GENÉTICA Y ENFERMEDAD CELIACA
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- Gabriel Silva Camacho
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1 ENYCA I N N O V A GENÉTICA Y ENFERMEDAD CELIACA
2 PRESENTACIÓN GENYCA INNOVA Análisis y Diagnóstico Genético En la era de la genómica y de la biotecnología, las técnicas de análisis genético molecular se imponen por su alta fiabilidad, su inalterabilidad y su gran reproducibilidad. Los resultados del estudio molecular aportan una valiosa información que, complementando a la clínica del paciente, sus antecedentes familiares y demás datos representativos, proporcionan al facultativo una fuerte base sobre la que establecer un tratamiento idóneo y personalizado. En este área de conocimiento resulta fundamental mantener un constante proceso de actualización, para poder ofrecer un servicio innovador e integral a la altura de los avances biotecnológicos del momento. GENYCA INNOVA, centro especializado en Genética Molecular, pone su amplia experiencia, su fuerte compromiso con la calidad y su estricto cumplimiento de las pautas bioéticas al servicio de todos aquellos que encuentran en la máxima disponibilidad de información, la herramienta fundamental para el cuidado de la salud. 1
3 NORMATIVA SOBRE ANÁLISIS MOLECULARES Debido al reciente y acelerado desarrollo de la Genética Molecular, es patente la carencia de normativa específica que regule actualmente las actividades de servicios en este campo. Sin embargo, y quizá con más razón por esto, es necesario el cumplimiento de ciertos atributos de calidad que permitan, no sólo establecer un óptimo procedimiento de análisis, sino también minimizar las interferencias que se pueden desprender de un incorrecto proceso pre y postanalítico. En este sentido, GENYCA INNOVA tiene como objetivo prioritario el establecimiento y el mantenimiento de la máxima calidad en toda su actividad, contando para ello con la autorización específica por parte de la Consejería de Sanidad y Consumo de la Comunidad de Madrid para la realización de análisis genéticos moleculares, no englobándolos por defecto en el ámbito de los análisis clínicos, por tratarse de estudios y metodologías totalmente independientes, y para los que se requiere formación e instalaciones diferentes. Se trata de un paso más para conseguir que se unifiquen y apliquen específicamente las pautas metodológicas, bioéticas y de formación profesional que deberían siempre subyacer en la realización de estudios moleculares, sin tener para ello que heredarlas de otros tipos de análisis. 2
4 INNOVACIÓN EN LA TOMA DE MUESTRA La Genética Molecular es una disciplina en continuo desarrollo: a medida que avanza el conocimiento científico, el abanico de relaciones genotipo-fenotipo se ve incrementado. Por ello, GENYCA INNOVA facilita a sus clientes un soporte duradero para la toma de muestra, evitando así la necesidad de obtención de nueva muestra para posibles determinaciones a realizar en el futuro. Se favorece así la facilidad y la comodidad en la toma de la muestra, como factores importantes por los que GENYCA INNOVA apuesta. Por todo ello, tan sólo una gota de sangre apropiadamente recogida sobre el soporte que GENYCA INNOVA proporciona al facultativo es suficiente para llevar a cabo el estudio solicitado. A cada muestra se le asocia un código de barras único, de modo que la posibilidad de confusión de muestras queda eliminada, al minimizar la manipulación de las muestras en ese sentido por parte del analista. Un punto más del proceso de análisis en el que GENYCA INNOVA insiste para mejorar su servicio. 3
5 INSTALACIONES Y METODOLOGÍA Dotado de la más moderna tecnología y en la vanguardia de los adelantos metodológicos, el laboratorio que tiene ubicado GENYCA INNOVA en Majadahonda (Madrid) cuenta con estancias aisladas y reservadas para la realización de cada etapa del proceso de análisis, estableciendo un único sentido de flujo de trabajo, y evitando así cualquier tipo de contaminación cruzada. Como empresa especializada en el área de la Genética Molecular, GENYCA INNOVA basa su actividad en técnicas ampliamente contrastadas y avaladas por numerosos trabajos de investigación realizados por equipos de gran rigor científico. Al mismo tiempo, se trata de técnicas de gran actualidad, de probada sensibilidad y de gran capacidad diagnóstica, al basarse todas ellas en el estudio directo del ADN. 4
6 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA 1. INTRODUCCIÓN 6 2. HERENCIA DE LA ENFERMEDAD CELIACA 7 3. ASOCIACIÓN CON HLA HLA-DQ2 Y HLA-DQ GENES NO-HLA 3.3. GENOTIPADO DE HLA EN ENFERMEDAD CELIACA 5
7 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA INTRODUCCIÓN La enfermedad celiaca es una frecuente alteración autoinmune, cuya etiología comprende componentes genético, ambiental e inmunológico. En población caucásica afecta a una de cada personas, y es una alteración de malabsorción causada por una intolerancia inmunológica al gluten o a proteínas relacionadas del trigo, la cebada y el centeno fundamentalmente, que lleva a una respuesta inflamatoria crónica de la mucosa del intestino delgado en individuos genéticamente susceptibles. La enfermedad celiaca está fuertemente asociada a la presencia de anticuerpos contra el gluten y proteínas afines, y de auto-anticuerpos contra componentes del propio tejido conectivo, fundamentalmente contra la transglutaminasa 2. Como se detalla más adelante, las moléculas DQ2 y DQ8 confieren susceptibilidad al desarrollo de la enfermedad celiaca al presentar el gluten y los péptidos relacionados a las células T del sistema inmunitario del intestino Molberg et al., Gastroenterology 125:
8 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA HERENCIA DE LA ENFERMEDAD CELIACA Diferentes estudios de segregación en familias han sugerido una importante predisposición genética a la enfermedad celiaca, caracterizada por una prevalencia del 8-18% entre familiares de primer grado 1,2,3, con una tasa de concordancia entre gemelos monocigóticos 4,5 del %, y del 20% entre gemelos dicigóticos. La concordancia incompleta entre las parejas de gemelos monocigóticos confirma el componente ambiental de la patogénesis de la enfermedad; en algunos casos, sería necesario un seguimiento cercano para comprobar que la dolencia no se desarrollará en el futuro. En cualquier caso, se trata de una alteración de etiología multifactorial, con un importante componente genético. 1. Houlston y Ford, QJM 89: Kotze et al., Arq Gastroenterol 38: Mäki y Collin, Lancet 349: Clot y Babron, Mol Genet Metab 71; Sollid y Thorsby, Gastroenterology 105:
9 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA ASOCIACIÓN CON HLA De entre las enfermedades multifactoriales, la enfermedad celiaca es la que presenta una asociación más fuerte con el Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC). El MHC es un conjunto de genes muy polimórficos localizados en el cromosoma 6 humano, cuyos productos se expresan en las superficies de varios tipos de células, entre ellos las células presentadoras de + antígenos (APC), en este caso encargadas de presentar el gluten a las células T CD4, desencadenándose así la reacción inmunológica característica de la enfermedad celiaca. A estas proteínas de superficie también se las conoce como antígenos leucocitarios humanos (HLA), debido a que se expresan en este tipo de células. Cada molécula MHC es un heterodímero y consiste en una cadena y una cadena. En el caso de la molécula DQ, la cadena está codificada por el gen HLA-DQA1 y la cadena por el gen HLA-DQB1. 8
10 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA HLA-DQ2 Y HLA-DQ8 La primera asociación descrita entre la enfermedad celiaca y el sistema HLA fue con la 1 molécula de clase II HLA-DR3. Posteriormente se comprobó que la asociación era más fuerte con 2 el heterodímero HLA-DQ2, codificado por los alelos DQA1*0501 y DQB1*0201. Los genes DQA1*0501 y DQB1*0201 están localizados en el mismo cromosoma (cis) en individuos que también son DR3, mientras que en individuos que son DR5/DR7 se localizan en 3 cromosomas diferentes (trans). Los celíacos que no son DR3 muy frecuentemente son DR5/DR7. Los individuos que son DR3 casi siempre son DQ2, ya que los genes que codifican para DR3 y DQ2 se encuentran en desequilibrio de ligamiento, formando parte de un bloque génico conservado. DQA1*0501 comparte bloque con DR5, y DQB1*02 con DR7, de modo que los individuos que son DR5/DR7 suelen poseer también DQA1*0501 and DQB1*02. En población caucásica, aproximadamente el 95% de los casos están asociados al 2,4 heterodímero HLA-DQ2. A pesar de la alta prevalencia de HLA-DQ2 en la población general (25-30%), apenas una pequeña proporción de estos individuos desarrollan la enfermedad. El resto de 2 los pacientes (<5%) son portadores de HLA-DQ8 (alelos DQA1*0301 y DQB1*0302), asociado a la molécula HLA-DR4 2,5 (alelo DRB1*04). 1. Ek et al., Scand J Gastroenterol 13: Sollid et al., J Exp Med 169: Sollid y Thorsby, Gastroenterology 105: Ploski et al., Tissue Anyigens 41: Spurkland et al., Hum Immunol 35:
11 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA GENES NO-HLA Las diferencias en las tasas de concordancia de enfermedad celiaca entre gemelos monocigóticos y entre hermanos con idéntico HLA, junto con la constatación de que existe una pequeña proporción de individuos HLA-DQ2 que no presentan la patología, sugieren fuertemente el papel de factores ambientales y de genes no-hla en el desarrollo de esta enfermedad. Considerando que a la enfermedad celiaca le ha sido atribuida una respuesta inmune mediada por células T frente a las proteínas del gluten, otros genes que también mediasen esta respuesta podrían contribuir potencialmente a la susceptibilidad al desarrollo de esta patología. Entre estos genes se podrían incluir los genes de receptores de células T (TCR), genes inmunomoduladores, genes que codifican moléculas de adhesión celular, citoquinas y receptores 1 de citoquinas. Es éste un campo aún desconocido, pero en el que en la actualidad se están centrando los esfuerzos investigadores. 1. Utiyama et al., Arq Gastroenterol 41(2):
12 ENFERMEDAD CELIACA Y GENÉTICA GENOTIPADO DE HLA EN ENFERMEDAD CELIACA La expresión de las moléculas HLA-DQ2 y HLA-DQ8 es un componente genético esencial en el desarrollo de la enfermedad celiaca, ya que son necesarias para la reacción inmune contra el 1 gluten. A pesar de que cerca del 30% de la población general posee las moléculas HLA-DQ2 y HLA-DQ8, más del 95% de los celíacos los presentan, por lo que un resultado negativo para ambos marcadores tiene un excelente valor predictivo negativo para la enfermedad. Por ello, GENYCA INNOVA ofrece un servicio de genotipado HLA específico para enfermedad celiaca, con el fin de identificar los alelos más fuertemente asociados a esta patología (HLA-DQ2 y HLA-DR4), mediante el empleo de las técnicas de genética molecular más sensibles y específicas, y ofreciendo en todo momento al paciente comodidad, rapidez y calidad en el análisis. 1. Alaedini y Green, Ann Intern Med 142:
13 DATOS GENÉTICOS HUMANOS Debido a la sensibilidad de los datos que se generan en los estudios moleculares, todos los resultados recogidos en la base de datos de GENYCA INNOVA son tratados de acuerdo con la Ley Orgánica 15/99 de 13 de Diciembre de Protección de Datos de Carácter Personal. En este sentido, y siempre con la pretensión de aportar los resultados en el contexto más correcto posible, es política de GENYCA INNOVA la necesidad de que la muestra venga acompañada siempre de la correspondiente prescripción médica. Asimismo, es el médico prescriptor de la prueba al que se remite el informe con el resultado de la misma, de modo que el paciente recibe la información directamente de mano de su facultativo y en el contexto del correspondiente asesoramiento. 12
14 DATOS GENÉTICOS HUMANOS Dentro de la correcta práctica sanitaria y debido a las particularidades de los datos genéticos antes señalados, para la realización de estudios genéticos moleculares la muestra debe ir acompañada siempre del correspondiente consentimiento informado firmado por el paciente. Este consentimiento informado pone de manifiesto el acuerdo del paciente a someterse al análisis prescrito, y también que es conocedor de la trascendencia de los resultados y de su derecho a revocar el consentimiento prestado con anterioridad. GENYCA INNOVA subraya la necesidad de actuar siempre cumpliendo unas estrictas pautas de bioética básica, y para ello mantiene el contacto constante con especialistas en este campo, capaces de aportar en todo momento la visión más completa y justa de cualquiera de las situaciones que se puedan plantear. 13
15 GENYCA INNOVA OFRECE - Rapidez: conscientes del interés de los datos moleculares solicitados por el cliente, el laboratorio proporciona los resultados de las determinaciones en 7 días desde la recepción de la muestra (salvo excepciones), con la posibilidad de solicitar un servicio Express. - Propuesta amplia y centralizada de servicios de Genética Molecular, gracias a una elevada especialización del laboratorio, el equipamiento y el personal, en las más modernas y avanzadas técnicas de la disciplina. - Comodidad en la toma de muestra, sobre un soporte fácil de manejar que GENYCA INNOVA le proporciona. Asimismo, queda incluido el servicio de mensajería hasta el laboratorio. - Facilidad de acceso a la información y posibilidad de seguimiento del análisis por parte del facultativo a través de la página web de GENYCA INNOVA. - Personalización en la selección de determinaciones para el estudio molecular de cada paciente, adaptándonos a la necesidad de cada cliente. - Calidad en todo el proceso del análisis molecular: en la toma e identificación de la muestra, en la práctica de laboratorio, y en la transmisión de resultados. 14
16 CONTACTE CON GENYCA INNOVA Web Teléfono / FAX Dirección C/ Alegría 18, Majadahonda MADRID info@genyca.es A-6 SALIDA 79 SAN VICENTE SAN JULIÁN ALEGRÍA G M-50 SAN PEDRO GRANADILLA 15
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