yucatán los neumáticos se localizan en las cercanías de los domicilios, el método de control más valioso sería la reducción de criaderos en áreas peridomiciliarias, por medio de campañas comunitarias de saneamiento básico y descacharrización, e incentivar el reciclaje y la participación de la iniciativa privada, además de la continua vigilancia epidemiológica y manejo integral de esta especie. Vol. 9/No. 2/Abril-Junio, 1998

8 91 P Manrique-Saide, H Delfín-González, V Parra-Tabla, S Ibáñez-Bernal. AGRADECIMIENTOS. Agradecemos al Laboratorio de Entomología del INDRE SSA por la donación de los huevecillos de Ae. aegypti y a J. Salvador Flores G. las facilidades otorgadas para establecer el experimento en la Facultad de Medicina Veterinaria de la UADY. Este trabajo fue parcialmente financiado por la Fundación Rockefeller y la Secretaría de Salud México (REF: 92065No.14). REFERENCIAS. 1.- Gómez-Dantés H, Ibáñez-Bernal S. Dengue. En: Valdespino GJL, Velasco CO, Escobar GA, del Rio ZA, Ibáñez BS, Magos LS, ed. Enfermedades Tropicales en México. Diagnóstico, tratamiento y distribución geográfica. México: INDRE-SSA; p World Health Organization. Integrated vector control. Ginebra: WHO; p.72. Technical report series Winch JP, Barrientos SG, Puigserver CE, Manzano CL, Lloyd SL, Mendez GJF. Variation in Aedes aegypti larval indices over one year period in a neighborhood of Merida, Yucatan, Mexico. J Am Mosq Control Assoc 1992; 8: Ibáñez BS, Paz RR, Martínez CC, Gómez DH, Manrique SP. Fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) y frecuencia relativa por microambientes de crianza en dos poblados del Municipio de Mérida, Yucatán, México. En: Memorias del VI Latinoamericano y XXXI Congreso Nacional de Entomología; Mayo 26-30; Mérida, Yucatán, México; p Harcourt, DG. The development and use of life tables in the study of natural insect populations. Ann Rev Ent 1969; 14: Christophers KM Aedes aegypti L., the yellow fever mosquito. London: Cambridge University Press; p Southwood TRE, Murdie G, Yasuno M, Tonn RJ, Reader PM. Studies on the life budget of Aedes aegypti in Wat Samphaya, Bangok, Thailand. Bull WHO 1972; 46: Southwood TRE. Ecological methods with particular reference to the study of insect populations. 2a ed. London: Chapman and Hall; p Metcalf RL. Estrategias del manejo de plagas de insectos que atacan al hombre y a los animales domésticos. En: Metlcalf RL, Luckmann WH, ed. Introducción al manejo de plagas de insectos. México: Limusa; p García E. Apuntes de climatología. México: Edición privada; p Begon M, Harper JL, Towsend CR. Ecology. Individuals, Populations and Communities. Oxford: Blackwell Scientific Publications; p SYSTAT. SYSTAT for Windows ver Chicago: New Statistics. SPSS; p Pearl R. The rate of living. New York: Knopf; p Huffaker CB. The temperature relations of the immature stages of the malarial mosquito, Anopheles quadrimaculatus, with a comparison of the developmental power of constant and variable temperatures in insect metabolism. Ann Ent Soc Amer 1944; 37: Focks DA., Haile DG, Daniels E, Mount, GA. Dynamic life table model for Aedes aegypti (Diptera: Culicidae): Simulation results and validation. J Med Entomol 1993; 30: Crovello TJ, Hacker CS. Evolutionary strategies in life table characteristics among feral and urban strains of Aedes aegypti (L.). Evolution 1972; 26: Rueda LM, Patel KJ, Axtell RC, Stinner, RE. Temperature-dependent developement and survival rates of Culex quinquefasciatus and Aedes aegypti (Diptera: Culicidae). J Med Entomol 1990; 27: Bates M. The Natural History of Mosquitoes. New York: Rusell and Volkening; p Chapman H. Biological control of mosquito larvae. Ann Rev Ent 1974; 19: Chapman H. Introduction. En: Chapman H. ed. Biological Control of mosquitoes. Bulletin No. 6. Fresno: American Mosquito Control Association; p Lakahani KH, Service MW. Estimated mortalities of the immature stages of Aedes cantans (Mg.) (Diptera, Culicidae) in a natural habitat. Bull Ent Res 1974; 64: Revista Biomédica