EFECTIVIDAD DE DISTINTOS PRODUCTOS PARA LA ELIMINACIÓN DE FORMAS PARASITARIAS DE UN VEGETAL DE CONSUMO HUMANO
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- Nieves San Segundo Valverde
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2 EFECTVDAD DE DSTNTOS PRODUCTOS PARA LA ELMNACÓN DE FORMAS PARASTARAS DE UN VEGETAL DE CONSUMO HUMANO ERNESTO RAMÍREZ MORENO*, RCARDO ALEJANDRE AGULAR** * Laboratorio de Protozoología, **Laboratorio de Entomología. Departamento de Parasitología Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del.p.n. ntroducción La importancia que tiene el conocimiento de la frecuencia con la que se presentan las infecciones por protozoarios y helmintos intestinales en humanos es esencial, ya que dicho antecedente epidemiológico puede orientar el diagnóstico clínico y el eventual criterio terapéutico a seguir. La alta prevalencia de tales infecciones en grandes áreas del mundo, ha llevado al estudio de estas parasitosis en regiones tropicales y subtropicales en diversas ciudades del mundo lo cual ha arrojado datos epidemiológicos sobre geohelmintiasis gastrointestinales cuyos principales agentes etiológicos son Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Enterobius vermicularis, que infectan un billón de personas por año de ellas, A. lumbricoides es el más importante ya que infecta aproximadamente a 33% de la población mundial, Trichuris trichiura ocupa el segundo lugar 1,4,5. Algunas cifras de frecuencia de protozoarios patógenos que afectan al hombre en la República Mexicana continúan siendo muy altos, en las últimas décadas se informan los valores promedio de 3.6% para amibiasis,.3% para Giardiasis y 39.3% para Criptosporidiasis. 1 La utilización de aguas negras como fuente de riego constituye un mecanismo de diseminación de parásitos, investigadores como Álvarez, y col 6., en 1999 realizaron un estudio en la ciudad de Querétaro, México en el que evaluaron la efectividad de tratamientos con plata coloidal, ppm de cloro activo y un producto comercial denominado G-T cuyo principio activo es un derivado del producto PG y que cuenta con actividad germicida y tensoactiva para la remoción de cuatro serovares de Salmonella y cuatro cepas de Escherichia coli O157:H7 de lechuga. El producto G-T y el cloro disminuyeron la población de los patógenos en las lechugas significativamente con respecto a los niveles observados por el lavado con agua o tratamiento con plata coloidal. 6
3 Vázquez y Martínez 3 en 1997 en la Ciudad de México analizaron vegetales de consumo humano, encontrando huevos de Ascaris lumbricoides en zanahorias, papas, hongos y espinacas; quistes de Entamoeba coli en zanahorias y huevos de Toxocara sp. en zanahorias y rábanos. En otro estudio se detectó la ingestión de quistes de protozoarios como Giardia lamblia y de huevos de helmintos como Ascaris lumbricoides, 1,. Ghilerme y col. encontraron que un 16 % de una muestra de vegetales estudiados presentaban contaminación con parásitos intestinales 3. Objetivo. nvestigar la eficacia de tres agentes desinfectantes para eliminar formas parasitarias de la superficie de un vegetal de consumo humano. Metodología Se empleó lechuga (Lactucca sativa), quistes de E. coli y huevos de A. suiss, A partir de muestras de heces humanas previamente diagnosticadas como positivas, se obtuvieron los concentrados de quistes de Entamoeba coli utilizando el principio de la técnica de concentración por flotación con Sulfato de Zinc. El total de cada muestra de heces se tamizó en y se colocaron en tubos falcón, posteriormente se centrifugaron a 5g durante 5 minutos. Se retiró el sobrenadante y se agregó solución de sulfato de zinc con densidad de Se centrifugó a 35g durante 5 minutos y se dejaron reposar los tubos durante 3 minutos, posteriormente se retiró con una pipeta Pasteur el sobrenadante de la superficie (aproximadamente 1 ml). Este sobrenadante se depositó en un tubo de ensaye, después se lavó agregando agua hasta 1 cm antes del borde del tubo y se centrifugó a 5g durante 5 minutos. Se eliminó el sobrenadante y se agregó agua al sedimento, se repitió el procedimiento de lavado 3 veces. Para preparación del stock de huevos de Ascaris suum se realizó la disección de hembras adultas mediante un corte longitudinal del parásito para localizar el útero, se separó la parte distal del útero en donde se encuentran los huevos maduros, los cuales fueron colocados en un tubo de ensaye con solución salina y
4 se homogenizaron. Se lavaron 3 veces con solución salina. Debido a la adhesividad que confiere la cuarta capa de naturaleza proteica a los huevos de los ascaridos (incluido Ascaris lumbricoides), fue necesario bloquear esa proteína para obtener resultados reproducibles. Se inocularon con 3 quistes y 3 huevos respectivamente sobre fragmentos de 1 cm de lechuga (por quintuplicado), se permitió la fijación por desecación y se sometieron a inmersión simple durante 5 min en soluciones de hipoclorito de sodio a ppm y dos formulaciones de un producto comercial con laurilsulfato de sodio al.5% (productos L-S1 y L-S). Se cuantificaron las formas parasitarias removidas de la superficie de los vegetales y se comparó la efectividad de los tratamientos con el numero de lavados con agua simple bajo las mismas condiciones. También se estudió el efecto del hipoclorito de Sodio y del producto L-S1 sobre la embrionación de huevos de A. suiss, los cuales se sumergieron en los agentes durante 5 y 1 minutos, posteriormente se mantuvieron bajo condiciones de embrionación días y se determinó la cantidad de huevos con juveniles. Resultados En la tabla 1 y gráfica 1 se muestran los resultados de la eficacia de soluciones del producto PG3, hipoclorito de sodio ppm, plata coloidal y agua para eliminar huevos de Ascaris suum de la superficie de fragmentos de lechuga por inmersión y agitación. Podemos observar que en el método de inmersión la solución del producto PG3 logra la eliminación del 51% de los huevos de Ascaris suum de la superficie de lechuga, las otras soluciones incluyendo el agua presentan porcentajes de eliminaciones semejantes y por debajo del 45%. Por agitación, con el producto PG3 se logra la eliminación del % de los huevos de A. suum de la superficie de la lechuga, para la solución de hipoclorito ppm tenemos un porcentaje del 98.1% y para la solución de plata coloidal una eliminación del 99.1%.
5 Tabla 1 Eliminación de huevos de Ascaris suum de la superficie de secciones de lechuga empleando PG3, de sodio ppm, plata coloidal y agua por inmersión y agitación. Tratamiento Agente No. De huevos antes del tratamiento PG N M E R S Ó N A G T A C O N CONTROL (+) TALLADO de sodio ppm Plata coloidal Agua PG de Na ppm Plata coloidal Agua 73 3 Agua No. De huevos después del tratamiento No. De huevos Eliminados % de eliminacion ± ± ± ±.1 ± ± ± ± ±.33 Porciento de eliminación(%) PG3 Plata coloidal nmersión Agua PG3 Plata coloidal Agitación Agua Control de Tallado Gráfica 1. Eliminación de huevos de Ascaris suum de secciones de lechuga empleando PG3, ppm, plata coloidal y agua.
6 Los resultados para hipoclorito de sodio mostraron un promedio del 43.3% de eliminación de huevos de A. suiss y 11.6% de eliminación de quistes de E. coli, para el producto L-S1 se obtuvo un 66% de eliminación de A. suiss y 4% para E. coli. Con el producto L-S se obtuvo un 51.1% de eliminación de A. suiss y 13.66% para E. coli. Para el agua, el valor obtenido es de 1.87% para E. coli y de 4.6% para A. suiss. En el caso de la embrionación se obtuvieron valores mayores al 93% en todos los casos. Conclusiones Salvo el producto LS-1, los demás mostraron una capacidad menor al 5% de eliminación de formas parasitarias y es necesario buscar alternativas para esta finalidad pues para los parásitos es suficiente uno o dos especimenes para lograr la infección. La embrionación de A. suiss es insensible a los tratamientos aplicados. Bibliografía 1. Anderson, R The population dynamics and epidemiology of intestinal nematode infection. Trans. Roy. Soc. of Trop. Med. and Hyg. 8: Bier, J.W solation of parasites on fruits and vegetables. Sotuheast Asian J. of Trop. Med of Pub. Health. Supl: Vazquez, O., Martinez,., Tay, J.,Ruiz, A., Pérez, A Verduras de consumo humano como probable fuente de infección de Toxocara sp. para el hombre. Boletín Chileno de Parasitología 5(3-4): Bundy, D.,1986 Epidemiological aspects of Trichuris and Trichuriasis in Caribbean communities. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene 8: Holland, C.V., O Shea, E A cost-effectinenes analysis of anthelmintic intervetion for community control of soil-transmitted helminth: Levamisole and Ascaris lumbricoides. Journal of Parasitology 8(4): Álvarez, B., Evaluación de tratamientos antimicrobianos que se aplican en frutas y verduras. Memorias del XXX Congreso Nacional de Microbiología. Asociación Mexicana de Microbiología..pp 7
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