UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO ACADEMICO DE BIOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA

Transcripción

1 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO ACADEMICO DE BIOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA INFORME DE INVESTIGACION CARIOTIPO DEL CAMARÓN DE RÍO Cryphiops caementarius MOLINA 1872 (DECAPODA, PALAEMONIDAE). AUTORES : Dra. Orlinda Villanueva Valverde M.Sc. Walter Eduardo Reyes Avalos M.Sc. Jesús Ruíz Baca Blga. Acuic. Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez

2 INTRODUCCIÓN Murofishi et al. (1984) y Murofushi y Degushi (1990) fueron observados por un método clásico de aplastamiento seccional gónada (Orian, 1957, Bachmann, 1973 y Roberts, 1969) La mayoría de los cromosomas son pequeñas y son metacéntricos y submetacéntricos, lo que los hace difíciles de diferenciar Vishnoi, (1972). Por lo tanto, la discrepancia en el número de cromosomas de la misma especie ha sido reportada

3 Vishnoi, (1972), dos especies de cangrejo de agua dulce Acanthotelpusa martensi y Paratelphusa jacquementi tienen 88 cromosomas y 132, respectivamente Mittal (1971) y Roberts, (1969) mientras que el camarón de agua dulce Macrobrachium siwalikensisy la langosta americana, Homarus americanus, tienen 106 y 138 cromosomas respectivamente Niyama, (1952). Damrongphol et al. (1991) (2n = 376) se ha reportado en el cangrejo Actacus. Trawbridgii, han reportado que el cariotipo de Macrobrachium rosenbergii consiste de 118 cromosomas constituido por 6 pares de cromosomas grandes, 26 pares medianos, 15 pares pequeños y 12 pares muy pequeños, siendo la mayoría submetacéntricos y metacéntricos Los cromosomas de Penaeus japonicus (Marsupenaeus) estudiados por este método fueron de 86 en el número diploide El método de usar la regeneración de blastema parece tener varias ventajas sobre los publicados adoptadas para los decápodos

4 PROBLEMA Cuál es el cariotipo del camarón de río C. caementarius? HIPÓTESIS Implícita OBJETIVO GENERAL Determinar el cariotipo del camarón de río C. caementarius Molina 1872 (Decapoda, Palaemonidae). OBJETIVOS ESPECIFICOS Determinar el número de cromosomas del camarón de río C. caementarius. Identificar las clases de cromosomas de C. caementarius.

5 MATERIAL Y MÉTODOS Se trabajaron con 10 ejemplares de camarones adultos de C. caementarius, los que fueron capturados del Rio Pativilca ubicado a S O, Cuenca Pativilca, Provincia de Barranca, Región Lima, Perú Luego se trasladaron al Laboratorio de Bioquímica de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional del Santa, en recipientes plásticos. Fueron acondicionados en acuarios de 60 litros, y mantenidos con aireación constante.

6 la técnica de Lacra et al. (1997). fueron inyectados intramuscularmente con una solución de colchicina al 0,025% y se dejó reposar a los organismos por un periodo de 24 horas, posteriormente se sacrificó a los especímenes y se extrajeron las muestra del blastema y del hepatopáncreas se bañaron con una solución de KCl, con una pipeta Pasteur se homogenizó con una pipeta Pasteur se homogenizó la muestra y se agregó la suspensión a tubos de ensayo y se incubó en baño Maria a 37º C por un periodo de 30 minutos las muestras fueron centrifugadas a 1000 rpm durante 10 minutos y se eliminó el sobrenadante, posteriormente se agregó el fijador carnoy (Etanol-ácido acético 3:1) y se dejó reposar por un periodo de 15 minutos.

7 Las muestras se centrifugaron a 800 rpm y se eliminó el sobrenadante (se repitió el procedimiento 2 veces), se agregó 3 ml de solución carnoy y se homogenizó la muestra..para la observación en el microscopio se realizó la técnica del goteo sobre láminas porta objetos de una altura de 60 cm a 80 cm, se dejó enfriar a temperatura ambiente se coloreo 60 láminas con orceina acética, de las cuales en siete se observaron cromosomas utilizándose, un microscopios ópticos marca olympus y se fotografió las muestras utilizando una cámara digital

8 RESULTADOS De 60 muestras analizadas se observaron diez placas metafasica en muestras del blastema y hepatopáncreas de camarón procedente del río pativilca Fig.4: placas metafasica de los cromosomas de C. caementarius (muestra del blastema) Fig.5: placa metafasica de los cromosomas de C. caementarius (muestra de hepatopancreas)

9 DISCUSION Los análisis cromosómicos son de gran importancia para la identificación de especies y/o en la diferenciación de especies muy relacionadas taxonómicos, sistemáticos y evolutivos, entre otros. emplear la técnica de Lacra et al. (1997) debemos tener en cuenta que los datos cromosómicos no pueden ser interpretados aisladamente sino integrados con otros caracteres, fundamentalmente para establecer características cariotípicas Saez et al. (1978) (Fig. 4 y 5) en esta fase, se observa los cromosomas, donde la mayoría de cromosomas son metacéntricos, submetacéntricos, acrocentricos, sin embargo fue difícil diferenciarlos y realizar el conteo debido a su pequeño tamaño. Tal como obtuvieron en sus resultados Roberts, (1969).

10 la metodología usada, en este trabajo a sido efectiva, aunque el porcentaje reducido de placas metafásicas indican que se debe ajustar mas el protocolo para Camarón Cryphiops caementarius, esto pudo ser debido a la concentración de Colchicina, ya que estudios realizados por Rodríguez (1995), demostraron que a una solución de Colchicina al 0.25% en solución de dimetilsulfóxido obtuvo un 85 %.

11 CONCLUSIONES El camarón de río C. caementarius presenta cromosomas metacéntricos, submetracéntricos y acrocéntricos. No se logró determinar el número de cromosomas debido a su pequeño tamaño. RECOMENDACIONES Desarrollar una mejor técnica de tinción para la cuantificación de cromosomas en C. caementarius. Analizar el cariotipo de C. caementarius en una mayor cantidad de placas metafasicas.

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