Quijano Pérez, Luis Alberto., (MVZ) 1, Artunduaga Romero, Jarlinson., (MVZ) 1., López Rojas, Robinson., (Msc (c)) 2.
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- Lourdes Serrano González
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1 REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN Evaluación de dos protocolos de inseminación artificial a término fijo (IATF) con dos inductores de ovulación (benzoato de estradiol y cipionato de estradiol) en vacas raza criollo caqueteño en el departamento del Caquetá - Evaluation of two protocols of fixed-term artificial insemination (TAI) with two inductors of ovulation (estradiol benzoate and estradiol cypionate) in Caqueta native breed cows in the department of Caqueta. Quijano Pérez, Luis Alberto., (MVZ) 1, Artunduaga Romero, Jarlinson., (MVZ) 1., López Rojas, Robinson., (Msc (c)) Estudiante Medicina Veterinaria y Zootecnia Universidad de la Amazonía, Sede Principal Calle 17 Diagonal 17 con Carrera 3F Barrio Porvenir, Suramérica Florencia-Caquetá-Colombia. luisquijanomvz@hotmail.com 2. Médico Veterinario Zootecnista Universidad de la Amazonia, Florencia- Caquetá-Colombia, candidato a magister Universidad de la Amazonia, Florencia-Caquetá-Colombia, docente Universidad de la Amazonía. Resumen Se evaluaron dos protocolos de inseminación artificial a término fijo (IATF) con dos inductores de ovulación, benzoato de estradiol (BE) y cipionato de estradiol (CPE), en vacas raza Criollo Caqueteño en el departamento del Caquetá- Colombia, comparando la respuesta morfométrica ovárica determinando el diámetro del folículo dominante y folículo preovulatorio el día 8 y 10 respectivamente, la presentación de celo y el porcentaje de preñez en cada uno de los tratamientos. Para el tratamiento uno donde se utilizó el BE (n=5) como inductor de ovulación aplicado el día nueve, se encontró un tamaño promedio del folículo dominante de 13,16 mm (+-0,59) (P=0,0006), y un tamaño promedio del folículo preovulatorio de 17,30 mm (+-1,13) (P=0,0150), en la presentación de celo se obtuvo una calificación promedio de 100,2 puntos y un porcentaje de preñez de 40 %, para el tratamiento dos donde se utilizó CPE (n=6) como inductor de ovulación aplicado el día 8, se encontró un tamaño promedio del folículo dominante de 9,08 (+-0,54) (P=0,0006) y un tamaño promedio del folículo preovulatorio de 12,70mm (+- 1,03) (p=0,0150), en la presentación de celo se obtuvo una calificación promedio de 103,67 puntos y un porcentaje de preñez de 33.33%. En conclusión las diferencias farmacológicas presentadas por BE y CPE también se evidenciaron en el 1
2 presente estudio, donde se encontró un mayor diámetro tanto del folículo dominante como preovulatorio y una mayor tasa de preñes para el tratamiento donde se empleó el benzoato de estradiol como inductor de ovulación. Palabras claves: Estradiol, folículo, sincronización, celo, preñez. Abstract Two protocols of fixed-term artificial insemination (TAI) with two inductors of ovulation, estradiol benzoate (BE) and estradiol cypionate (CPE) were evaluated in cows breed Criollo Caqueteño in Caqueta, Colombia, comparing morphometric response ovarian determining the diameter of the dominant follicle and preovulatory follicle day 8 and 10 respectively, the presentation of estrus and pregnancy rates in each of the treatments. For treating one where the BE (n = 5) as inducing ovulation day nine applied was used, an average of the dominant follicle size of mm ( ) (P = ) was found and an average size of the preovulatory follicle 17,30 mm ( ) (P = ), the presentation of heat an average score of points and 40 pregnancy rate was obtained %, for treatment where two CPE (n = 6) was used to induce ovulation applied on day 8, an average size of the dominant follicle of 9.08 ( ) (P = ) was found and an average size of the preovulatory follicle 12,70mm ( ) (p = ), in presenting zeal an average of points and a pregnancy rate of 33.33% was obtained qualification. In conclusion pharmacological differences presented by BE and CPE also demonstrated in this study, where a larger diameter of the dominant follicle as both preovulatory and a higher rate of treatment preñes where estradiol benzoate was used to induce ovulation found. Keywords: Estradiol, follicle, synchronization, estrus, pregnancy. Introducción El bovino criollo americano desciende directamente de los animales que llegaron en el segundo viaje de colon en 1493 (Primo, 1992), surgiendo como producto de cruces indiscriminados, procesos de selección natural e intervención humana que han dado origen a estas razas con gran diversidad genética y adaptación a una gran variedad de situaciones ecológicas y de cría, por lo que resultan indispensables para el mantenimiento de la productividad (Calero et al, 2008). La población bovina en Colombia está estimada en 23 millones de cabezas de ganado, de los cuales solo unos animales son de razas bovina criollas y colombianas (Anzola, 2005), lo que demuestra la baja proporción de bovinos 2
3 criollos. Según los criterios establecidos por la FAO para que una raza sea catalogada como en peligro de extinción, debe de tener un numero de hembras reproductoras entre 100 y 1000 y un numero de sementales entre 5 a 20 o censos ligeramente superiores, con un nivel de cría en pureza de las hembras menor del 80% (Calero et al, 2008). Según las últimas cifras disponibles de la FAO, alrededor del 22 % de las ocho mil razas bovinas criollas del mundo están todavía clasificadas como en peligro de extinción, Según Anzola et al (2003) Colombia es el país de américa latina que más razas criollas posee pero a pesar de esto del inventario total de bovinos solo el 0.08% corresponde a razas criollas que han sido sometidas a cruzamientos absorbentes y por tanto puestas en peligro de extinción (Gutiérrez et al, 2003), esta situación sin duda es reflejo del desconocimiento por parte de ganaderos de las bondades de estas razas y por falta de políticas claras del gobierno en la conservación y multiplicación de las mismas. Los recursos genéticos locales (Razas criollas) son importantes porque representan recursos alternativos para mantener la producción animal bajo cualquier cambio drástico de tipo ambiental o económico (Segura & Montes, 2001). Según Sastre et al, (2009) las razas bovinas criollas colombianas se caracterizan por su valor genético, insustituible para la producción ganadera en los climas cálidos y húmedos aportando genes mejorantes de fertilidad y resistencia, importante en el proceso de adaptación de bovinos sensibles a las duras condiciones tropicales. La raza bovina criollo caqueteño, hace parte de las ocho razas criollas colombianas que surgen como resultado del apareamiento hecho en el continente americano entre los varios tipos de ganado comunes en España en la época del descubrimiento y conquista. Estos ganados fundadores se aparearon de forma indiscriminada y sometidas bajo la acción de la selección natural que les ha permitido perdurar en el tiempo por su grado de adaptación, lo que indica que las razas criollas son individuos adaptados a ambientes inhóspitos (Corpoica, 2007). Según el comité departamental de ganaderos del Caquetá (2012) se cuenta con un inventario no mayor a 350 ejemplares de la raza Criollo Caqueteño, ante esta situación una de las alternativas para su repoblamiento ganadero seria la utilización de biotecnologías reproductivas que hoy se manejan en el mercado generando un mejor aprovechamiento que permita conocer la respuesta de la raza frente a distintos protocolos comerciales de inseminación artificial a término fijo (IATF). La inseminación artificial a término fijo (IATF), es una técnica que permite sincronizar los celos y ovulaciones de los bovinos, mediante la utilización de hormonas, lo cual hace posible inseminar una gran cantidad de animales en un corto periodo de tiempo (Raso, 2012), permite aumentar significativamente el número de animales inseminados debido a que los protocolos de (IATF) hacen posible realizar la inseminación artificial (IA) sin necesidad de detectar el celo 3
4 (Cutaia, 2006; Villa et al, 2007; Bó et al, 2008). Los tratamientos que combinan GnRH con PGF y los que utilizan combinaciones de estrógenos y progesterona han demostrado ser los más efectivos en el control del ciclo estral para la implementación de la (IATF) (Cutaia, 2014). El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar dos protocolos de inseminación artificial a término fijo (IATF) con dos inductores de ovulación (benzoato de estradiol y cipionato de estradiol) en vacas raza criollo caqueteño en el departamento del Caquetá, comparando la presentación de celo, la respuesta morfo métrica ovárica y el porcentaje de preñez presentado por cada uno de los tratamientos. Materiales y métodos La investigación se realizó en dos predios rurales del departamento del Caquetá-Colombia: Centro de Investigaciones Amazónicas (CIMAZ Macagual) y hacienda El Pensil: CIMAZ es un predio rural ubicado a 20 Km de Florencia, al sur del departamento del Caquetá, con cerca de 380 hectáreas dedicado a la explotación ganadera, con algunos arreglos agroforestales, (Uniamazonia, 2013). Por su parte la unidad productiva El Pensil está ubicada en el municipio de la montañita en el norte del departamento del Caquetá a una altura de 233 msnm con latitud 1 28'6.1" y longitud '26.85", se maneja una producción ganadera doble propósito y posee un núcleo puro de la raza criollo Caqueteño. Determinación del tamaño de la muestra y selección de animales Se trabajó con un total de 11 vacas de la raza criollo caqueteño escogidas bajo los siguientes parámetros de selección: Condición corporal: Las hembras destinadas a la implementación de los distintos protocolos de IATF se seleccionan de acuerdo a la condición corporal siendo 3.5 la condición ideal para hacer parte de la muestra en la investigación. Estado reproductivo: Para la determinación del estado reproductivo se emplean las técnicas de ultrasonografía y palpación rectal, cuya finalidad es identificar vacas vacías y en estado fisiológico reproductivo normal, observar estructuras anatómicas del aparato reproductor como ovarios, estado de los mismos y presencia tanto de folículos como cuerpos lúteos presentes, determinando las fases del ciclo estral. Número de partos: Para el estudio se emplean hembras con número de partos mayor o igual a tres que indique su estado de madurez sexual ya que según Entwiatle (1993), citado por Aban et al (2008) el cual indica que se logran porcentajes de gestación entre 60 y 90 % en hembras con más de dos partos. 4
5 Estado sanitario: Teniendo en cuanta la importancia de este parámetro se indica que las hembras utilizadas para el estudio deberán estar libre de enfermedades reproductivas y por análisis de registros se tiene en cuenta problemas reproductivos, ya que son problemas dicientes de la calidad del animal y puede comprometer o alterar los resultados del estudio. Manejo: Para garantizar la homogeneidad de los resultados y facilitar el análisis de datos en el estudio se emplean animales sometidos a manejos similares de finca como lo es el libre pastoreo, similar sistema de producción, suplementación característica de las unidades productivas de la región y condiciones ambientales propias de la zona. Su disponibilidad de sal y agua a voluntad. Implementación de protocolos: Para el control del ciclo estral en bovinos se emplean tratamientos hormonales de dosis múltiples dispuestos en orden de acuerdo a la función de cada componente del tratamiento llamados protocolos de reproducción programada mediante técnicas como la (IATF) (Intervet 2007), de acuerdo a esto la muestra se dividen en dos grupos, un grupo de 5 vacas a las que se le aplica el tratamiento 1, y el segundo grupo de 6 vacas se les aplica el tratamiento 2 que se describen a continuación: Figura 1. Implementación de protocolos (DIB, Dispositivo intravaginal bovino; BE, benzoato de estradiol; CPE, cipionato de estradiol, ecg, gonadotropina coriónica equina; PGF 2α, Prostaglandina; IATF, Inseminación artificial a término fijo). Los tratamientos corresponden a la aplicación de las hormonas en 10 días de duración divididas en cuatro aplicaciones por vaca, distribuidas en la siguiente manera: Tratamiento N 1: El día 0: se realiza la aplicación del dispositivo intravaginal bovino vía I.Vg, y se realiza la aplicación de la primera dosis de Benzoato de Estradiol con 2.5 ml vía IM, el día 8 se procede a retirar el dispositivo intra-vaginal, seguido de la aplicación de una dosis de prostaglandina de 2 ml vía IM, y 2 ml de Novormon (ecg) vía I.M, el día 9 5
6 se aplica nuevamente 1 ml vía I.M. De Benzoato de estradiol, el día 10 se procede a realizar la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) vaca por vaca a las horas post retirado el dispositivo. Tratamiento N 2: El día 0: se realiza la aplicación del dispositivo intravaginal bovino vía I.Vg, y se realiza la aplicación de la primera dosis de Benzoato de Estradiol con 2.5 ml vía IM, el día 8 se procede a retirar el dispositivo intra-vaginal, seguido de la aplicación de una dosis de prostaglandina de 2 ml vía IM, y 2 ml de Novormon (ecg) vía I.M, seguido de aplicación de Cipionato de estradiol 2 ml vía I.M, el día 10 se procede a realizar la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) vaca por vaca a las horas post retirado el dispositivo. Evaluación de celo: Se realizó mediante observación visual en horas de la mañana y en horas de la tarde (06:00 Am; 05:00 Pm), por un periodo de 60 minutos observando la presentación de signos característicos del celo y calificando cada animal de acuerdo al sistema de puntuación propuesto por Van Eerdenburg et al. (1996) quien establece la siguiente tabla: Tabla 1. Sistema de puntuación para comportamiento estral. SIGNO PUNTOS Descarga Vaginal Mucosa 3 Intranquilidad y Nerviosismo 5 Olfatear genitales de otras vacas 10 Apoyo de la barbilla 15 Monta pero no estática 10 Monta o intenta montar otras vacas 35 Montando la cabeza de lado sobre otra vaca 45 Monta estática 100 Fuente: Van Eerdenburg et al. (1996) Medición de diámetro folicular y Diagnóstico de preñez: Para evaluar la respuesta morfométrica ovárica se llevó acabo un examen ecográfico transrectal con ecógrafo Falco 100 con traductor lineal a 7,5 MHz, el día 8 donde se midió el diámetro del folículo dominante (FD) y el día 10 se mide el diámetro del folículo preovulatorio. Para determinar el porcentaje de preñez, a los 60 días pos I.A.T.F se realiza un examen ecográfico transrectal, determinando la presencia o no de estructuras compatibles con el desarrollo de una gestación temprana y evaluando el estadio fisiológico en que se encuentra el aparato reproductor de cada de hembra. 6
7 Análisis de información La sistematización de la información colectada, generación de bases de datos y gráficas se realizaron en Excel para Windows 2013; el desarrollo del análisis estadístico y prueba de comparación de medias usando la Prueba LSD de Fisher fue realizado con el programa estadístico InfoStat, versión Resultados y discusión Este es el primer estudio realizado en la raza Criollo Caqueteño donde se evalúa la respuesta morfométrica ovárica (Tabla 2), la presentación de celo y el porcentaje de preñez de dos inductores de ovulación utilizados en protocolos de IATF. Tabla 2. Efecto de Benzoato de estradiol (BE) y Cipionato de estradiol (CPE), en la respuesta morfométrica ovárica en vacas criollo Caqueteño. BE CPE P Animales 5 6 Diámetro del FD (mm) 13, ,59 9, ,54 0,0006 Diámetro del FP (mm) 17, ,13 12, ,03 0,0150 Crecimiento día (mm) 2, ,48 1, ,44 0,6989 FD: Folículo dominante; FP: Folículo preovulatorio. En el estudio se encontró un tamaño promedio del folículo dominante (FD) para el tratamiento con BE de 13,16 mm (+-0,59) y de 9,08 mm (+-0,54) para el tratamiento con CPE, existiendo una diferencia significativa (P>0,05) para los dos grupos de vacas tratadas respectivamente. Según Sales et al, (2012) en un estudio realizado en vacas Nelore reporta un diámetro del FD de 10,2 mm +- 0,3 cuando se utilizó BE y de 9,9 mm +-0,3 cuando se utilizó CPE (P=0,76), siendo menor el tamaño del FD con BE y mayor con CPE en comparación a los diámetros del FD encontrados en vacas de la raza Criollo Caqueteño, y muy similar el comportamiento de superioridad en tamaño del FD del tratamiento donde se utilizó BE. El diámetro del folículo preovulatorio (FP) para el tratamiento con BE fue de 17,30 +-1,13 y de 12,70 +-1,03 para el tratamiento con CPE, hallándose una diferencia significativa (P>0,05) entre los dos tratamientos, y comparado con lo reportado en vacas Nelore por Sales et al, (2012), quien encontró un diámetro máximo del FP de 13,1 mm (+-0,4) para BE y de 13,9 mm (+-o,4) para CPE (P=0,11), el diámetro del FP en vacas Criollo Caqueteño es mayor cuando se utiliza BE y menor cuando se utiliza CPE, característica importante a considerar en la elección de un protocolo de IATF, pues existe una relación directa entre el diámetro del folículo preovulatorio y el tamaño del cuerpo lúteo (CL) (Vasconcelos et al, 2011). En relación al crecimiento folicular diario entre tratamientos, aspecto importante para determinar la dinámica folicular de las hembras de la raza se 7
8 encontró que cuando se utilizó BE y CPE las tasas de crecimiento fueron de 2,07 mm (+-0,48) y de 1,81 mm (+-0,44) respectivamente (P=0,6989), se determinó estadísticamente que no existe diferencia significativa (P>0,05) entre el crecimiento diario folicular presentado en los dos grupos de vacas sometidas a los dos tratamientos. La presentación de celo para cada tratamiento que se evaluó en base a la tabla de puntuación (Tabla 1), descrita por Van Eerdenburg et al. (1996), se encontró una calificación promedio de 100, 2 puntos para las vacas (n=5) sometidas al tratamiento con BE y para las vacas (n=6) tratadas con CPE se obtuvo una puntación promedio de 103,67, lo que demuestra que ambos tratamiento fueron eficientes al inducir la presentación de signos característicos del celo. Referente al porcentaje de vacas que presentan respuesta a los protocolos mostrando signos evidentes de celo, para este estudio todas las vacas sometidas tanto al protocolo con BE y CPE respondieron manifestando el celo (100%), resultado que difieren a los reportados por Peralta et al, (2010) quien en un estudio realizado en vacas Bos indicus (Brahmán comercial), encontró un porcentaje de hembras que presentaron celo de 79% y 72% para BE y CPE respectivamente. El porcentaje de gestación ( Figura 2.) para cada uno de los tratamientos fue de BE (40%) y CPE (33,33%), que difiere de los reportado por Peralta et al, (2010) quien en un estudio realizado en vacas Bos indicus (Brahmán comercial), encontró un porcentaje de gestación de 30% y 51% para BE y CPE respectivamente, lo que permite inferir que el resultado de gestación para cada uno de los tratamientos es variable y está sujeta a otros factores como la raza. Igualmente los resultados obtenidos difieren de los reportados por Torquati, Cabodevila & Callejas (2011), quienes en un estudio en vacas Angus encontraron un porcentaje de gestación de 48,2% con BE y de 53% con CPE. 8
9 Figura 2. Efecto de Benzoato de estradiol (BE) y Cipionato de estradiol (CPE), en el porcentaje de preñes en vacas criollo Caqueteño. Conclusiones Las diferencias farmacológicas presentadas por BE y CPE también se evidenciaron en el presente estudio en relación a la respuesta morfométrica ovárica, presentación de celo y porcentaje de preñez presentados en las vacas de las raza Criollo Caqueteño. Evidenciándose un mayor diámetro tanto del folículo dominante como del folículo preovulatorio y un mayor porcentaje de preñes para el tratamiento donde se empleó el benzoato de estradiol como inductor de ovulación. Finalmente se enmarca la importancia de establecer estrategias de conservación y multiplicación de la raza para el desarrollo de futuras investigaciones en relación a la resistencia que pueda tener a diferentes enfermedades pues, si se extingue la raza antes de que se identifiquen sus cualidades de resistencia ante las enfermedades, se perderán para siempre recursos genéticos que podrían contribuir en gran medida a la mejora de la sanidad animal y la productividad. Agradecimientos Los autores agradecen al Semillero de Investigación en Bovinos de la raza Criollo Caqueteño (SICCAQ) y a la Universidad de la Amazonia por los años de formación brindada, a nuestros docentes y familiares por el apoyo incondicional y aportes valiosos para el desarrollo de esta investigación. Bibliografía Aban J; & Delgado R; & Magaña J; & segura J. (2008). Factores que afectan el porcentaje de gestación a 120 días posparto en vacas cebú y cruzas con europeo en el sureste de México. Disponible en: Anzola, H., Martínez, R., Ossa, G., & Neira, J. (2003). Desarrollo en Colombia de un programa nacional de fomento de bovinos criollos. Corpoica. Disponible en: LOMBIADEUNPROGRAMANACIONALDEFOMENTODEBOVINOSCRIOLLOS.pd f Bó, G. A., Cutaia, L. E., Souza, A. H., & Baruselli, P. S. (2008). Actualización sobre protocolos de IATF en bovinos de leche. In Proceedings of the 3th International Symposium on Animal Reproduction Applied. Londrina, Brazil (pp ). Calero, R., Bravo, J. A., & Bartolomé, P. (2008). Razas autóctonas extremeñas en peligro de extinción. Disponible en: 9
10 academica/centros/eia/archivos/iag/2007/2007_11%20razas%20autocto nas%20extremenas%20en%20peligro%20de%20extincion.pdf Cómite Departamental De Ganaderos De Caquetá. (2012). Registro de Ganado Criollo Caqueteño en el Departamento. Informe Inedito. Florencia. S.N. 5 p. Informe Técnico de Asistegan-Fedegan. Corpoica. (2007). Manual de conservación, multiplicación y mejoramiento de las razas criollas colombianas. Disponible en: criollos.pdf Cutaia, L. (2006). Inseminación artificial a tiempo fijo (IATF): Una herramienta para el mejoramiento genético. Instituto de reproducción animal córdoba; universidad católica de córdoba. Disponible en: animal.com.ar/informacion_tecnica/inseminacion_artificial/60- ia_a_tiempo_fijo.pdf Cutaia, L. E. (2014). Programas de inseminación artificial a tiempo fijo: análisis de costos e implementación. Consultado el 18/03/2014. Disponible en: TF_monta_natural.pdf Di Rienzo J.A., Casanoves F., Balzarini M.G., Gonzalez L., Tablada M., Robledo C.W.(2008). InfoStat, versión 2008, Grupo InfoStat, FCA, Universidad Nacional de Córdoba,Argentina. FAO. (2014). Los recursos zoogenéticos y la resistencia ante enfermedades. Consultado el 24/03/ Disponible en: Gutierrez W; & Martinez R; & Anzola H. (2003), situación de los recursos zoogeneticos en Colombia. Ed, produmedios, Bogotá Dc- Colombia. Disponible en: ftp://ftp.fao.org/docrep/fao/010/a1250e/annexes/countryreports/colom bia.pdf Intervet. (2007). Compendium de reproducción animal. Ptaszynsk, M. editora de la 9ª edición. Disponible en: ion%20animal%20intervet.pdf Peralta, J., Aké, J. R., Centurión, F. G., & Magaña, M. G. (2010). Comparación del cipionato de estradiol vs benzoato de estradiol sobre la respuesta a estro y tasa de gestación en protocolos de sincronización con CIDR en novillas y vacas Bos indicus. Universidad y ciencia. 26(2): Raso, M. (2012). Inseminación artificial a tiempo fija (IATF). Disponible en file:///c:/users/toshiba%202014/downloads/inta_ganaderia46_insemi nacion_ovina.pdf Sales, J., Carvalho, J., Crepaldi, G., Cipriano, R. S., Jacomini, J., Maio, J., Souza, J. C., Nogueira, G.P., & Baruselli, P.S. (2012). Effects of two estradiol esters (benzoate and cypionate) on the induction of 10
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